Culture (microbiologie)

“ Et dans ces exemples je ne choisis que les microbes animalcules qui n'ont jamais pu être cultivés sur aucun milieu de culture et qui se conservent même très péniblement en dehors de l'organisme vivant. ”

“ La série des opérations nécessaires pour arriver à ce but, c'est-à-dire la culture pure du. microbe à étudier, l'essai successif de tous les désinfectants sur ses cultures, l'action de la température, du froid, de l'électricité, de la pression, du mouvement, sur la vie de ce microorganisme doivent être méthodiquement étudiés. Il faut savoir quel est le milieu de culture le plus favorable à sa pullulation, et celui dans lequel il ne vit pas. ”

“ Vous n'agissez pas ainsi en bactériologie; les milieux de culture employés varient énormément, comparés au milieu des tissus organiques. La preuve, c'est qu'en présence de la certitude d'un microbe vous avez bien des difficultés à le cultiver, et quelquefois vous n'y réussissez pas. Quand on sera bien pénétré de cette idée, vous trouverez toujours des microbes dans les tissus vivants, et vous verrez évoluer ceux de la scarlatine, de la rougeole, de la variole, de la syphilis, etc., encore inconnus. ”

“ Si, dans un bouillon de culture d'un microbe de maladie, lorsque la culture cesse de pulluler, on ajoute de l'eau, la culture reprend.
Il en est de même dans l'organisme. Les microbes des maladies engendrent des produits qui leur sont contraires ; aussi (nous le verrons plus en détail dans notre prochaine leçon) a-t-on pu injecter à des animaux sains, soit les produits de culture artificielle des microbes des maladies, soit le sérum du sang d'animaux convalescents. On injecte ainsi un liquide où a vécu, où. s'est
développé le microbe ”

“ Aujourd'hui, dans les laboratoires de bactériologie, on se sert communément pour la culture des microbes de quatre milieux nutritifs qui sont : le bouillon de viande, la gélatine, la gélose, la pomme de terre ; ajoutons-y encore le sérum de sang d'animal qui est indispensable pour commencer les cultures de certains germes, le bacille tuberculeux, par exemple. ”

“ Il y a bien quelques microbes pathogènes qui sont très exigeants pour leur milieu de culture. Il y en a qui ne se développent qu'en présence de quelques substances particulières, comme il y en a d'autres qui sont extrêmement sensibles aux moindres traces de poisons. Mais ce sont des exceptions rares. La grande majorité des microbes pathogènes, appartenant au groupe des Bactéries, s'adaptent au contraire très bien à toutes sortes de milieux de culture et la plupart d'entre eux vivent et se développent très bien dans le sang ou dans les autres humeurs des organismes réfractaires. ”

“ Par des expériences précises, en variant la composition du milieu de culture, on a pu déterminer l'aliment qui convenait ou qui nuisait aux microbes. Ceux-ci sont très sensibles aux moindres changements d'alimentation.
Pour obtenir une culture pure, c'est-à-dire ne contenant qu'une seule espèce de microbes, voici la méthode suivie : a) on prépare un bouillon de culture stérile, c'est-à-dire dépourvu de germes, soit en prenant un liquide de l'organisme (lait, sérum) , soit en stérilisant par la chaleur ou la filtration un liquide préparé artificiellement ”

“ Lorsque le microbe qui produitune maladie donnée peut être cultivé dans du bouillon ou dans tel autre liquide, in vitro, quoique les conditions de sa vie y soient sûrement différentes de ce qu'elles sont dans l'animal malade, on a pu se demander si les produits excrémentitiels répandus dans la culture ne seraient pas capables, à eux seuls de donner, par injection à un animal, une maladie analogue à celle qui résulte de l'introduction directe du microbe vivant. ”

“ L'addition de certaines substances, même à doses très minimes, peut favoriser ou activer leur développement; et d'ailleurs les changements apportés au milieu nutritif modifient parfois les fonctions du microbe aussi bien que sa forme et sa végétabilité. La nature du milieu de culture, sa composition, et même son àge, influent sur le développement des bactéries. Il y en a qui préfèrent tel milieu, tel bouillon à tel autre; un milieu récemment préparé convient mieux qu'un milieu déjà vieilli, etc. ”

“ Bouillon, gélatine, gélose, sérum, isolement sur plaques de gélatine, etc.
Les microbes qui évoluent naturellement dans la bouche de l'homme peuvent vivre et se développer sur des milieux artificiels. Ce sont là les milieux dits de culture, sur lesquels on peut isoler ces microbes et étudier leurs propriétés biologiques. La culture du microbe sur milieux divers fournit des caractères différentiels qui permettent son diagnostic lorsque les caractères morphologiques sont différents. ”

“ Celles-ci, développées en dehors de horganisme, par des moyens perfectionnés, ne peuvent prétendre résumer les composés développés par un microbe vivant au sein de 1 organisme, au milieu d’albumines autres que celles que le bactériologiste fournit à ses microbes dans les bouillons de culture. ”

“ Il fallait naturellement indiquer les nouvelles méthodes d'observation et les perfectionnements d'anciennes ; donner une large place à l'étude de ces curieuses substances que produisent les Bactéries dans les milieux où elles vivent, bouillons de culture ou organismes vivants ; étudier enfin un nombre respectable d'espèces décrites par les chercheurs de tous pays qui s'adonnent avec tant d'ardeur à cette science. Ceci a été fait en s'efforçant de conserver le caractère, pratique qui a valu à ce Traité de Bactériologie un aussi grand succès. ”

“ On ne peut nier qu'une eau ainsi surchargée de microbes ne soit éminemment suspecte; on ne peut néanmoins déterminer quelle en est l'influence pathogénique, car l'examen microscopique ne nous apprend rien sur la nature de ces microbes; nous ne pouvons savoir s'ils sont ou non nuisibles ; la culture seule pourrait donner des résultats à cet égard; mais comment aller découvrir et isoler dans cette masse de petits êtres ceux qui peuvent engendrer telle ou telle maladie ? ”

“ De plus s'il en était ainsi, une telle injection réaliserait la culture jusque-là impossible du microbe de la rage; culture faite, non point dans un bouillon artificiel, il est vrai, mais dans le tissu nerveux même. ”

“ Les microbes accomplissent leur œuvre
de destruction par leur pullulation sur place et peut- être bien aussi en vivant aux dépens des éléments auxquels ils sont associés, comme ils vivent dans un milieu de culture en y épuisant, pour les besoins de leur vie, tous les éléments qui sont propres à leur servir. Sur ce point, on ne peut émettre que des hypothèses ; mais ce qui n'en est pas une, c'est l'action commepha- gédéniqu, qui fait suite à l'insertion du microbe de la morve sur la peau d'un animal propre à lui servir de milieu de culture. ”

“ On a classé, on classe toujours avec fruit les bactéries suivant qu'elles retiennent ou non la couleur après emploi des méthodes de Gram, d'Ehrlich ou des procédés succédanés. Des solutions colorantes complexes ont permis d'étudier de plus près la structure des cellules microbiennes, en particulier celle des protozoaires, et de relever ainsi des détails, utiles, dans bien des cas, au diagnostic des espèces.
La connaissance des milieux de culture est venue, en même temps, apporter son aide aux chercheurs. ”

“ Quand une bactérie est ensemencée dans un milieu approprié, elle se multiplie si rapidement et si abondamment qu'en quelques heures on obtient une culture visible à l'œil nu, composée de colonies bactériennes dans lesquelles chaque élément n'a que quelques millièmes de millimètre de longueur. ”

“ M. Pasteur envisage l'organisme comme un milieu de culture qui, par une première atteinte du mal, perdrait, d'une manière définitive ou pour un temps plus ou moins long, l'aptitude à fournir au développement d'une nouvelle génération de micro-organismes, les premiers ayant épuisé les aliments nécessaires au développement de leur espèce. ”

“ On peut comprendre de diverses façons cette action locale sur les tissus, par laquelle les produits microbiens pourraient se montrer indirectement utiles aux agents infectieux.
Baigner le microbe clans un liquide de culture qui n'est pas totalement épuisé, lui fournir, pour les premiers instants de sa germination, une matière inerte, plus facilement attaquable que ne l'est en général la matière vivante, n'est, sans cloute, pas chose indifférente ”

“ Importance. — L'hémoculture, c'est-à-dire la recherche des microbes dans le sang par ensemencement en milieu de culture, est au nombre des techniques les plus importantes, aussi bien au point de vue du diagnostic, que des recherches destinées à découvrir la pathogénie de certaines affections.
Multiples sont les causes qui expliquent cette utilité de l'hémoculture.
La première, c'est qu'elle constitue la méthode la plus couramment employée de recherche des microbes dans le sang. Nous avons vu, en effet, que la recherche par examen direct est généralement négative. ”

“ L'eau suspecte, dans le nouveau procédé d'analyse préconisé par M. Péré, est transformée en un terrain de culture suffisamment nutritif, dans lequel la présence d'une proportion déterminée d'acide phénique, sans empêcher la multiplication des germes du bacterium coli commune et du bacille typhique, met obstacle à celle des espèces étrangères, ainsi que l'a démontré la pratique des procédés usuels. ”

“ Ce microbe, vous l'obtenez par la culture des différents tissus, même normaux et puisés dans la profondeur du corps à l'abri des germes extérieurs (qui pour nous ne sont que la dispersion des microzymas végétaux et animaux) et vous êtes obligés d'admettre qu'à l'état ordinaire, nous sommes farcis de germes microbiens qui n'attendent qu'une occasion favorable pour se développer, qui guettent notre déchéance organique pour achever la destruction ”

“ Alors, l'organisme continue à perdre plus qu'il ne reçoit, il y a d'abord amaigrissement, affaiblissement général, et malheureusement préparation d'un terrain de culture très propice au développement d'un grand nombre de maladies contagieuses d'ordre microbien. ”

“ Il en résulte que ces microbes moins exclusifs et par suite moins pathogènes deviennent prépondérants, et en faisant des séries de cultures, on arrive à éliminer peu à peu les individus plus pathogènes. Dela sorte, les bactéries s'atténuent et en même temps, comme elles sont mieux accoutumées aux milieux artificiels, la culture devient de plus en plus abondante par l'élimination d'individus pathogènes. Si l'on inocule maintenant cette culture à un animal, elle ne produit plus une maladie bien prononcée parce que les individus les plus pathogènes ont été éliminés. ”

“ Culture des Microbes. — Virus atténué.
Ce n'est pas chose facile que d'étudier un microbe, car, outre que ses dimensions sont infiniment petites, il est toujours mêlé à d'autres espèces de formes à peu près semblables. On y est arrivé cependant, grâce à Pasteur qui a trouvé le moyen de cultiver en laboratoire ces petits êtres, de les nourrir, de les multiplier et même de modifier leurs aptitudes : c'est une véritable domestication de l'espèce qui a conduit à des découvertes merveilleuses et fécondes en résultats. ”

“ Pour apprécier comme il convient l'immense intérêt de la microbiologie, il faut suivre à travers les âges les très lents progrès de l'hygiène, de la médecine et des industries de fermentation, puis assister au merveilleux essor qu'elles ont pris sous l'impulsion du génie de Pasteur. ”

“ Il y a plus enfin : quand le microbe, par un procédé donné de culture, est arrivé à un certain degré d'atténuation, il est possible de transmettre à ses descendants cette énergie réduite, dans la mesure même où on l'a arrêtée chez les ascendants, et de créer ainsi dans le règne de ce monde invisible, que l'on peut bien appeler la microbie, des races spéciales de microbes, j'allais presque dire domestiqués, que l'homme peut utiliser pour son propre avantage, en bénéficiant de ce qu'ils ont conservé de puissance, sans qu'il ait à en redouter les excès. ”

“ A côté des maladies dont le microbe a pu être saisi et soumis à une culture qui a permis d'en faire une étude expérimentale complète, il y en a d'autres pour lesquelles déjà la constatation a pu être faite de la présence d'un microbe, qu'on peut considérer comme l'élément de leur virulence, mais sans qu'on ait réussi encore à trouver le milieu de culture qui conviendrait pour en faire l'étude expérimentale en dehors de l'organisme : telles sont, notamment, la rage, la péri- pneumonie contagieuse du gros bétail. ”

“ C'est-à-dire que la science expérimentale est arrivée à ce résultat vraiment bien extraordinaire de créer par la culture, dans ce monde des microbes, des variétés dans l'espèce, ayant des caractères nouveaux, transmissibles héréditairement avec une remarquable constance ; la bactéridie vaccinale donnant naissance à une succession de générations de bactéridies vaccinales dans lesquelles l'activité virulente est réduite exactement au même degré que celui de la bactéridie originelle, sortant de son liquide de culture. ”

“ Les bactéries se cultivent pour la plupart dans les milieux, dont on vient d'étudier la préparation et la stérilisation ; celles qui sont pathogènes se cultivent d'ailleurs dans les organismes. Pour la culture dans les milieux artificiels, les règles à suivre varient, suivant leur nature, et suivant qu'il s'agit de bactéries aérobies ou de bactéries anaérobies. ”

“ Certains exigent, pour se développer sur les milieux de culture artificiels, la présence de matériaux presque vivants, d'assimilation aisée pour des germes, accoutumés à trouver des aliments tout faits dans les tissus qu'ils infectent. ”

“ Parmi les bactéries, on distingue les micrococcus qui se développent très rapidement dans les milieux de culture par division du microbe primitif ; les bacilles qui se développent moins rapidement et qui disparaissent en présence de l'oxygène ; les vibrions qui se distinguent par une extrême mobilité, etc. On peut recueillir ces Microbes, soit directement comme les moisissures, soit en faisant passer l'air dans un milieu de culture bien défini.
Résultats. — Lorsqu'il pleut, le nombre des microbes dans l'atmos-
phère s'abaisse, car l'eau les entraîne sur le sol. ”