Albert-Paul Billet

“ L'état zoogléique commence à se manifester, quand les filaments commencent eux-mêmes à se dissocier en tronçons, ou à s'entrelacer, à l'état enchevêtré, ou bien encore quand les gaines se chargent de pigment ocreux. Il est presque exclusivement limité à la surface, et, par conséquent, il recherche l'oxygène de l'air. Il augmente en même temps que la putréfaction, et atteint son maximum de développement quand la putréfaction est à son apogée, c'est-ù-dire quand tous les êtres vivants, végétaux ou animaux, des liquides de culture ont péri. ”

“ Nous sommes persuadé que l'étude attentive du développement graduel de chaque bactériacée montrera que ce stade particulier de la segmentation du filament bactérien, en général, est beaucoup plus fréquent qu'on ne le croit, et que, s'il a échappé à
beaucoup d'observateurs, c'est qu'il est, comme dans B. ostëophilum extrêmement fugace.
Les filaments, nous venons de le voir, ne restent pas longtemps sous la forme de Leptothrix. Ils ne tardent pas à se segmenter en éléments de plus en plus courts. Selon les conditions de milieux, cette segmentation est plus active dans certains cas. ”

“ Dans les filaments monocladés où la division est très active, la période de dissociation (c'est-à-dire de mise en liberté, hors du filament, des éléments qu'il contient) peut se faire avant même que la première ramification ait lieu. Dans ce cas, très souvent, les derniers éléments en Bacterium raccourcissent tellement leur diamètre longitudinal, que celui-ci finit par se réduire à la dimension du diamètre transversal ; et, les deux extrémités courbes se rejoignant, on a un élément presque arrondi, ou tout au moins elliptique, se rapprochant alors du Coccus ou Micrococcus. ”

“ Enfin, sur la gélatine, nous n'avons jamais pu obtenir l'état zoogléique parfait, c'est-à-dire le groupement caractéristique des éléments en masses gélatiniformes et cérébroïdes. C'était une raison encore plus sérieuse pour nous faire abandonner ce procédé, puisqu'il nous privait du critérium morphologique que nous considérons comme essentiellement lié à la reconstitution future du cycle évolutif de notre Bactériacée. La gélose nutritive (1) , au contraire, nous a présenté tous les avantages requis pour la culture de B. Balbianii, et en particulier de son état zoogléique. ”

“ On sait, en effet, depuis longtemps, qu'il existe un moment où la putréfaction cesse d'être un terrain de culture pour les Bactériacées, et où, dans les liquides, on ne trouve plus d'éléments bactériens vivants, tout au moins à la surface : ils sont tous tombés au fond, en subissant un travail particulier de dégénérescence. ”

“ Remarquons, enfin, combien est importante la nature du terrain de culture, et que tel ou tel agent qui produit tel ou tel effet dans tel milieu, peut produire un tout autre effet, parfois un effet tout opposé, dans un autre milieu. Ainsi, une température de + 35 à 36°, qui donne, dans nos cultures à l'air libre, dans des macérations d'os gras, un développement zoogléique exagéré, opère, au contraire, la dissociation de ce même état sur la gélatine, ou sur des tranches cuites de carottes, de betteraves, etc. ”

“ A ce moment, si l'on ne transplante pas ces zooglées dans un milieu de culture nouveau, elles finissent, faute d'espace, par subir, dans leurs éléments, une sorte de dégénérescence granuleuse, avec hypertrophie de leurs parois : elles tombent au fond du liquide, et meurent. Si, au contraire, on les transplante dans un milieu convenable, on voit les éléments constitutifs se dissocier,
revivre à l'état de liberté, dans le liquide, et refaire des spores, qui reproduiront la plantule, avec son port ramifié caractéristique. ”

“ La capacité entière de la cellule est remplie par de la gélose nutritive, stérilisée et préalablement liquéfiée par la chaleur. On laisse refroidir sous la cloche humide stérilisée au sublimé corrosif, et on inocule la surface quand elle est encore à moitié fluide, avec une goutte de culture de zooglée très diluée dans l'eau de mer stérilisée. On recouvre le tout d'une lamelle couvre-objet préalablement passée à la flamme, et on appuie un peu sur la gélose, de façon qu'une couche très mince de cette dernière renfermant des éléments bactériens adhère à la face inférieure du couvre-objet. ”

“ Puis, la segmentation des éléments contenus dans les filaments devient plus active. En même temps, la gaine, de plus en plus lâche, se laisse distendre par les éléments et s'étire par le fait même de leur propre accroissement. C'est alors surtout qu'on voit ces chapelets d'éléments fusiformes juxtaposés bout à bout en chaînes plus oumoins liexueuses, et séparés seulement entre eux par de minces traînées membraneuses. — Enfin, les éléments situés aux extrémités commencent à se montrer animés de quelques mouvements, qui se communiquent bientôt à tout le filament. ”

“ Si l'on se rapporte à ce que nous avons dit sur le même état enchevêtré, pour Clad. dicholoma (p. 71) , on verra que, chez les deux Bactériacées, il y a une grande ressemblance dans la génèse et l'évolution de cet état particulier. De part et d'autre, en effet, les masses enchevêtrées se produisent surtout dans la profondeur des liquides, à l'abri de l'oxygène de l'air, tandis que celles qui atteignent la surface se désagrègent rapidement, sous la triple influence de la fermentation, de la température et de l'oxygène de l'air, pour passer, soit à l'état dissocié, soit à l'état zoogléique. ”

“ On le voit : cet état de zooglée joue un rôle physiologique très important. La plante, sous cet état, semble attendre un milieu favorable, où elle puisse de nouveau s'accroître, produire des spores et développer ses touffes ramifiées.
Le fait que, chez Cladothrix dichotoma, la zooglée a, dans sa forme et son évolution, une allure morphologique si caractéristique, nous a fait penser que, peut-être, on trouverait, chez d'autres Bactériacées, un stade zoogléique ayant également un cachet spécial et un développement particulier. ”

“ Pour observer cette succession de stades, il suffit d'étaler à la face inférieure d'un couvre-objet, une parcelle de la mince pellicule irisée, dont nous avons parlé plus haut, et de la placer au-dessus d'un porte-objet creusé en cellule, suivant le procédé maintes fois employé dans le cours de ces recherches. Le fond de la cellule est occupé par une gouttelette d'eau, de façon à transformer la cellule en chambre humide. La transformation s'opère mieux dans l'obscurité. C'est un fait que nous avons observé, d'une façon assez générale, chez les Bactériacées. ”

“ Ainsi, dans nos cultures d'hiver, le travail de dissociation se faisait avec une certaine lenteur, et les éléments dissociés étaient presque exclusivement des éléments rectilignes. En été, au contraire, ou si l'on soumet artificiellement les cultures à une température de 20 à 30° C., les éléments rectilignes évoluent rapidement vers la forme spiralée. Enfin, sans que la température s'élève notablement, si la putréfaction est assez active, on aboutit également à une prédominance d'éléments spiralés, et cela indifféremment dans une putréfaction de matières animales ou végétales. ”

“ Une autre question intéressante à élucider, c'est celle des cils moteurs, que nous avons trouvés, en règle générale, sur presque tous les éléments libres de Cladothrix, et principalement sur les
Vibrio et, les Spirillum. Toutefois un assez grand nombre d'éléments nous ont paru en manquer totalement, sans pour cela être privés de mobilité. De plus, nous n'avons jamais observé qu'un seul cil, à chaque extrémité, et non une touffe de cils, comme l'indiquent les figures de ZOPF. On sait que le cil de l'élément mobile est un des organes les plus délicats à observer. ”

“ Presque toujours toutes les colonies obtenues par ce nouveau fractionnement donnent des îlots cérébroïdes et orangés qui, pour nous, représentent comme l'état zoogléique de B. Balbianii. On a alors une culture que l'on peut considérer comme pure. Il ne reste plus, pour la conserver dans cet état de pureté, qu'à prélever une parcelle de cette culture, et à l'inoculer en strie sur de la gélose renfermée dans des tubes à essai fermés à l'ouate stérilisée, et que l'on a préalablement inclinés pour disséminer la gélose sur la plus grande surface possible. ”

“ Il n'est pas aussi constant que l'élément Bacterium court dont il provient, puisque nous ne l'avons jamais rencontré dans nos cultures en milieux nutritifs liquides.
Mais il existe à la fin de l'état zoogléique, au moment de la déhiscence des capsules. Il remplit alors les sillons des circonvolutions, et c'est lui qui donne à la zooglée sa couleur orangée.
Pour le faire naître de l'état filamenteux, il suffit de transplanter ce dernier (obtenu en milieu liquide) sur un milieu nutritif solide (gélose et gélatine) . ”

“ En résumé : les filaments monocladés renferment des éléments bactériens rectilignes, qui se segmentent de plus en plus, à mesure qu'ils s'approchent de l'extrémité libre, et dont le diamètre transversal va en s'allongeant, tandis que le diamètre longitudinal, au contraire, va en se raccourcissant. Cette segmentation active détermine donc la production des formes suivantes, en allant de la base au sommet : Leptothrix, Bacillus, Bacterium (long, court et elliptique) , que l'on rencontre ordinairement sur le même filament. ”