Escherichia coli

“ A ce moment, que leur contenu soit trouble ou limpide, on l'ensemence par le même moyen que précédemment dans deux autres tubes où les organismes subissent leur troisième passage en liquide phéniqué dans les mêmes conditions de température. On attend, cette fois, que le trouble se produise ; l'ensemencement de ce dernier liquide sur bouillon normal donne, après quelques heures d'étuve, une culture pure du Bacterium coli commune, du bacille d'Eberth, ou un mélange des deux espèces, comme on peut le vérifier par culture sur plaque de gélatine. ”

“ Plus tard, on vit que le bacterium coli commune est l'hôte habituel de l'intestin de tous les mammifères, qu'il peut devenir pathogène en certains cas et qu'il est le prototype d'une série de microbes variés auxquels on peut donner le nom de bactéries coliformes et que le bacterium lactis aerogenes n'en est sans doute qu'une variété : Ces bactéries sont décrites avec détails dans les traités de bactériologie. J'ai déjà exposé, au chapitre des microbes du lait, quelques notions sur leur action fermentative. ”

“ Tous les cas relevant d'une épidémie seraient le fait du bacterium coli doué d'une virulence spéciale, bacterium coli en entrant dans l'individu, bacille typhique en sortant ; et s'il est démontré que le bacille d'Eberth n'est qu'une modification du bacterium coli commune, on ne pourra plus croire que la cause unique de la fièvre typhoïde soit la contagion par l'eau ; il faut admettre qu'il y a des cas, où le bacterium coli gagne sa virulence dans l'organisme lui-même, sous l'influence des modifications du milieu intérieur. ”

“ Mais le « coli » que l'on trouve est-il toujours le coli de l'homme ou un des nombreux paracoli qui existent un peu partout. Sans doute, si l'on regarde le coli comme l'hôte exclusif de l'intestin de l'homme et des animaux, une eau renfermant ce coli est une eau souillée de matières fécales. Mais il faudrait démontrer que tout coli trouvé dans l'eau provient bien de l'homme ou de l'animal.
Eijkmann, pour trouver le coli dans l'eau, recommande la culture à 46°, température qui gêne les microbes de l'eau, et permet la croissance du coli. ”

“ Dans des recherches analogues sur des cadavres de gens morts d’affections diverses (fièvre typhoïde, cirrhose hépatique, pneumonie franche, cancer de l’oesophage, etc.) , Malvoz 2 a constaté des cultures sur gélatine établissant une véritable gamme entre le bacillus coli et le bacille d’Eberth. ”

“ Bien plus, ces microbes ainsi modifiés ont été réensemencés en bouillon ordinaire, puis en bouillon lactosé, et l’amoindrissement de l’activité zymogène s’est maintenue.
Ce pouvoir de ferment peut-il être exagéré ? La nature nous montre le bacillus lactis aerogenes comme un bacillus coli doué du maximum d’énergie 1 ; il possède les propriétés du microbe côlien à un degré plus élevé. On peut arriver à lui faire subir des variations établissant des types de transition entre lui et le bacillus coli. ”

“ Technique générale. — Notre but a été d’étudier surtout le pouvoir de ferment du bacillus coli. Nous avons cherché à apprécier l’acidité développée, non par de simples changements de coloration ou la coagulation du lait comme on l’a fait jusqu’ici, mais par des dosages au moyen d’une liqueur alcaline titrée.
Les cultures étaient faites soit en bouillon de boeuf neutralisé et peptoné à 20/1000, soit sur gélatine inclinée.
Nos ballons contenant du bouillon lactosè étaient tous semblables, de manière que l’évaporation se produisant à l’étuve (37°) , où ils étaient placés, fut égale pour tous. ”

“ On décante, puis on dissout ce précipité dans un excès (quelques gouttes) d’hyposulfite de soude : ce sera là la solution qui servira aux ensemencements des boîtes de Pétri ou autres milieux solides.
Nous avons tenu à employer cette méthode, pour la modification qu’elle apportait à l’emploi de la centrifugation. Dans quatre cas d’analyse d’eau, tandis que la présence du bacille coli nous était dévoilée par d’autres procédés en 48 heures, nous n’avons jamais eu de culture où nous ayons pu mettre en évidence ce même bacille coli. ”

“ Puis on passe à l'examen de la plaque où on reconnaît les colonies coliformes qu'on identifie par ensemencement dans la gélatine lactosée, dans le lait, dans un bouillon peptone pour indol, et dans un tube de bouillon ordinaire pour faire un séro-diagnostic. Par ce procédé on sait rapidement s'il y a peu ou beaucoup de coli, c'est l'essentiel.
Le contrôle de la culture est très important, car un certain nombre d'autres bacilles troublent les bouillons phéniqués. C'est ainsi que le brunneus, le crémoïde, le carneus, etc., donnent des cultures en bouillon phéniqué en vingt-quatre heures. ”

“ Mais, dans les estomacs malades avec ralentissement de la sécrétion, le Bacillus coli communis serait, d'après Lesage, le plus fréquent; sa virulence serait faible ou nulle. Cependant, deux expérimentateurs italiens, MM. Cesaris-Demel et Orlandi (3) , ont pu se convaincre que le Bacillus coli acquiert une grande virulence par sa culture dans le suc gastrique, à tel point que les cobayes, ordinairement peu sensibles à l'action de ce microbe, succombent à la suite d'une injection de 1 centimètre cube de ce liquide dans le péritoine.
Le Bacillus coli est l'hôte dangereux de l'intestin ”

“ Le bacille C fut retiré aseptiquement (lavage du méat au sublimé d’abord, puis à l’eau stérilisée) de burine d’un malade atteint de cystite purulente due à une infection mixte (bac. coli et bac. de Koch) .
Quelles sont les conditions modificatrices que nous avons employées ?
En premier lieu, la chaleur, sous la forme de chauf ¬ fage brusque, puis la dessiccation.
Nous nous sommes servi ensuite de bile et de sérum comme milieux de cultures, pensant que ces liquides auraient de l’influence sur le pouvoir de ferment du bacillus coli. ”

“ Bacterium coli. — Lorsque les plaques de gélatine montrent de très nombreuses colonies de Bactcrium coli, l'enquête concernant les conditions locales fait presque toujours constater l'existence d'un foyer de putréfaction (purin, fumier, mare, etc.) , en communication avec la nappe aquifère. Pour être renseigné sur la pullulation du Bacterium coli dans l'eau, Malvoz ensemence une dizaine de tubes contenant chacun 10 centimètres cubes de bouillon ordinaire phénolisé (0,7 p. 100 de phénol) avec 1 centimètre cube d'eau pour chaque tube, et les cultures sont laissées pendant un jour à 40°. ”

“ Il nous faut avouer que, lorsque nous avons cherché à les obtenir, nous avons observé constamment une tendance au retour au type. Prenons un exemple. Un échantillon A de bacillus coli, après avoir été soumis à 70 degrés pendant trente-cinq secondes, fat semé en bouillon de boeuf avec lequel on ensemença un bouillon lactosé. Ce dernier révéla une acidité égale à 0,7, celle du témoin étant 2,00. ”

“ La résistance à la chaleur n’est pas non plus un caractère constant, et M. Rodet, étudiant divers échantillons de bacillus coli, a remarqué des différences assez étendues suivant les spécimens considérés. La plupart peuvent se cultiver à des températures relativement élevées, jusqu’à 46 degrés. Mais cette température, limite supérieure, n’est pas absolument fixe, et certains bac. coli ne peuvent vivre à 44 degrés, se rapprochant en cela du type Eberth qui, on le sait, est moins résistant.
Les variations naturelles existent également quant au mode de culture sur gélatine. ”

“ On sait en efîet que le coli bacille est beaucoup plus résistant que le bacille d’Eberth et toujours lors-qu’on a voulu séparer ces deux microorganismes après les avoir isolés des autres microbes, c’est toujours le coli qui reste, tandis que le bacille d’Eberth est détruil. ”

“ Les lapins résistent à l’inoculation dans le péritoine ; l’hypothermie est à peine marquée. Par inoculation dans les veines auriculaires, on obtient de l’hyperthermie et soit la mort en deux à dix jours, soit une maladie à longue échéance avec amaigrissement considérable.
Ges exemples montrent bien que l’activité pathogène du bacillus coli se manifeste de différentes manières suivant la porte d’entrée du microbe, et aussi suivant l’organisme auquel il s’attaque. ”

“ La solidification faite, on prend avec pipette stérile, dans un flacon débouché avec une pince flambée, 4 c. c.
d'eau à examiner qu'on verse sur la plaque d'Endo-Agar et qu'on étend avec un fil de platine flambé, de façon à en mouiller toute la surface. Cette opération est répétée sur une seconde plaque pour chaque échantillon d'eau, à cause de la convention générale adoptée par les laboratoires d'opérer les cultures de bacilles coli sur 8 c. c. ”

“ Les cultures vieilles ont donc été moins résistantes que les jeunes.
Par des chauffages successifs, nous avons vu augmenter ce que nous appellerons la durée limite maximum. Dans un cas, à 60 degrés, nous l’avons accru de 60 à 80 secondes dans un autre, de 3 à 5 minutes (expér. XLI) . Jamais notre bacillus coli n’a résisté 6 minutes à 60 degrés.
La culture en bile de chien a eu pour effet de diminuer la résistance de cet échantillon A. Ainsi cultivé, il n’a pas résisté pendant 1 minute à la température de 60 degrés (expér. XXXII) . ”

“ En l'état actuel de la science bactériologique, il est impossible de découvrir le bacille typhique dans les conditions où il se trouve toujours dans les eaux infectées. Les expériences de notre savant confrère, M. Grimbert, pharmacien des hôpitaux, ont démontré, de la manière la plus indiscutable, qu'il est impossible de découvrir le bacille d'Erbeth dans une eau infectée lorsque le bacille coli s'y trouve en même temps. Or, le bacille coli, qui existe toujours dans l'intestin, se retrouve nécessairement dans les eaux souillées par des déjections. ”

“ EXPÉRIENCE I. — Le bacillus coli B, après trois jours de séjour dans le sérum, est semé en bouillon lactosé qui, dosé, donne une acidité de : 2,3, le témoin donnant 2,00. On a donc une augmentation du pouvoir de ferment qui sera amoindri dans les expériences suivantes.
EXPÉRIENCE I bis. — Ensemencement de bouillon lactosé avec une culture en sérum : bacillus coli B (fistule biliaire) , âgée de vingt-cinq jours, 3e génération. Etuve 37 degrés. Au bout de trois jours d’ensemencement, dosage de Vacidité en acide lactique qui, rapportée à 1000, donne 1,3. ”

“ On sait seulement que le bacterium coli se rencontre très souvent dans l'estomac des dyspeptiques (Lesage) et l'on peut se demander, bien qu'il se soit toujours présenté avec les propriétés du bacille saprophyte, sans virulence, si cette virulence ne peut s'exalter dans certaines conditions qui restent à déterminer. ”

“ Ces auteurs ont démontré que la diète lactée et la fièvre peuvent amener la pullulation de bacterium coli à tel point qu'il se trouve dans les selles à l'état de culture pure. Pour la fièvre, le phénomène est tout à fait remarquable; plus la température est élevée, plus on a de chance de trouver le bacterium coli à l'état de pureté. ”

“ L'eau suspecte, dans le nouveau procédé d'analyse préconisé par M. Péré, est transformée en un terrain de culture suffisamment nutritif, dans lequel la présence d'une proportion déterminée d'acide phénique, sans empêcher la multiplication des germes du bacterium coli commune et du bacille typhique, met obstacle à celle des espèces étrangères, ainsi que l'a démontré la pratique des procédés usuels. ”

“ De plus le bacille d’Eberth ne s'entraîne pas, c'est-à-dire qu’il ne s’habitue pas à Faction de ce toxique, et qu'il ne peut vivre en présence de doses croissantes du poison.
Tout échantillon de coli-bacille pourrait au contraire , d’emblée et sans difficulté, vivre dans des bouillons titrés à 1 gr. 50 p. 1000 d’acide arsénieux : c’est la résistance minima du coli-bacille à ce poison. Mais, de même qu’il existe plusieurs variétés de coli-bacilles, de même se conduisent-ils différemment en présence de ce toxique : jamais tués par 1 pr. ”

“ Nous qui sommes partisan de l'infection typhoïde par les produits de la fermentation putride, par ses nombreuses bactéries aérobies ou anaérobies, le bacterium termo, et, mieux, le bacterium coli, produits qui, introduits dans l'organisme par les voies d'absorption, y trouvent des conditions biologiques propices, nous pensons que la fièvre typhoïde est toujours due au bacille d'Eberth, mais aussi à d'autres microorganismes devenus typhosi dans des conditions encore inconnues ? ”

“ Caractères des cultures. — Le Bacterium coli est facultativement aérobie ; il se développe aisément dans les milieux usuels, dans des limites de température assez larges, entre 14° et 450.
Bouillon. — A 37° le développement est apparent dès la sixième ou la huitième heure; les caractères de la culture sont les mêmes que pour le bacille typhique ; cependant il se forme fréquemment à la surface du liquide une pellicule grisâtre que l'on n'observe qu'exceptionnellement avec le bacille d'Eberth.
Gélatine. - Le Bacterium coli ne liquéfie pas la gélatine. ”

“ D'après Vallet, la culture dans le fumier de vidange filtré et stérilisé doit exalter considérablement la virulence. L'inoculation sous-cutanée de coli bacille provoque parfois seulement la suppuration, parfois la septicémie. L'injection intra-péritonéale de 1 cmc. (Pfaundler 2 cmc.) de culture en bouillon est toujours mortelle pour le cobaye en 5o heures environ, d'après Gabritschewsky ; 5o races différentes de coli isolées se comportaient toutes à ce point de vue de la même façon; on trouvait constamment les bactéries dans le sang du coeur. ”