Carl Bernhard Lehmann

“ L'expulsion des microbes hors de l'organisme se fait par les matières fécales, par l'expectoration, par le processus de la suppuration, par la bile, l'urine, le lait, la sueur et le sperme. Dans l'état actuel de nos connaissances, on doit admettre toujours l'existence de petites lésions vasculaires du foie, du rein et de la mamelle — quand il n'y a pas une maladie plus grave, — qui permettent l'expulsion des germes de la maladie. ”

“ On infecte d'abord un animal sensible — de préférence de tout jeunes animaux de l'espèce la plus sensible, par exemple de tout jeunes cobayes, — et quand l'animal succombe à l'infection, on transporte l'agent microbien (directement avec le sang de l'animal expérimenté) sur des exemplaires de la même espèce très sensible, mais toujours plus âgés, et partant plus résistants, puis ensuite sur une espèce animale plus résistante. Chaque passage par l'animal augmente la virulence, jusqu'à ce qu'enfin un certain maximum soit atteint. ”

“ Morphologiquement il est particulièrement caractérisé par ce fait que le corps des bacilles après la sporulation s'ouvre sur un côté, et forme une espèce de capsule qui entoure d'une façon durable les spores du bacille, qui présentent ensuite une germination polaire. Au point de vue biologique, le microbe peut assimiler l'azote de l'air, et peut faire fermenter beaucoup d'hydrates de carbone, mais pas l'amidon, la lactose, la mannite ni la glycérine : il produit de l'acide butyrique pur, mais pas d'alcool butylique. ”

“ Nous avons appris, par exemple, que les formes microscopiques varient dans une très grande étendue sur des milieux de culture différents, que des formes ramifiées apparaissent, que la liquéfaction de la gélatine, la formation du pigment, le trouble du bouillon, la formation d'un voile ou d'un dépôt, le pouvoir fermentatif, et le pouvoir pathogène ont une intensité extrêmement variable qui peut aller d'un maximum à l'absence complète ”

“ Dans le sang des animaux, immédiatement après la mort, les bacilles font habituellement défaut à l'examen microscopique, mais il est facile de les y déceler néanmoins par la culture; les bacilles se répandent très rapidement partout après la mort, et ils prennent le plus souvent la forme de longs filaments. Un fait particulièrement caractéristique, d'après Schattenfroh et Grassberger, est la présence pendant la vie de filaments plus ou moins longs à la superficie du foie. ”

“ Il est intéressant de remarquer que les matériaux qui favorisent la culture (gypse) ne favorisent pas la fermentation de l'urée ; il semble qu'il y ait d'autant moins d'urée formée que le développement marche plus rapidement.
Pour isoler les espèces dédoublant l'urée, on recommande l'emploi de bouillon alcalin renfermant 2 % d'urée, et pour avoir des cultures pures l'emploi de peptone gélatinée avec 2 % d'urée. Les colonies de microbes dédoublant l'urée s'entourent d'un champ clair de carbonate et de phosphate de chaux, et sont ainsi facilement reconnaissables. ”

“ Si on laisse agir sur une culture une température dépassant de 5 ou 10 degrés son optimum, les microbes sont altérés dans différentes directions : ainsi prennent naissance des races d'intensité moindre de croissance ; la virulence, le pouvoir fermentescible s'affaiblissent ; la sporogenèse se perd peu à peu. Tantôt l'altération s'accentue dans un sens, tantôt dans un autre.
Si la température maxima est dépassée, la culture meurt, et cela arrive pour les espèces psychrophiles, environ à 37°, qui est pour elles une température assez rapidement mortelle ”

“ Comme, dans beaucoup d'espèces, l'acidification,c.-à-d. la décomposition du sucre, est rapide et intensive, on désigne cette décomposition se produisant aux dépens du sucre ajouté au milieu par dédoublement sous le nom de fermentation.
Beaucoup de Bactéries, qui attaquent fortement la saccharose, attaquent à peine le lactose, par ex. Bact. enteritidis, ce qui est important pour le diagnostic. Si, le sucre ayant été complètement consommé, la quantité d'acide produite n'est pas suffisante pour tuer la culture, les réactions ordinaires sur milieux non sucrés vont pouvoir se produire ”

“ Les microbes sont mobiles; cils péritriches (20 à 4o) ; renferment sur les milieux de culture des granulations (qui se colorent en bleu par l'iode) ; produisent le plus souvent une spore centrale, plus rarement (notamment sur le sérum) une spore terminale ; font fermenter les hydrates de carbone, jamais en alcool, mais en acide lactique, qui se transforme ensuite en acide propionique et surtout en acide butyrique. La fermentation se produit même lorsque la sporulation évolue vers les formes clostridiales. Les lactates sont aussi transformés en acide butyrique. ”

“ L'infection est secondaire aux plaies de la peau ou des muqueuses. Parmi les animaux d'expérience sont particulièrement sensibles : les boeufs de 1 à 3 ans (les veaux au-dessous de 6 mois le sont moins) , les chèvres et les moutons, et tout particulièrement le Cobaye et la souris (le rat l'est un peu moins) ; l'homme jouit d'une immunité naturelle, de même que le porc; chez les chiens, les chats et les lapins, la maladie est rarement mortelle; le cheval et les espèces voisines ont seulement une réaction locale après l'inoculation. ”

“ Mais le « coli » que l'on trouve est-il toujours le coli de l'homme ou un des nombreux paracoli qui existent un peu partout. Sans doute, si l'on regarde le coli comme l'hôte exclusif de l'intestin de l'homme et des animaux, une eau renfermant ce coli est une eau souillée de matières fécales. Mais il faudrait démontrer que tout coli trouvé dans l'eau provient bien de l'homme ou de l'animal.
Eijkmann, pour trouver le coli dans l'eau, recommande la culture à 46°, température qui gêne les microbes de l'eau, et permet la croissance du coli. ”

“ Méthodes spéciales pour le diagnostic et la culture. — Diagnostic : chez l'homme, à l'oeil nu par la constatation de grains actinomycosiques (grains jaunes) avec confirmation sous le microscope (sans coloration ou avec double coloration) .
Culture : elle est inutile le plus souvent pour le diagnostic; quand on veut faire une culture, on ensemence en strie des tubes de sérum ou d'agar-ascite en très grand nombre (50 et plus d'après Bostrôm, car 2 % seulement réussissent) ; il faut broyer finement le contenu de la tumeur actinomycosique dans un mortier. Température de l'étuve. ”

“ Culture sur pomme de terre. — Tout d'abord culture limitée à la strie d'ensemencement, plate, humide, rose ou rouge. Plus tard, elle devient très foncée, surélevée, à bord ondulé, et, en 5 ou 6 jours, elle acquiert sa couleur rouge pourpre sombre [29, IX, 3o-X] . Parfois, on voit à la surface un reflet vert doré, pareil à celui de la fuchsine desséchée. De même que la culture sur agar, la culture sur pomme de terre se fait parfois d'une façon atypique, et est gris blanchâtre, orangé, rouge brique ou rose, au lieu de rouge pourpre [29, X] . ”

“ L'investigation hislologique doit montrer une prédominance de tubercules vrais avec des cellules géantes, et surtout on ne doit pas pouvoir obtenir de culture, avec les nodules et les tubercules, sur les milieux ordinaires, à la température de la chambre, mais on peut isoler le B. T. vrai par des cultures sur agar-ascite glycérinée à la température de l'étuve. Comme la mort du cobaye tuberculeux ne survient dans la plupart des cas que 6 semaines seulement après l'infection, les acido-résistants qui auraient été inoculés en même temps sont résorbés et disparus. ”

“ Le microbe a été rencontré par Emmerich et Weibel dans une épidémie survenue sur les truites dans la Haute-Bavière. Ils ont pu tuer les truites saines, aussi bien par l'inoculation qu'en ajoutant le microbe à l'eau de l'aquarium. Les symptômes capitaux de la maladie étaient : une desquamation des écailles sur une étendue de la dimension d'une lentille, puis à cet endroit apparaissait une sorte de furoncle, qui devenait secondairement un foyer de suppuration et d'hémorragie. On trouve le bacille très facilement chez les animaux malades, principalement dans le sang du coeur. ”

“ On peut aussi tuer des animaux, avec les symptômes du tétanos, par l'inoculation de poison tétanique stérile; mais l'injection de petites doses répétées de cette toxine que l'on augmente prudemment peut conférer une immunité active très forte contre le tétanos. On peut de plus conférer l'immunité passive à d'autres animaux facilement par un sérum riche en anti-toxine ; on peut ainsi sauver avec de grosses doses de sérum les petits animaux infectés, mais beaucoup plus difficilement les chevaux. ”

“ Les anaérobies facultatifs poussent bien dans l'azote et dans l'hydrogène. Dans le CO 2, ils se comportent de façons très diverses.Les uns (par ex. B. anthracis, subtilis) ne poussent pour ainsi dire plus, tant que l'oxygène ne leur est pas rendu; il est même démontré pour le charbon et pour le choléra que Co 2 tue la plupart des germes, à l'exception de quelques unités très résistantes, ce qui, dans ce cas, rendrait illusoire la stérilisation par CO 2. — Les autres, surtout cultivés à l'étuve, ne fournissent que des cultures misérables (staphylocoque, streptocoque) . ”

“ Les substances toxiques sont précipitables par l'alcool, à peine dialysables. Elles sont entraînées avec le précipité de phosphate de chaux (par addition de chlorure de calcium au bouillon) . Les températures supérieures à 6o° amoindrissent rapidement la toxicité; on peut obtenir la toxine en poudre par l'action de l'alcool (précipitation) , puis dessiccation dans le vide. On trouve de la toxine non pas seulement sur les milieux renfermant de l'albumine, mais aussi sur les milieux qui n'en renferment pas : urine alcaline (Guinochet) , milieu d'Uschinsky. ”

“ Enfin les différences caractéristiques de la germination manquent complètement dans beaucoup de genres. Pour toutes ces raisons, le mode de genèse des spores a une valeur considérable, mais non décisive, et ne peut suffire pour caractériser une espèce. Tel est aussi l'avis de Gottheil.
Pour observer la sporogenèse, on laisse sécher des spores en couche mince sur une lame de verre, on ajoute une goutte d'agar ou de bouillon, et l'on examine la germination de spores isolées en goutte pendante sur la platine chauffante. ”

“ L'addition répétée d'ammoniaque rend les colonies plus belles ; celles-ci sont facilement visibles sur la plaque complètement éclaircie. La meilleure façon de faire le repiquage est d'employer une pipette capillaire, dont on brise la pointe dans la culture liquide elle-même. On favorise justement la culture par l'addition périodique de sulfate d'ammoniaque, une culture pure ne doit jamais, si on la repique dans du bouillon, donner naissance à un trouble dans ce milieu. ”

“ Les bactéries en culture pure ont des affinités très différentes pour les milieux de culture, suivant leur composition.
Dans l'eau (même stérilisée plusieurs fois, et presque dépourvue de substances nutritives) , un certain nombre de germes, notamment les bactéries de l'eau, subsistent encore bien et donnent au repiquage des cultures luxuriantes sur l'agar ou la gélatine. Il y a tout un groupe de microbes qui se développent surtout dans les liquides très pauvres en substances organiques (azotées et carbonées) (Winogradsky et Beijerinck) . ”

“ La levure se développe sur gélose et donne des colonies isolées, de couleur blanc jaunâtre, café au lait ; la culture est opaque, épaisse, ridée au centre, en étoile plus ou moins irrégulière ; à la périphérie on voit de très fines arborescences parallèles, noyées dans la gélose; sur gélose en strie, on voit se développer une traînée homogène lisse, d'aspect gélatineux sur gélose sucrée. Elle se développe mal sur la gélatine, qu'elle ne liquéfie pas. ”

“ La virulence se conserva seulement par le repiquage de la race sur pomme de terre crue; elle disparut par une seule culture sur un milieu artificiel, mais on pouvait la remonter en cultivant de nouveau sur des disques de pomme de terre crue alcalinisée. L'action des bactéries fut rattachée à une substance dissolvant la lamelle moyenne (substance unissante entre l'écorce et le liber) , et à un poison du protoplasma végétal. La résistance des différentes sortes de pomme de terre fut très variable, la fumure avec de la chaux la diminuait; la fumure avec du phosphore l'augmentait. ”

“ Toute fermentation a pour but de procurer à l'organisme qui la produit une provision d'énergie, ce qui est réalisé par la fermentation dédoublante, en réduisant à l'intérieur de la cellule microbienne la molécule plus compliquée susceptible de fermentation en des molécules plus petites ; ainsi est libérée l'Energie. Nous montrerons combien la chose est simple pour un exemple d'ordre banal, la fermentation du sucre. ”

“ Une bonne mesure de la virulence d'une culture est fournie par la toxicité du filtrat d'une culture d'un âge déterminé (1) . Escherich a proposé d'indiquer la virulence d'une race par la quantité de culture âgée de 24 heures, faiblement alcaline, exprimée en % du poids du corps, quantité juste suffisante pour produire la mort du cobaye par diphtérie aiguë, à la suite d'inoculation sous-cutanée. Avec 3,5 cmc, c'est-à-dire 0,5 % du poids du corps, Escherich n'a jamais obtenu de résultat négatif. ”

“ On commence à concevoir qu'à part trois ou quatre espèces qui agissent par une toxine réelle, la plupart des microbes pathogènes doivent à quelque autre chose qu'à une toxine leur pouvoir nocif : ainsi, la gravité du choléra est attribuée par Emmerich à l'intoxication par les nitrites surproduits par le vibrion; dans la septicémie du lapin, la méthylguanidine formée par le microbe joue, selon Hoffa, un rôle prépondérant; dans le rouget du porc, dans l'oedème malin, c'est l'hydrogène sulfuré dégagé qui, transformant l'hémoglobine en métémoglobine sulfurée, devient un facteur d'aggravation. ”

“ La virulence du microbe est souvent considérable lorsqu'il est fraîchement isolé de l'homme, mais parfois aussi, dans ce cas, elle est très faible pour les- animaux. Par la culture sur nos milieux artificiels, elle s'atténue parfois très rapidement, parfois elle diminue à peine. La virulence augmente pour une espèce donnée par des passages successifs de l'animal à l'animal (Terni) , ou par l'inoculation simultanée d'autres bactéries (Ortolani et de Blasi) , ou encore par l'inoculation des produits de sécrétion de ceux-ci (par exemple Bact. vulgare) . ”

“ L'agglutination s'observe surtout pour les Bactéries mobiles : les microbes, pour Kühneman, s'enchevêtreraient par leurs cils. Pourtant les microbes immobiles sont susceptibles d'agglutination qui se traduit par la sédimentation de la culture (1) .
L'agglutination n'est pas un processus biologique, mais un phénomène physico-chimique, car les microbes tués (par le chloroforme, le formol, la chaleur) sont agglutinables. ”

“ Sur le sang et le sérum sanguin, les spores sont arrondies et terminales dans toutes les espèces. En général le sucre et la glycérine dans les milieux troublent considérablement la sporogénèse, qui cesse même souvent très rapidement. Cette influence est plus marquée pour le charbon symptomatique et l'oedème malin que pour le tétanos. Le mieux pour observer la sporulation est d'aspirer la sérosité péritonéale dans une pipette que l'on ferme ensuite à ses deux extrémités. ”

“ On n'a guère employé la réaction des précipitines jusqu'à présent, pour le diagnostic bactériologique (tuberculose) . Certains auteurs considèrent la précipitine comme analogue à l'agglutinine. Les précipitines spécifiques qui prennent naissance après injection d'albuminoïdes de végétaux ou d'animaux d'espèce étrangère ont une signification pratique beaucoup plus grande. Le sérum d'un lapin que l'on a inoculé avec du lait de vache précipite le lait de vache, mais ne précipite pas du tout ou du moins à de très fortes concentrations le lait des autres animaux. ”