Gabriel Roux

“ En un mot, l'analyse microbiologique qualitative des eaux telle que nous la comprenons, telle que nous la pressentons, est ou plutôt sera une opération des plus longues, des plus délicates et des plus difficiles, à moins, tout est possible, que dans un avenir plus ou moins lointain, les bactériologues n'aient découvert des méthodes analogues à celles des chimistes, qu'il sera loisible de suivre à la lettre ou de modifier suivant les besoins. ”

“ L'air, le sol sont les deux grands facteurs de la contamination, auxquels viennent s'ajouter dans les contrées peuplées les déjections de l'homme et des animaux, les détritus de toutes sortes résultant de l'alimentation et de l'industrie, et jusqu'aux débris d'origine végétale qui, le long des cours d'eau surtout, viennent à chaque instant apporter non seulement de nouveaux germes vivants, mais encore les éléments de la nutrition de ces infiniment petits. ”

“ A l'avenir seul appartient le perfectionnement des méthodes et des résultats. Ayons donc confiance et travaillons à la réalisation de nos vœux !
Je n'ai maintenant que bien peu de choses à ajouter en ce qui concerne l'utilité et l'importance de l'analyse qualitative. Il serait vraiment puéril de faire ressortir les services rendus aux particuliers ou aux populations par l'analyste qui découvre dans leur eau d'alimentation le bacille de la fièvre typhoïde, celui du choléra ou tel autre microorganisme étroitement lié à l'étiologie d'une maladie infectieuse quelconque. ”

“ A ce moment, que leur contenu soit trouble ou limpide, on l'ensemence par le même moyen que précédemment dans deux autres tubes où les organismes subissent leur troisième passage en liquide phéniqué dans les mêmes conditions de température. On attend, cette fois, que le trouble se produise ; l'ensemencement de ce dernier liquide sur bouillon normal donne, après quelques heures d'étuve, une culture pure du Bacterium coli commune, du bacille d'Eberth, ou un mélange des deux espèces, comme on peut le vérifier par culture sur plaque de gélatine. ”

“ Les cultures pures du komma bacille présentent une réaction particulière trouvée par Brieger1, en 1887, puis étudiée la même année par Budjwid2 et Ali-Cohen, à laquelle on donne le nom de réaction du rouge du choléra ou Cholera-Roth.
Elle s'obtient en traitant le bouillon de culture par un acide minéral et notamment l'acide sulfurique, puis par l'éther qui dissout une substance d'un rose rouge ; elle a pendant quelque temps été considérée comme caractéristique du bacille-virgule en cultures pures (Budjwid) et aurait eu en ce cas une très grande importance. ”

“ Mais, dans la réalité, l'eau du ciel est loin de rencontrer, lors de sa chute, un sol vierge de toute souillure.
La croûte terrestre, sur une épaisseur plus ou moins considérable, très minime toutefois, mais en tout cas à sa surface même, contient des quantités énormes de germes de toutes sortes, microscopiques artisans des opérations incessantes d'analyse ou de synthèse dont la terre végétale est en même temps le laboratoire et l'objet. ”

“ Lorsque donc on veut rechercher l'organisme de la fièvre typhoïde dans des selles ou dans de l'eau, on place les bouillons ensemencés dans une étuve à 44°,5 — 45° centigrades. Si au bout de quarante-huit heures aucun des ballons n'est troublé on peut affirmer que le bacille d'Eberth n'y existe pas ; si au contraire quelques ballons ou même tous sont fertilisés, ou bien, le fait se produit assez souvent, ils renferment exclusivement le microbe cherché, ou bien ils contiennent en même temps d'autres bactéries banales. ”

“ L'analyse microbiologique des eaux, qui doit beaucoup, en France, aux longues et consciencieuses études de M. Miquel, constitue dans le domaine de l'hygiène publique et privée un incontestable progrès ; elle a singulièrement éclairé certains obscurs problèmes d'épidémiologie et l'on sait quel rôle elle a joué dans la grande lutte ouverte entre les partisans de la Grundwassertheorie et ceux de la Trinkwassertheorie.
Combien de lumineuses découvertes nous promettent pour un avenir prochain les acquisitions de ces
dernières années ! ”

“ Et il
ne faudrait pas croire qu'au point de vue de savoir si oui ou non une eau est bonne ou nocive, les microbes dits pathogènes nous intéressent seuls. Il en existe d'autres infiniment plus nombreux et plus répandus dans la nature qui, inoculés aux animaux, demeurent inoffensifs, lesquels cependant, par leurs propriétés biochimiques, sont capables de produire, dans les eaux ou dans le tube digestif, des altérations qui peuvent être nuisibles. ”

“ Lorsque je peux avoir à ma disposition un aide, celuici, au fur et à mesure que les tubes sont ensemencés avec les gouttes d'eau et bouchés, les prend et il les tourne entre les doigts, comme s'il voulait faire un tube d'Esmarch, il fait couler la gélatine dans tous les sens, en évitant de provoquer la formation de bulles d'air et il opère ainsi un mélange intime et une égale répartition des bactéries dans le milieu nutritif encore liquide.
A la rigueur, avec quelque habitude et un peu d'exercice, on peut se passer d'aide et mener à bien tout seul cette série d'opérations. ”

“ Il fallait naturellement indiquer les nouvelles méthodes d'observation et les perfectionnements d'anciennes ; donner une large place à l'étude de ces curieuses substances que produisent les Bactéries dans les milieux où elles vivent, bouillons de culture ou organismes vivants ; étudier enfin un nombre respectable d'espèces décrites par les chercheurs de tous pays qui s'adonnent avec tant d'ardeur à cette science. Ceci a été fait en s'efforçant de conserver le caractère, pratique qui a valu à ce Traité de Bactériologie un aussi grand succès. ”

“ On a beaucoup discuté et on discute toujours, plus encore peut-être aujourd'hui qu'à l'origine, sur l'utilité réelle, au point de vue de l'hygiène publique, de l'analyse microbiologique des eaux.
Les chimistes surtout, qui seuls étaient autrefois consultés sur la potabilité d'une eau et se trouvaient être, en cette matière, des oracles indispensables et tout puissants, ont protesté contre cette nouvelle branche de la Microbie. ”

“ J'irai plus loin et j'ajouterai que l'analyse quantitative ne cessera pas d'être importante, malgré les progrès que réalisera l'analyse qualitative, car il faudra toujours compter avec la mutabilité de la propriété des microbes. Inoffensifs sous un certain état, des bacilles ou des microcoques peuvent tout à coup, dans un milieu convenable, acquérir des qualités malfaisantes. Or, étant donnée cette perspective toujours menaçante, une eau sera d'autant plus suspecte qu'elle renfermera un plus grand nombre de germes quelconques. ”

“ Il en est de même des alcalis, puis des antiseptiques à proprement parler : sublimé, acide phénique, iodoforme, thymol, sels de plomb, de cuivre et de fer, acide borique et borate de soude, acides benzoïque, salicylique, cyanhydrique, iodoforme, thymol, saccharine et même comme l'a tenté Miquel, le
chlorure de sodium à la dose de 5 à 15 pour 100, la glycérine dans les proportions de 10 à 20 pour 100, et enfin l'iode ou le brome qui, ajouté en très faible quantité aux bouillons ou aux gelées nutritives, leur confère une infertilité des plus remarquables vis-à-vis d'un grand nombre d'espèces1. ”

“ J'y expose sans parti pris les principales méthodes d'analyse françaises et étrangères.
La science française a assez fait pour la Microbie; elle est suffisamment riche de noms qui comme ceux de Pasteur, Chauveau, Toussaint, Arloing, Duclaux, Straus, Chante-messe, Cornil, Raulin, Roux, Chamberland, Bouchard, Charrin, etc., sont attachés aux premières ou aux plus importantes découvertes de la science nouvelle pour que nous nous montrions généreux et accueillions ce que d'autres à l'étranger ont pu découvrir. ”

“ L'eau suspecte, dans le nouveau procédé d'analyse préconisé par M. Péré, est transformée en un terrain de culture suffisamment nutritif, dans lequel la présence d'une proportion déterminée d'acide phénique, sans empêcher la multiplication des germes du bacterium coli commune et du bacille typhique, met obstacle à celle des espèces étrangères, ainsi que l'a démontré la pratique des procédés usuels. ”

“ Lorsque donc on voudra rechercher dans une eau le vibrion septique, la méthode des inoculations, utilisable avec les vases, devra être rejetée et il faudra avoir recours aux cultures, en se souvenant toutefois que le Bacillus septicus est un anaérobie vrai et qu'il exige pour végéter un milieu absolument dépourvu de toutes traces d'oxygène. Les spores peuvent être exposées à l'air sans pour cela périr, mais elles sont incapables de germer dans ces conditions. ”

“ Un trouble se produit dans le cas d'une eau polluée par les espèces susdites, non pas à heure fixe, mais d'autant plus vite que la pollution est plus forte et que la température s'est maintenue plus élevée dans les limites assignées. On pourra déjà observer ce trouble vers la douzième heure, généralement entre la quinzième et la vingtième heure, mais seulement vers la trentième heure si la pollution est réduite à des traces : circonstance qui ne se présentera que rarement, sans doute, mais que l'on peut réaliser par l'expérience. ”

“ Le puisage de l'eau à des profondeurs variées peut être rendu nécessaire dans diverses circonstances, soit qu'il s'agisse de se procurer un échantillon de l'eau d'un puits qui n'a pas de pompe, soit qu'on veuille étudier, ce qui, en certains cas, présente un très grand intérêt, les tranches successives d'un lac, d'une rivière ou d'une nappe liquide quelconque. ”

“ Pour apprécier la nature bonne ou mauvaise, innocente ou nuisible d'une eau qui doit servir de base à l'alimentation des individus ou des populations, une méthode unique, un seul caractère ne peuvent suffire, et il est sage de recourir à tous les moyens, même les plus minimes, que nous avons à notre disposition. ”

“ Bien préférable est le caractère tiré de la liquéfaction de la gélatine nutritive qui a permis à Eisenberg et à Lustig d'établir des divisions fondamentales. Et encore, je dois le reconnaître, il y a ici parfois quelque indécision, certaines colonies ne fluidifiant que très tardivement la gélatine, ce qui pourrait les faire placer, au début, parmi les non-liquéfiantes, et certaines autres se comportant à ce point de vue de façon assez variable, suivant leur état de vitalité, de jeunesse ou de vieil-
lesse, etc., fluidifiant dans certains cas, ne fluidifiant pas dans d'autres. ”

“ Mais il faut bien savoir que l'on ne trouvera pas dans les cultures artificielles les longs filaments articulés que l'on rencontre dans le sang et surtout à la surface du péritoine des animaux inoculés (fig. 43) et que l'on n'y constatera pas non plus des mouvements aussi nets. Comme ce n'est guère qu'à une température de 37° centigrades que le vibrion septique se développe avec une certaine énergie, on devra, comme milieu nutritif de dissociation, employer la gélose. ”

“ La stérilisation est opérée à une température variant entre 115° et 130°, et il suffit de 1 kilogramme de charbon pour stériliser 100 litres d'eau. Encore une fois, je ne considère pas cet appareil comme faisant partie du laboratoire d'analyses, mais il est bon que le médecin et l'hygiéniste le connaissent, afin de pouvoir s'en servir, le cas échéant, en temps d'épidémie. C'est lui, en effet qui, d'après le docteur Gabriel Pouchet, qui a
étudié avec soin son fonctionnement 1, donne, au point de vue bactériologique surtout, les résultats les meilleurs et les plus constants ”

“ Le développement de ses colonies sur plaques de gélatine est beaucoup plus rapide que celui du spirille de Koch ; la liquéfaction est aussi plus hâtive, ce que l'on observe bien surtout dans les cultures sur gélatine-piqûre ; ses effets pathogènes sont moins marqués.
Cornil et Babès 2 signalent dans les selles des cholériques un organisme quel'aspect de ses colonies pourrait faire confondre avec le bacille virgule, mais qui en diffère en ce qu'il liquéfie plus lentement la gélatine et, mieux encore, en ce qu'il n'est ni courbe, ni mobile. ”

“ L'acide phénique à la dose employée ne tue certainement pas tous les germes autres que celui de la fièvre typhoïde qui peuvent exister dans les selles, mais il éloigne les plus gênantes en empêchant notamment la pullulation de ceux qui liquéfient la gélatine, et l'on sait quel désastreux effet produisent ces derniers dans les cultures sur plaques ou en tubes d'Esmarch. ”

“ En tout cas, toujours d'après C. Fränkel et la plupart des autres auteurs, les ensemencements avec de la terre prise à 4 et 5 mètres, même alors que cette profondeur appartient à la zone de la nappe souterraine, ne donnent plus de colonies ou n'en donnent que très exceptionnellement.
Le sol, en effet, qui dans ses couches superficielles constitue, dans la plupart des cas, un excellent milieu de culture pour les microbes aérobies perd, dans ses portions profondes, la majeure partie de ses qualités et notamment celle de pouvoir servir de milieu respiratoire. ”

“ L'examen bactériologique de l'eau qui consiste uniquement à déterminer le nombre des germes vivants contenus dans un centimètre cube de liquide ne correspond pas entièrement aux exigences de la science moderne. On exige davantage ; il est nécessaire d'obtenir, isolées en cultures pures, les diverses espèces de bactéries et d'indiquer leurs propriétés biologiques ainsi que toutes celles qui contribuent à la connaissance de l'action qu'exerce chaque forme déterminée sur les différentes substances nutritives1. ”