Colony (microbiologie)

“ Par le refroidissement, chaque germe est en quelque sorte enrobé dans une masse consistante, immobilisé, et ne peut se développer que sur place. Il forme ainsi une colonie pure et distincte de ses voisines, si la dilution dans la gélatine a été suffisamment étendue. Le nombre des colonies, faciles en général à compter, donne le nombre des germes ensemencés susceptibles de vivre dans le milieu nutritif employé. Il y a plus, comme la physionomie des colonies change avec la nature des microbes, le seul examen à la loupe de la culture permet de reconnaître le nombre des différentes espèces. ”

“ J'ai obtenu la preuve qu'une seule colonie pouvait provenir d'un grand nombre de bactéries, en touchant une colonie de bactéries avec une fine aiguille de platine et en piquant ensuite légèrement et avec soin cette aiguille dans la gélatine nourricière : bien que d'innombrables bactéries adhérassent à l'aiguille, on ne voit se former qu'une nouvelle colonie. ”

“ Les cultures sur milieux solides facilitent enfin l'isolement des germes. Si, après avoir ramolli à une douce température un tube de gélatine, on l'ensemence et on l'étalé ensuite sur une plaque de verre, la gélatine ainsi étalée se solidifie; chaque germe inoculé se développe isolément pour son compte, en donnant une colonie particulière qui ne se confond pas avec les voisines. En semant une de ces colonies sur un milieu quelconque, on est sûr d'obtenir une culture pure du microbe qu'elle représente. ”

“ Les colonies qui cultivent dans ces conditions appartiennent à un très petit nombre d'espèces, souvent deux ou trois, quelquefois quatre, très rarement à un plus grand nombre.
Un examen microscopique minutieux des colonies et des prépations faites avec un prélèvement de ces colonies permet d'éliminer de suite un certain nombre de ces espèces représentées par des coccus (coccus ureæ, coccus candicans, coccus plumosus) ou de forts bacilles (bacillus acidi laclici, b. albus, b. fluorescens long us, b.
urese) impossibles à confondre avec le bacille-coli ou le bacille typhique. ”

“ Si l'on mélange une quantité d'eau déterminée avec de la gélatine liquéfiée et si l'on verse celle-ci sur une plaque de verre, les différents germes sont disséminés sur une grande surface et y donnent naissance à des colonies. Chaque colonie correspond, par conséquent, primitivement à une bactérie. ”

“ A la longue,
après les vingt ou trente premiers jours, la culture change d'aspect, les colonies envahissant tout le milieu nutritif. Les cultures conservent leur virulence après une longue série de générations successives; la même culture peut rester virulente pendant plusieurs mois et même plus d'un an; mais elle s'atténue progressivement, à partir d'un certain moment, et perd ensuite sa virulence ainsi que sa végétabilité, surtout quand elle est exposée à l'air, quand elle est en couche mince, ou quand elle n'est pas soustraite à l'action de la lumière. ”

“ « On recueille les colonies qui se sont développées « au bout de deux heures, et on les ensemence dans « un tube d’eau peptone contenant un peu de sérum « agglutinant. Quelques heures plus tard, le bouillon « est clair et les colonies typhiques développées sont « rassemblées au fond du tube par le fait de l’aggluti-« nation. Tout tube troublé uniformément ne contient « pas le bacille typhique, ou du moins ne le contient « pas à l’état de culture pure ». ”

“ Les colonies ne tardent pas à se développer en taches diversement colorées sur le papier nutritif : tantôt elles sont très confluentes si l'eau est impure, tantôt elles sont rares quand l'eau est pauvre en bactéries et en mucédinées. ”

“ Puis on passe à l'examen de la plaque où on reconnaît les colonies coliformes qu'on identifie par ensemencement dans la gélatine lactosée, dans le lait, dans un bouillon peptone pour indol, et dans un tube de bouillon ordinaire pour faire un séro-diagnostic. Par ce procédé on sait rapidement s'il y a peu ou beaucoup de coli, c'est l'essentiel.
Le contrôle de la culture est très important, car un certain nombre d'autres bacilles troublent les bouillons phéniqués. C'est ainsi que le brunneus, le crémoïde, le carneus, etc., donnent des cultures en bouillon phéniqué en vingt-quatre heures. ”

“ En premier lieu, il faut assurer le bon renom sanitaire de la colonie en maintenant le nouveau laboratoire de bactériologie doté des fonds nécessaires, afin de détruire, par les moyens scientifiques modernes employés à Cuba, Rio-de-Janeiro, Panama et Colon, les maladies locales ou épidémiques, telles que le paludisme, la fièvre jaune, la variole, etc. ; l'île débarrassée de ces fléaux évitables qui, depuis deux siècles, ont arrêté son développement, sera bientôt réputée comme très saine ”

“ Je dois également avertir l'expérimentateur que les taches microphytiques ne sont pas habituellement constituées par des cultures à l'état de pureté; il suffit pour s'en convaincre de saisir ses colonies, de les ensemencer dans le bouillon, puis, avec ce bouillon altéré, de fabriquer des plaques. La plupart du temps, on voit apparaître sur la gelée des colonies hétérogènes d'aspect, que le microscope, comme la culture et l'examen des fonctions biochimiques, démontre appartenir effectivement à des organismes très différents. ”

“ L'eau suspecte, dans le nouveau procédé d'analyse préconisé par M. Péré, est transformée en un terrain de culture suffisamment nutritif, dans lequel la présence d'une proportion déterminée d'acide phénique, sans empêcher la multiplication des germes du bacterium coli commune et du bacille typhique, met obstacle à celle des espèces étrangères, ainsi que l'a démontré la pratique des procédés usuels. ”

“ Sur des plaques de gélatine on obtient des colonies rondes, blanches, un peu grenues. Dans les cultures par piqûre, il se développe un clou à tête jaunâtre, brillante, de couleur crème. Celle couleur est plus prononcée sur agar-agar. A la température de la chambre la culture se développe lentement. Dans la profondeur, elle forme des globules confluents ; sur la pomme de terre il se développe en 2 jours des colonies proéminentes un peu jaunâtres, brillantes; plus tard la couleur jaune est plus prononcée, les colonies restent limitées et d'une épaisseur de i millimètre. ”

“ Au microscope, ces colonies ne présentent pas de dessin, et sont plus ou moins transparentes. La culture sur gélatine en piqûre présente à son extrémité supérieure une colonie arrondie, lisse, poussant lentement, de coloration jaune intense, tirant parfois un peu sur le vert ; cette colonie s'enfonce très lentement, sans liquéfier la gélatine. Cultures sur agar, analogues. Sur pomme de terre, enduit délicat, jaune verdâtre, sec, et brillant mat. Trouble léger dans le bouillon, sans production notable d'H2S et d'indol. La glucose n'est pas attaquée, le lait n'est pas coagulé. ”

“ Maintenant qu'il existe dans la colonie, un service scientifique spécialisé, il conviendrait, à notre avis, que la direction du Service de l'Agriculture insiste auprès de ses agents pour qu'ils s'intéressent aux questions de pathologie végétale. C'est par ce moyen seul que l'on pourra connaître assez rapidement l'état sanitaire des cultures du pays, la répartition et l importance relatives des maladies et des parasites suivant les régions. Cela permettrait aussi de rassembler des données biologiques sur lesquelles pourraient être basés des traitements. ”

“ Cultures ressemblant beaucoup à celles du M. prodigio- sus, mais c'est un véritable bacille restant tel sur tous les milieux, ayant 2,5 μ à 8 et 10 μ de long sur 0,7 μ à 0,8μ de largeur.
Sur plaques. — Dans la profondeur, colonies ovales, à contour entier ou sinueux, blanches à l'œil nu, d'un jaune pâle au microscope. Colonies superficielles, colorées en rouge sang, s'étalant largement, à contour sinueux, entourées d'une zone claire, liquéfiant lentement la gélatine dès le cinquième jour. Les colonies profondes restent incolores. ”

“ On procède ensuite à l'ensemencement de chaque colonie initiale, prise sur plaque, sur une série de milieux nutritifs dont les principaux sont d'ordinaire : le bouillon peptonisé de Lœffler, la gélose, le sérum sanguin, la gélatine peptone, en piqûre et en strie (fig. 32 et 33) la pomme de terre, auxquels on peut adjoindre dans certains cas particuliers : l'urine, le lait, les substrata liquides ou solides faits avec le touraillon (résidu de l'orge germé) etc., etc. ”

“ A la saillie considérable au-dessus de la surface correspond un pouvoir réfléchissant très fort. Les colonies sont arrondies, à bord uni ou lobulé, bien délimité, jaunâtres ou vertes, brillantes et plus ou moins granuleuses. Très souvent la colonie superficielle est entourée d'une zone très mince, transparente, lobulée, qui se produit sous un aspect très peu différent aussi sur les autres milieux ; à un fort grossissement cette zone se montre constituée souvent très manifestement par des files arquées de bactéries. ”

“ Les dangers provenant du sol sont réels si on démontre que les germes pathogènes peuvent s'y conserver, s'y multiplier et être transportés jusqu'à l'homme.
La survie des agents infectieux dans les corps enterrés peut varier suivant les espèces de quelques jours à plusieurs mois et même plusieurs années. Parmi les espèces qui ont la plus grande longévité et conservent le mieux leur virulence sont les espèces les plus dangereuses pour les habitants des pays chauds: le choléra, la peste, la fièvre jaune. ”

“ Sur gélatine, en tubes d'Esmarch, et à la température de 15° C, ces organismes se développent aisément et donnent naissance à des colonies ressemblant un peu aux colonies du bacilluscoli, découpées à la circonférence, ayant un point central obscur et présentant à la loupe l'aspect en glacier attribué aux colonies sur gélatine du bacille d'Eberth. Elles sont irisées et ne liquéfient pas. Vus au miscroscope, les microorganismes paraissent un peu plus longs que ceux du bouillon et ont l'aspect franchement bacillaire. ”

“ Partant de cette hypothèse, presque toujours certaine, que chaque amas isolé ou chaque colonie ne doit son existence qu'à un germe, la numération de ces colonies équivaut à la détermination du nombre des germes qui existaient primitivement.
Ce n'est que dans les cas où l'eau n'offre qu'une faible teneur en bactéries qu'il est possible de déterminer avec une exactitude absolue le nombre des colonies ; on devra la plupart du temps se contenter d'une évaluation approximative. ”

“ C'est du chancre, leur première colonie, qu'émigrent les microbes spécifiques pour se répandre ensuite, par une série de colonisations, dans l'économie tout entière. Mais, notez bien ceci, comme le microbe est un être vivant qui a besoin de proliférer pour coloniser, et comme il lui faut pour proliférer un temps appréciable, la diffusion de la syphilis ne saurait plus, avec lui, être soudaine, instantanée. ”

“ Les bactéries sont si nombreuses dans l'eau que le professeur Proust, inspecteur général des services sanitaires, a constaté que l'eau de la Vanne, réputée pour sa pureté, renferme plus de dix mille colonies par centimètre cube. Une colonie est une agglomération considérable de bactéries formant un petit point blanc sous la forme d'une petite sphère opaque, quand on cultive les bactéries dans une solution de gélatine. ”

“ Considérant que la loi de 1902 sur la protection de la santé publique vient d'être rendue applicable à toutes les vieilles colonies ; que cette loi comporte l'institution de bureaux d'hygiène clans chacune de ces possessions et que le fonctionnement d'un bureau d'hygiène nécessite à côté de lui l'installation d'un laboratoire de bactériologie, destiné à étudier les mesures à prendre contre les maladies épidémiques que les moyens actuels de prophylaxie étiologique nous permettent d'éviter (paludisme, fièvre jaune, peste, choléra, variole, etc.) ”

“ Lorsque beaucoup de colonies siègent les unes à côté des autres elles deviennent facilement confluentes et comme réunies par une masse muqueuse, comme si l'on avait éternué sur le milieu de culture.
A un faible grossissement, à 3o Diam., les colonies sont transparentes à bord lisse, incolores, grossièrement granuleuses au centre; elles ressemblent à de jeunes colonies de Friedlaender [7. IX] , Elles poussent sur gélatine, sur agar, sur gélose glycérinée, sur sérum, sur sérum de Loeffler, sur gélose ascite. ”

“ Si l'on arrive à déterminer la réfrigération lente par le séjour dans la glacière, par le vernissage, ou l'immobilisation, on voit qu'au bout de deux heures chez un animal sur 4, parfois chez un sur 3, le sang mis en culture donne des colonies bactériennes. ”

“ Sur plaques. —En quarante -huit heures, colonies rondes, brunâtres, visibles à l'œil nu ; la gélatine se liquéfie rapidement et, à un faible grossissement, on observe constamment, dans toute la masse fluide, une sorte de circulation analogue à celle du protoplasma, qui est due au mouvement rapide de déplacement de chacun des bacilles. Au bout de trois jours, ce mouvement cesse ordinairement, et l'intérieur de la colonie fluidifiée a une apparence granuleuse avec des flocons de bactéries disséminées çà et là. ”

“ Telle est l'oeuvre scientifique du laboratoire. Pour nos colonies, il a en plus un rôle extrêmement important au point de vue économique : un laboratoire, en effet, est indispensable pour la lutte contre les maladies, nécessaire par conséquent au point de vue de l'hygiène générale et de la protection de la santé publique.
Une des maladies régnant dans presque toutes nos colonies et leur causant le plus grand préjudice, c'est la malaria. ”

“ Si l'on ensemence en même temps deux bactéries sur une plaque de gélatine, les deux espèces se développent assez bien. Il est vrai que si l'une s'accroît plus vile que l'autre, la seconde sera supprimée au bout de peu de temps. Dans cette culture simultanée, certaines bactéries ne touchent jamais les colonies des espèces ensemencées à côté d'elles et les évitent. Si l'on ensemence beaucoup de germes à la fois, les colonies qui se développent dans le même laps de temps sont beaucoup plus petites que si l'on en avait ensemencé un petit nombre. ”