Georges Ehringer

“ Kraus, dans tes cultures d’un vibrion (vibrion de Nasik) isolé dans les fèces d’un cholérique authentique, mais non cliolérique Jui-mème (parce qu’il ne donne pas l’ag-glutino-réaclion) , a mis en évidence une toxine et une hémolysine solubles. En partant de cette toxine, il a réussi à immuniser Jes animaux.
Les vibrions d’Eî Tor (Kraus et Pribrâm) donnent éga-lement une toxine thermolabile dont l’action sur le lapin est aussi rapide que 1 action de la toxine du vibrion de Nasik, et une hémolysine détruite par la chaleur.
Le sérum antitoxique d’El Tor neutralise la toxine ”

“ D’après les expériences de Kolle et Gotschlich, de même que d après les recherches effectuées ultérieurement, il semble bien qu’il faille être moins exigeant et tenir pour cholérique toüt vibrion agglutiné au moins au 1/1000 par un sérum actif à 1/4000. Les vibrions vulgaires aggluti-nent en général au 1/50, rarement à 1/200 et tout à fait exceptionnellement â 1/500. Si l’espèce suspecte donne la réaction avec des dilutions variant de 1/500 à 1/1000,
1 épreuve doit être considérée comme douteuse. ”

“ L’Allemagne, par exemple, dans le règlement de 1907, déclare que : l’épreuve de ragglutination doit être consi-dérée comme positive et permet de regarder comme cho-lérique la culture soumise à l’essai lorsqu’il s’est pro-duit ùne agglutination nette jusqu’aux dilutions attei-gnant la lirnite du titre de rimmùn-sérum utilisé. ”

“ Identification du vibrion cholérique par les réactions d’immunité.
Les différents travaux de Pfeiffer et Isaeff, de Gruber et Durham, de Bordet appliquant aux recherches bactériolo-giques les ressources fécondes des réactions d’immunité, permirent à Dunbar d’abord, mais surto'ut à Kolle et Gotschlicli en 1903, d’éclairer d’un jour nouveau la ques-tion de la spécification du vibrion de Koch. ”

“ IV. — On peut trouver des personnes ne présentant aucun symptôme cholériforme ou des personnes atteintes d’une autre maladie, qui permettent cependant de déce-ler dans leurs selles des vibrions donnant l’agglutino-réaction et la réaction de Pfeiffer. Ce sont des porteurs de germes, aussi dangereux, sinon plus, que des choléri-ques vrais. ”

“ Nasik el le sérum anlitoxique Nasik neutralise la ioxine E1 Tor. Cependant les deux vibrions Nasik et E1 Tor ne sont pas semblables car le sérum antitoxique obtenu par inoculation du premier est inactif envers la toxine du vibrion de Saïgon, cholérique vrai, alors que le sérum E1 Tor la neutralise. Le sérum Saïgon est lui-même inac-tif envers les toxines Nasik et E1 Tor. ”

“ Pour un essai définitif, on prépare des dilutions très limpides, que l’on fîltre au besoin, d’immun-sérum dans l’cau physiologique à des titres de plus en plus forts, 1/200, 1/500, 1/1000, etc., elc., et on verse 1 cc. de cha-que dans autant de petits tubes qu’on a préparé dc dilu-tions. On ajoute à chacun une oese d’une culture de dix-huit heures sur gélose et on met deux heures à rétuve à 37°. Au bout de ce temps, on aura une réaction posi'tive dans tout tube au fond duquel on apercevra des gru-mcaux formés de vibrions aggîutinés, laissant au-dessus d’eux un liquide absolumènt clair. ”

“ On a attiré rattention sur le fait qu’un cer-tain nombre de vibrions n’agglutinent pas ou agglutinent mal au moment où ils viennent d’être isolés de l’orga-nisme ou des eaux, et qu’ils n’acquièrent cette propriété qu’après un certain nombre de passages quotidiens sur milieux artificiels. II serait bon, le cas échéant, de répé-ter chaque jour ragglutination, et en attendant de con-sidérer comme cholérique todt vibrion isolé d’un cas cli-niquement caractérisé et répondant aux autres caractères bien connus du vibrion cholérique. ”

“ Chez l’homme sain on rencontrera d’autant plus soùl-vent les vibrions à réaetion positive que rhomme exa-miné aura eu plus de chanees d’être contaminé. Dans le milieu extérieur, les mêmes vibrions n’ont été rencontrés que dans des endroits où la souillure par des déjections cholériques était certaine ou tout au moins probable.
La découverte de l’agglutino-réàction qui, pratiqjuje-ment, est de beaucoup la plus commode, nous met donc
en possession d’une ’méthode de diagnostic rapide et d’une valeur telle, que tous les bactériologistes sont d’ac-cord pour l’employer aujourd’hui. ”

“ L’émulsion microbienne est représentée par le délayage dans 2 cc. d’eau physiologique de la culture entière d’un tube de gélose, âgée de dix-huit heures.
Le système héniolytique se compose du mélange de 1 volume de globules rouges de mouton lavés et dc 2 vo-lumes de sérum de lapin antimouton, privé également d’alexine par chauffagc d’une demi-heure à 50°.
Ou prend alors trois tubes que l’on remplit :
Le premier avec :
0 cc. 2 d’émulsion de vibrions cholériques;
0 cc. 0 d’immun-sérum;
0 cc. 1 de sérum de cobaye (alexine) ,
inier. ”

“ Malheureusement, à côté de ces colonies dont l’aspect est bien tranché, assez souvent, il en est d’autres qui sont troubles, à contours irréguliers, en un mot n’ayant rien de earaetéristique. Et de plus de nombreuses espèces mi-crobiennes, habitant les eaux en particulier, fournissent des cultures ressemblant parfaitement à celles décrites plus haut. ”

“ Pour les raisons données déjà au sujet de la réac-tion d’agghitination, on choisit le lapin qui donne en moyennc 40 cc. de sérum.
On mes’ure le titre bactériolytique obtenu, c’est-à-dire celui de la dilution faite dans du boiullon de viande dont 1 cc. additionné d’une anse de culture cholérique sur gé-lose ayant dix-huit heures d’étuve à 37°, virulente, injecte dans le péritoine d’un cobaye assure en une heure la dis-solution après transformation en granules de la presque totalité des vibrions. ”

“ Le bacille virgule en injec-tion dans le péritoine d’un cobaye devrait à coup sûr tuer
cet animal. II n’en est rien. Des vibrions banaux se sont montrés dans certains cas d'une virulence énorme, alors que des vibrions cholériques authentiques ont été tout à fait inactifs.
Les mêmes reproches peuvent être faits à la méthode qui déclare cholériques les bactéries qui, en injection in-tra-péritonéale, tuent te cobaye sain et laissent intact te cobaye auquel on a fait préalablement une injection de sérum anticholérique. ”

“ On mainlient ces tubes pendant quatre ou cinq heures à la température du laboratoire en agitant de temps en temps.
Passé ce délai, on ajoute à chacun des deux premiers tubes une goutte de la dilution de globules dans le sérum antimouton donl on a fait disparaître ralexine; le troi-sième reçoit une goutte d’une dilution de globules dans l'eau physiologique. ”

“ II suffit de relire le compte rendu des recherches de Ruffer, à Tor, en 1897, de Goltschlich au même lazaret, en 1905, 1906, 1907, pour se rendre compte d’une rela-lion incléniable cle cause à effet entre Jes \ibrions et les diarrhées de formes diverses.
En France, Metchnikoff reproduit chez l’homme et le jeune lapin une attaque typique de choléra par absorp-lion d’une culture d’un vibrion, isolé par Sanarelli d’une fontaine publique de Versailles, ne donnant pas la réac-lion d’aggluünalion et ne pouvant par aucun cle ses ca-ractères être assimilé au vibrion de Koch. ”

“ On isole dans ses fèces deux'vibrions monociliés, donnant la réaction de Pfeiffer, agglutinant l’un à 1/2000, rautre à 1/500 avec un sérum actif à 1/3000. La déviation du complément est positive pour l’ün, négativc pour l’autre. Aùcun d’eux n’est hé-molytique. Le sérum du malade n'agglutinait ni des vi-brions cholériques authentiques, ni les vibrions de ses selles, et ne donnait pas le phénomène de Pfeiffer. II n’avait donc subi aucune atteinte, comme en témoignait le manque des réactions d’immunité dans son sang. ”

“ A côté des réactions d’immunité obtennes en partanl des vibrions isolés des tèces, le séro-diagnostic dii cho-léra est possible, en recherchant 1 activité agglutinâtive et hactériolytique du sérum des malades vis-à-vis des vibrions spécifiques. ”

“ En derniér lieu, remploi systématique des animaux pendant une épidémie est pratiquement irréalisable, étant donné que souvent le bactériologiste devra opérer dans des laboratoires de fortune où rappovisionnement en animaux pourra difücilement avoir lieu. ”

“ On opère de la mème manière sur un certain nombre d’autres tubes en remplaçant rimmun-sérum par du sé-rum normal. On porte à rétuve à 37°, et au bout cle trois où quatre heures on examine en goutte pendante ou en préparations colorées. On îait les mêmes constatations que dans la réaetion de Pîeiffer et, de plus, au bout de dix-huit heures d’étuve, clans tous les tubes à séium normal les vibrions sont restés mobiles, alors que dans tout ou partie des tubes à immun-sérum les vibrions sont plus ou moins dissous. ”

“ Aujourd’hui, on recherche cle plus en plus ce que les bactériologistes appellent des milieux électifs, c’est-à-dire sur lesquels le vjbrion cholérique pousse en beau-coup plus grande abondance et beaucoup plus rapidement que les autres microorganismes des fèces. ”

“ II dépose sur deux lamelles deux goutles, r;une d’immun-sérum à 1/500, l’autre de sérum normal de même espèce à 1/50, après avoir dilué dans chacune une petite quantité de matières fécales. par exemple, et il renverse le tout sur une lame creuse pour rexamen. Si, comme cela arrive souvent, la parcelle sus-pecte provient de cultures presque pures (selles rizifor-rnes) , en cinq minutes en moyenne, on voit au microscope dans le sérum normal des vibrions très mobiles, tandis que dans l’autre, ils sont complètement immobiles et su-bissent même un commencement d’agglutination. ”

“ Or, pendant aucune des quatre années énumérées ci-dessus, on n’avait entendu parler de choléra, ni aux Lieux-Saints, ni à E1 Tor; et po'urtant ce que nous avons dit plus haut des réactions du vibrion de Koch tendrait à faire considérer ces vibrions d’El Tor comme de vrais vibrions cholériques.
Pour résoudre le problème, posé en ces termes, les bactériologistes se sont adressés à trois ordres de faits quc nous étudierons les uns après les autres : rhémolyse: la déviation du complément: la sécrétion de toxines. ”

“ II est bien difficile devant ces faifs de ne pas penser qu’une partie au moins de ces gastro-entérites n’étaient pas des cas de choléra.
D’autres constatations ont été faites en 1908, à Manille, et en 1911 à Alexanclrie. Dans la première de ces villes, Mac Laughlain a trouvé, sur 376 personnes exposées au contage cholérique, 27 porteÏÏrs cle bacilles virgules et 46 porteurs de vibrions non spécifiques. Dans Ja deuxiè-me, sur 5.050 personnes arrivant de conlrées infectées,
on décela 12 porteurs de vibrions de Koch contre 14 de vibrions non spécifiques. ”

“ Dans tous les cas, faire des cultures denrichisse-ment avec 1 oc. de matières dans 50 cc. d’eau peptonée; après un séjour de six heures à l’étuve à 37° ou parfois de douze à dix-huit heures, prélever des anses de cul-tures et ensemencer sur gélose ordinaire et milieu de Dieudonné ”

“ METCHNIKOEF. — Recherches sur le choléra et les vibrions. Ann.
Inst. Past., 1893, VII, p. 403; Ann. Inst. Past., 1894, VIII, p. 529.
NEDRIGAILOFF. — La méthode de fixation d’alexine appliquée à rexamen des matières cholériques. Journ. de méd. de Kharkoff, t. VII, n° 5, 1909, pp. 360-381.
NEUFELD et WOLTHE. — Ueber elektive Nahrboden insbesondere den Dbieudo’nneschen Agar. Arb. a d. kais. Gesundh., t. XXXIII, f. 3, fév. 1910, p. 605.
PFEIFFER. — Nouvelles recherehes sur l’existence de l’immunité cho-lérique et sur les processus bactéricides spécifiques. ”