Agglutination

“ L'agglutination s'observe surtout pour les Bactéries mobiles : les microbes, pour Kühneman, s'enchevêtreraient par leurs cils. Pourtant les microbes immobiles sont susceptibles d'agglutination qui se traduit par la sédimentation de la culture (1) .
L'agglutination n'est pas un processus biologique, mais un phénomène physico-chimique, car les microbes tués (par le chloroforme, le formol, la chaleur) sont agglutinables. ”

“ Il s’opère bien une certaine juxtaposition de l’aliment qui afflue ; mais comme il arrive trop humide encore, incomplétement réduit en humeur, et dépourvu de cette qualité visqueuse et agglutinative qui est un produit de l’influence de la chaleur naturelle, l’agglutination ne peut s’effectuer, attendu que l’aliment glisse et se détache des parties solides du corps, par l’abondance d’une humeur ténue et mal cuite. — Dans la lèpre blanche il y a agglutination de la nourriture, mais non pas assimilation ”

“ La dose de sérum étant la même, la quantité de bacilles contenue dans un même volume d'émulsion est donc capable de modifier le résultat de la séro-agglutination.
A ce propos, je ferai en passant l'observation suivante : dans la pratique de la séro-agglutination, le nombre des microbes peuplant une émulsion peut avoir des conséquences trompeuses sur la fixation du pouvoir agglutinant des sérums; une diminution du nombre des microbes peut faire croire à une augmentation du pouvoir agglutinant. ”

“ État normal : possibilité d'hétéro-agglutination et d'iso-agglutination. — A l'état normal on constate l' hétéro-agglutination très fréquemment : le sérum de cobaye par exemple agglutine les globules rouges de mouton, celui de chèvre les globules rouges de l'homme, etc.
A l'état normal également il n'est pas rare de constater l' iso-agglutination, c'est-à-dire l'agglutination obtenue avec le sérum d'un homme sur les globules rouges d'un autre homme, ou avec le sérum d'un animal suites globules d'un animal de même espèce. ”

“ Ce qui nous frappe d'abord, dans cette question de l'agglutination des microbes, c'est qu'elle représente -encore une réaction spécifique de l'organisme infecté par rapport à ses parasites; cette spécificité, dit M. Gruber, n'est pas rigoureuse ; nous dirons plutôt qu'elle n'est pas .exclusive, et cela est tout naturel du moment qu'il s'agit encore évidemment d'une spécificité physique; M. Bordet a depuis bien longtemps, déjà en 1899, soutenu la théorie physique de l'agglutination. ”

“ Dans l'exemple du coccobacille typhique, l'agglutination se produit jusqu'à un certain point dans le sein de l'organisme, mais elle se renforce notablement dans les humeurs, retirées et soumises à l'action de l'air. ”

“ Des sérums agglutinants, c'est-à-dire de sérums qui, sans détruire un microbe mobile, l'immobilisent, le réunissent en amas. L'agglutination est une atténuation de la propriété bactéricide; le sérum a encore la possibilité d'agir sur le microbe, de le troubler dans sa vitalité, dans son mouvement, mais ne peut plus le détruire ou le tuer.
Se rapprochant comme fonction de la réaction agglutinante, existe la réaction sphérulogène ou sphérulante, dont le meilleur exemple est la réaction de Pfeiffer, c'est-à-dire la transformation en boules, en sphères, de bâtonnets ou de vibrions mobiles. ”

“ Et logiquement on en arrive à une conception de l’agglutination, phénomène très général de réaction de i’organisme, simple modalité de sa propriété de défense aux infections. Gomme les modalités voisines (phago-cjtose, bactériolyse, etc.) nulle spécificité exclusive ne le lie à la cause dont le développement a provoqué sa mise en oeuvre. La fonction agglutinante d’un sérum s’étend indistinctement à toute bactérie et son action sur elle ne présente de degrés qu’autant qu’il existe entre espèces différentes de degrés de résistance à se laisser agglutiner. ”

“ Par contre l'agglutination des globules d'un individu par son propre sérum, ou auto-agglutination, est un phénomène exceptionnel, et par conséquent précieux pour le diagnostic, quand sa recherche est positive. ”

“ Voilà comment certains idiomes, renchérissant de plus en plus sur le procédé d’agglutination, sont arrivés au polysynthétisme, comment d’autres se sont arrêtés, pour ainsi dire, à mi-chemin sur la voie qui mène du monosyllabisme à l’agglutination ou de l’agglutination à la flexion. Par exemple, tandis que le chinois est demeuré strictement mohosyllabique, le barman incline vers l’agglutination, et le siamois laisse entrevoir le germe de la flexion. Le copte tend à sortir de l’agglutination par l’analyse. ”

“ Dans un premier, qui est celui des hématies à agglutinogène A, l'agglutination est typiquement produite par l'agglutinine x ; dans un second, qui est celui des hématies à agglutinogène B, l'agglutination l'est par l'agglutinine p ”

“ Elles le seront encore si l’on s’en tient, pour tout renseigne-ment positif d’agglutination vraie, à des taux élevés du pouvoir agglutinant que présente d’ordinaire le sérum pour le seul bacille spécifique. ”

“ Un des cobayes a donné une agglutination très forte à 1/20 avec son sang, son liquide pleural et son liquide péritonéal. Chez l’autre, le sang n’a agglutiné la culture qu’à 1/10, tandis que la sérosité pleurale avait un pouvoir de 1/20. ”

“ Recherche de l'agglutination.
Précautions préalables. — C'est à partir de ce moment surtout que l'on a des précautions à prendre, puisque l'on va manier, aspirer avec des seringues ou des pipettes, porter dans des récipients ouverts, mettre sur lame, examiner au microscope : d'une part le sérum d'un malade qui peut avoir des bacilles dans son sang (voir p. 122) ; mais surtout une culture jeune, particulièrement abondante, vivante et virulente. ”

“ La culture était pure; d'ailleurs, elle était admirablement agglutinée par une très petite dose de sérum spécifique.
Conséquemment, dans certaines émulsions, il y a des microbes capables de résister à l'action de l'agglutinine non spécifique et qui cèdent seulement à l'influence beaucoup plus énergique de l'agglutinine spécifique. Celte gradation dans les effets et dans les résultats me paraît donner à la modification subie par les microbes une part prépondérante dans le phénomène de l'agglutination. ”

“ Cette substance, exhalée principalement dans la plèvre sous l'influence d'une inflammation légère, ne fait qu'agglutiner, comme une sorte de colle visqueuse, les deux surfaces séreuses qui se touchent ; mais plus tard des fibres de tissu conjonctif s'y développent, et l'agglutination se change en adhérences. ”

“ Son intérêt découle de ce fait que dans la grande majorité des cas, une infection microbienne provoque dans l'organisme la formation de substances bactéricides correspondantes dans le sang et que ces substances agissent sur les microbes en les immobilisant et les agglutinant en amas, puis en les dissolvant. L'agglutination microbienne par les sérums est donc une réaction d'infection et répond au premier temps de l'action bactéricide. ”

“ Les faits expérimentaux montrent de plus un étroit parallé-lisme dans l’apparition et l’évolution des agglutinines des divers ordres. Seule les sépare une inégalité de taux, au profit des premières, de là la nécessité d’une agglutination primaire forte pour que les coaggluti-nines apparaissent. ”

“ On emploie la technique habituelle (v. p. 408) . L'agglutination doit être recherchée au 1/50, avec une attente de 2 heures, pour le bacille du type Shiga, peu agglutinable; au 1/100 pour le bacille du type Flexner, qui s'agglutine plus facilement, et qui même, à un taux plus faible, peut être agglutiné par un sérum normal (1) . ”

“ Donc, l'agglutination des microbes par les sérums ne me paraît pas comparable à la précipitation de l'argile par le sel marin, bien qu'elle ait avec ce phénomène les plus grandes analogies.
Voyons encore. A la page 244 de son mémoire (Annales de l'Institut Pasteur, 1899) , Bordet donne une expression nette et précise de sa conception. Il dit : « L'agglutinine qui se fixe sur les microbes agit en modifiant les rapports d'attraction moléculaire qui unissent les. particules microbiennes, d'une part avec leurs voisines, d'autre part avec le milieu ambiant. » ”

“ La réaction agglutinante se transmettrait à l'enfant en perdant de son intensité. Ainsi, chez un enfant.
souffrant, il est vrai, de troubles intestinaux, M. Castaigne (4) a noté dans le sérum de la mère une agglutination maximum de l'^OO, dans le lait de 1/6 ) 0; chez l'enfant, elle ne monte pas au delà de 1/30 dans le sérum.
(1) Bozzolo. Wiener med. Wochenschrift, nO 33, 1891.
(2) Landon et Griffon. Transmission par l'allaitement du pouvoir agglutinant typhique de la mère à l'enfant. ”

“ Sêro-ülagnostics.
La recherche de l’agglutination se fait avec le sang pour la fièvre typhoïde, avec le sang ou les épanchements pour la tuberculose.
Récipient. — Petit tube de verre.
Recolte du sang. ”

“ L'emploi des rayons ultraviolets, au contraire, laisse aux microbes sensiblement les mêmes propriétés qu'ils ont en cultures vivantes (Lematte et Stassano) .
2° Agglutination macroscopique des cultures.— Une autre modification de technique consiste à chercher à reconnaître l'agglutination à ses caractères macroscopiques.
On ajoute à la culture en bouillon quelques gouttes de sérum, et l'on met à l'étuve : si le sérum est un sérum actif de typhique, les microbes s'agglutinent, forment des amas qui tombent au fond du tube, et le bouillon est clarifié. ”

“ D’autresfois même elle n’apparaît pas; l’on se trouve alors devant des formes graves ; i’organisme, en quelque sorte sidéré, ne trouve pas la force de réagir et de fabriquer les substances capables d’immobiliser puis de détruire les microbes. En pareil cas, le praticien, sans négiiger de rechercher l’agglutination les jours suivants, n’alten-dra pas sa positivité pour appliquer un traitement vigoureux. ”

“ Gette discussion déjà vieille de plus de dix ans n’est sans doute point définitivement close. Cependant, au-dessus de divergences imputables peut-être à des difFé-rences de technique, niais plus probablement à des différences d’agglutinabilité entre les bactéries, il est un certain nombre de faits qui semblent hors de conteste : c'est qu'une agglutination spécifique forte au cours d'une infection typhique expérimentale s accompagne de coagglutination à un taux ordinairement moindre de hacille coli : à un degré faihle d'agglutination typhique, la coagglutination du bacille coli n'apparait pas. ”

“ Get instant est celui des plus grands espoirs qu’ait jamais fait naître ragglutination. Nul alors ne doute de son action spécifîque sur la bactérie qui l’a fait naître : d’où la possibilité d’une double série d’applica-tions pratiques : identification d’une infection indéter-minée par la recherche du bacille qu’elle agglutine (séro-réaction diagnostique) , identification inverse d’une espèce bacillaire à partir d’un sérum d’origine connu (Bordet) . ”

“ Ces bactéries, mises en contact avec une goutte do sang de lapin ou de chien immunisés avec le coli-bacille, présentaient le phénomène de l'agglutination.
Ces cultures servirent a des expériences variées sur des animaux : cobayes, lapins, chiens, poules, etc. Sur les pou¬
les et sur les chiens notamment, après trois ou quatre jours, on obtint, par ingestion ou par injections sous-cutanées, des selles molles et sanguinolentes, dans lesquelles on trouva les mêmes microbes que dans les cultures. ”

“ La conclusion àlaquclle arrive cet auteur paraît donc
assez exaclement superposable à celle par laquelle plus haut s’est terminée la question des coagglutinations co-lityphiques : une agglutination forte fait naitre autour d'elle une série d'agglutinations voisines qui nappa-raissent qu'à un taux suffisamment élevé de la pre-mière : parallélisme des unes et des autres au cours de leur évolution.
La question des coagglutinations bactériennes s'est posée encore à un troisième point de vue : celui de la spécificité de la réaction agglutinante du bacille tuber-culeux (Arloing et P. Courmont) . ”

“ D’autres faits encore d’agglutination spontanée exis-tent non plus du fait des bactéries, mais de celui des sérums. On sait, en effet, que le sérum normal de l’homme peut agglutiner à un taux, il est vrai, géné-ralement faible, nombre de bactéries saprophytes ou pathogènes (charbon 1/100 et jusqu’à i/5oo) . Bienplus, tels animaux, le cheval ou le mulet, par exemple, peu-vent agglutiner spontanément (J.Bordet, S. Arloing et P. Courmont) un nombre parfois très grand d’espëces microbiennes, bacilles du choléra et celui de la tubercu- ”

“ Et tout d’abord un point qu'il convient de signaler c’est la fréquence d’agglutinafions spontanées par lé sérum normal. Malgré l’emploi constant de cultures jeunes, malgré le choix pour nos sujets d’expériences de lapins et de cobayes, qui passent pour écbapper ià cette cause d’erreur, nous àvons rencontré vingt-sept cas d’agglutinations spontanées. ”

“ Sans cela, comme on rencontre de « temps en temps, pour des causes souvent inconnues, « des cultures qui offrent une aptitude ou au contraire « une résistance anormale à l’agglutination, on s’ex-« pose à des erreurs importantes. Aussi, cbaque fois « que nous assayons le pouvoir agglutinant d’un « sérum, nous faisons toujours en même temps la « réaction sur la même culture avec notre sérum « étalon. »
C’est avec tous ces détails de technique que Paul Courmont a recherchë la séro-réaction dans tous les cas cités dans cette thèse. ”

“ Enfin nombre d’auteurs avaient noté avant nous un parallélisme réel entre le taux d’agglutination de la bactérie spécifique et ceux des bactéries coagglutinées. G’est aussi ce que montrent la plupart de nos tableaux (cf. notamment VII, X, XI) . 11 ne saurait être question sans doute d’un parallélisme étroit et rigoureux. Mais d’une part l’apparition des ünes et des autres aggluti-nations est contemporaine, leur disparition momenta-née ; de plus, grosso modo au moins, les accidents qui survienneht à la courbe de l’une d’elle; retentissent sur c.elle des autres ”