Jean Danysz

“ En somme, pour avoir l'alcalinité convenable de 2 litres de gélose propre à la culture de bactéries, il faut y additionner : i° La quantité de soude normale nécessaire pour neutraliser son acidité naturelle, soit dans l'exemple considéré ci.dessus. 30 c. c.
2° 1 p. 100 de soude normale pour titrage alcalin propice à la culture de bactéries, soit pour 2 lit. 20 c. c.
en tout 5o c. c. de soude normale pour 2 litres de bouillon de culture. ”

“ L'opérateur les prend un à un, en enlève le bouchon de coton, en flambe l'orifice et en verse le contenu dans les boîtes de Pétri qui viennent d'être préparées, en en soulevant à peine le couvercle. Il dépose ensuite le tube vide danj un panier en fil de fer et prend soin de bien faire le mélange de l'eau avec de la gélose, en donnant à la boîte, de ses deux mains, une légère inclinaison dans tous les sens par un mouvement rotatoire. La gélose ainsi ensemencée se prend presque aussitôt après avoir été étendue sur toute la surface de la plaque. ”

“ L'alcalinité convenable ayant été ainsi déterminée, on filtre le bouillon sur du coton dans un entonnoir à réchauffement, puis, après l'avoir réchauffé de nouveau à l'autoclave, on le verse dans un entonnoir globiforme pour l'empêcher de refroidir, et on le distribue dans des tubes éprouvettes à raison de 10 c. c. environ par tube. ”

“ Boîtes de Pétri stériles ; Pipettes graduées stériles ; Etiquettes et crayon ; Bain-marie avec crépine à fond indépendant et un thermomètre ; Lampe Primus à un brùleur ; Lampe à alcool ; Pince en nickel ; Deux supports pour tubes à gélose; Verres à pied pour pipettes usées; Panier en fil de fer pour tubes vidés.
Opération. Le laboratoire doit être fermé pour n'offrir ni courant d'air, ni poussières.
On prend autant de tubes de gélose stérilisés, préparés d'avance en réserve, qu'on a d'échantillons d'eaux à analyser, et on les répartit dans la crépine du bain-marie
chauffé de goc à 95° c. ”

“ Autant que possible le nombre de colonies sur une plaque de culture ne doit pas dépasser 200.
Pour les eaux très chargées en bactéries le mode le plus pratique et généralement suivi est de n'en ensemencer qu'un 1/10" dec. c. et de multiplier par 10 le résultat de la numération pour obtenir le nombre de bactéries par centimètre cube.
Préparation de la soude normale NaOH N On appelle soude normale une solution de soude caustique qui neutralise un volume égal d'acide sulfurique SoIH2 normal. ”

“ Il est très important d'examiner les plaques après vingt-quatre d'incubation et de marquer sur le revers du fond de la boîte les colonies de bacilles coli déjà apparues, car il y en a qui perdent leur reflet vert au bout de quarante-huit heures, et, néanmoins, il doit en être tenu compte dans la numération totale.
Préparation de la solution alcoolique de la fuchsine
Dans une éprouvette graduée de 100 c. c. et bouchée à émeri, on met 10 grammes de fuchsine en poudre gros-
sière et on verse de l'alcool jusqu'au trait 100, vingtquatre heures avant l'emploi de la solution. ”

“ Le papier tournesol employé il cet effet doit être celui préparé spécialement avec du papier à écrire, ti que le papier tournesol ordinaire vendu pour des usages chimiquee n'est pas suffisamment sensible. ”