Ovalbumine

“ Le mode de préparation dn sérnm antiovalbnmine, son titre constant en précipitines, sa conservation rela-tivement longue (six mois à un an) permettent actuel-lement de considérer notre sérum antiovalbnmine comme un réactif très sensible, qne l’on pent avoir constamment Sons la main et qni, seul, est spécifique de l’ovalbumine. ”

“ La présence de l’ovalbnmine (dans l ’urine) , se traduit par la formation à la zone de séparation (dn réactif et de l’ùrine) d’nn anneau, plns on moins opaque et plns ou moins volumineux, mais tonjonrs très net et bien délimité. Cet annean seul est caracté-ristique et se produit très rapidement avec des doses d’ovalbumine snpérienres à 0 gr. 20 par litre, mais exige trois minntes qnand la dose d’ovalbumine est - inférieure à 0 gr. 10 par litre. En aucun cas, il ne fant tenir compte du léger louche plus on moins ditfnsé dont l’origine vient d’être expliqnée. ”

“ Après examen, on retrouva sur les~ por-teurs et dans leurs bag'ages les fîoles contenant encore le blanc d’oeuf ayant servi à la simulation. Par l’emploi du serum antiovalbumine, en quelques minutes, ces albumi-nuriques ehroniquesi furent reiconnus oomme étant des simulateurs et la superoherie put être déoelée à temps (1) .
(1) La réaction des précipitines avait été faite par M. le Profes-seur BARRAL.
CHÂPITRE V
Recherche de l’ovalbumine dans l’urine. Mode opératoire. ”

“ Nous avons vu aussi que les différentes matières albuminoïdes ne se comportent pas de la même façon vis-à-vis des enzymes protéolytiques : la fibrine, l'ovalbumine, la globuline, mises en présence de mêmes quantités de pepsine, ne s'hydrolysent pas pareillement ; certains de ces produits se peptonisent beaucoup plus facilement que d'autres. On peut encore constater des différences frappantes dans l'attaque d'une même matière albuminoïde, suivant l'état qu'elle présente : c'est ainsi que l'albumine d'oeuf crue est d'une résistance bien moins grande que l'albumine coagulée. ”

“ Lorsque l’nrine renferme de l’ovalbumine, on obtient par la cbaleur, après addition de qnelqnes gouttes d’acide acétiqne an dixième, nn précipité ayant nn aspect assez particnlier ; il est cailleboteux, formé de grnmeanx plns on moins filamentenx, coton-nenx, denses et tombant assez rapidement an fond du tube à essai. ”

“ II injectait par voie sous-cutanée à des lapins, pen-dant deux mois, de l’ovalbumine (de 2 à 8 centimètres cubes) ou du sang humain défibriné (2 à 11 centimè-tres cubes) ; il injectait aussi du sang de lapin des cobayes.
Le sérum de ces animaux au bout de deux mois précipitait soit l’ovalbumine, soit l’albumine du sang humain suivant l’injection qu’ils avaient reçue. II mettait en présence dans des tubes à essais minces et bas, dix gouttes de sérum précipitant absolument clair, avec dix gouttes d’urine ou de sang à exa-miner. ”

“ Recherche de l’ovalbumine dans les matières albuminoïdes extraites de l’urine. — Saturer 25 centi-mètres cubes d’urine par du sulfate d’ammoniaque, laisser en contact 10 minutes ; filtrer ; verser sur le filtre, bien égoutté, 5 centimètres cubes d’eau distillée pour dissoudre le précipité, puis laver de nouveau le filtre avec 20 centimètres cubes d’eau physiologique renfermant 9 grammes de NaCl pour 1000 centimè-tres cubes d’eau distillée ; faire repasser sur le filtre, à plusieurs reprisés, le filtrat, jusqu’à ce que tout le précipité soit dissout. ”

“ Comme on peut s’en rendre compte à la lecture de l’exposé qui précède,mous aVons tenu à rapporter fidè-lement, d’une façon impartiale, les diverses opinions des auteurs ; d’une manière générale, l’action spéci-fique du sérum antiovalbumine est admise par tous pour identifier l’ovalbumine de poule dans l’urine. Le seul reprocbe que l’on puisse faire à la technique de cette méthode biologique, si précieuse, e^t l’appari-V
l’appari-V
. ”

“ Pour cela il introdui'sait à l’aide d’une sonde molle 60 centimètres cubes d’ovalbumine dans l’estomac des mêmes lapins. Ascoli a pu déceler, par le ferro-cyanure, dans l’urine de ces lapins de l'albumine et à laide de ses sérums précipitants il identifialaprésence d’ovalbumine et d’albumine du sang de lapin. ”

“ Si l’emploi d’un sérum anti-ovalbumine de poule permettait de clifférencier les albummes du blanc d’oeuf des albumines pathologiques de l’urine de l’homme, il importait d^’étudier sur un grand nombre d’échantillons d’urine humaine l’action de ce sérum et de savoir comment il se comporterait vis-a-vis d uri-nes plus ou moins riçhes en sels, la réaction des preci-pitines étant une réaction physico-chimique. ”

“ Ajouter, à froid et par gouttes, en agitant, à l’urine suspecte l’acide nitrique de D = 1,2 jusqu’à ce-qu’il se produise un loùche persistant, ou suivant la dose d’albumine, un précipité. Additionner ensuite le mélange d’un égal volume d’alcool à 95°, mélanger. L’urine contenant de l’albumine pathologique (sérine ou globuline) devient limpide, tandis que le trouble s accentue ou passe a l’état de précipité dans celle qui contient de l’ovalbumine. ”

“ Pour obtenir un bon sérûm antiovalbumine, il est donc utile et nécessaire d’injecter aux lapins, au
[texte manquant]
(1) L’apparition des précipitines par injectiôns soue-cutanées de petites doses d’ovalbumine —on Obtient les mêmes résultats après d* semblaLles injections intrapéritonéaies — est bien plus lente à se produire (30 jours environ) ^ que lorsqu’il s’agit d’hémolysines '8 jours d’après SÉZARY) ; elle varie du reste d’un animad à l’autre. ”

“ Le mélange d’ovalbumine et d’eau de Vichy (sources Chomel, Hôpital, Grande Grille) , pendant une heüre, à la température de la source, modifie pro-fondément les propriétés sensibilisantes du blanc d’oeuf. L’action est plus marquée avec l’eau prise au griffon qu’avec l’eau transportée. Chomel est plus active que les deux autres sources, vis-à-vis de l’oval-buminc. Avec le, sérum, les effets modificateurs étaient semblables avec les trois sources. ”

“ Le serum antiovalbumine de poule, par sa réaction spécifîque des précipitines, identifiera, de façon pré-cise, soit dans Purine même, soit dans le liquide phy-siologique contenant les substances albuminoïdes
extraites de rurine par le snlfate d’ammoniaque, l’albumine de l’nrine sonmise à Panalyse. ”

“ De même qu’en méde-eine légale, seule la réaction des précipitines a de la valeur pour afflrmer la présence de sang d’homme, -on ne pourra afflrmer de façon absolue la présence, dans une urine, de l’ovalbumine, si l’on n’a pas obtenu le précipitê spécifique d’un, sérum antiovalbumine à son contact. ”

“ Dans nn senJ cas, le sérum anti-ovalbnmine ponrra se montrer en défaut ; ce cas ne s’est jamais révélé dans la pratique, et npns nons sommes bien gardés de l’indiqner dnrant les bostilités. Nons avons reconnn en effet qne, si le simnlatenr, an lien d’introdnire dans son nrine de l’ovalbumine, y versait de l’ovalbn-minate de soude, le sérnm antiovalbnmine serait sans action snr l’ovalbnmine transformée ; — encore fan-drait-il expressément qne toute l’ovalbnmine (1) soit transformée en sel alcalin, ponr ne pas obtenir de précipité. ”

“ Une lapine gravide est en général pen prodnctrice de précipitines.
Malgré tontes les précantions minntienses qne l’on peut prendre, il arrive assez fréqnemment, ponr des
raisons que nons n’avong pu déterminer, que des lapins ne réagissent pas ou très peu vis-a-vis de l’ovalbumine, il est done utile de traiter trois ou quatre lapins au moins à la fois (1) . Sur dix lapins, on rencontre en général un ou deux lapins qui ne pro-duiront pas de sérum précipitant. Çertaines races de lapins paraissent même plus favorables que d’autres. ”

“ Ovalbumine. — Première expèrience. — Un malade atteint de dilatation d’estomàc reçoit tous les jours et pendant dix jours trois blancs d’oeufs dissous dans 150 centimètres cubes d’eau etlO gram-mes de dextrine. Le onzième jour^ il reçoit deux lave-ments semblables, on lui fait ensuite une prise de sang.
Le sérum du sang de ce malade, mis en présence de sérum antiovalbumine, ne donna pas de précipité. Pas de précipité non plus avec ovalbumine, ■
Deuaeième exjpèrience. — Un individy reçoit pendant douze jours un lavement composé d’un oeut complet et de 200 grammes de lait. ”

“ Toutes les fois que l’on se trouvera en présence d’une urine ayant un aspect trouble et montrânt à 1 ’examen microscopique de faux cylindroïdes le plus souvent chargés de bactéries, on pourra supposer une albuminurie simulée.
Les réactions chimiques (précipité caillèboteux par la chaleur, reactif de Maurel) , les méthodes chimiques de Peltrisot surtout (acide acétique) et de P. Godfrin (chlorure de sodium acétique) fourniront des indica-tions précieuses et de fortes présomptions quant à la nature (ovalbumine) de la substance albuminoïde introduite dans Purine suspecte. ”

“ Ramener l’nrine à un taux d’albumine ne dépassant pas un gramme d ’albumine par litre. Laisser en contact pen-dant deux heures, 10 centimètres cubes d’urine avec 2 centimètres cubes d’acide acétique. Le mélange filtré au bout de ce temps ne doit plus donner de trouble par le réactif de Tanret.
Lorsque l’urine renferme de l’ovalbumine, on obtient avec l’acide acétique un précipité filamenteux. Lorsque l’urine renferme de l’albumine pathologique, elle précipite après filtration par le Tanret. ”

“ Chez nn sujet non malade, l’examen microscopique dn prodnit de la centrifngation d’nne nrine additionnée d’ovalbumine, ne montre jamais (1) d’éléments histologiqnes d’ori-gine rénale (tnbnli et cellnles dn bassinet) , indices d’nne néphrite ; toutefois, il nons a été possible de reconnaître des simnlatenrs qni, atteints de néphrite chroniqne, additionjnaient lenr nrine d’ovalbnmine
(1) Si, après introduction de l’ovalbumine dans la vessie, il y , a réaction catarrhale, on trouvera naturellement des cellules épithé-liales de la vessie, des leuoocytes et même quelques hématies ”

“ Réactif de Maurel, réaction négative.
Réactif acéto-formol, réaction négative.
iSérum antiovalbumine, réaction négative.
Examen microscopique : présence de cellules épithé'- liales nombreuses ; absence de pus et de sang.
Gomme on le remarquera, la première èmission d’urine de S.. ; renfermait de rovalbumine, la seconde émission effectuée une heure après la précédente n’en contenait piüs et ne renf'ermait pas d’albumine p'athologique.
S... étant atteint de néphrite caractérisée par la pré-sence de cylindres hyalins dans la première émission de ses urines, et âyant dit avoir pris le. ”

“ Lorsque Purine renferme de Povalbumine, on voit se^ produire assez rapidement, à la limite de sépara-tion du liquide et de Purine (partie inférieure du tube) , un précpité qui va en augmentant de plus en plus, pour devenir très net au bout de quelques minutes ; en agitant, le trouble augmente. Le tube témoin ne doit jamais présenter de précipité, lorsque le sérum est bien conservé. ”

“ Dnrant les hostilités de 1916 à novembre 1918, les amponles de ce sérnm fnrent préparées an laboratoirè militaire régional de bactériologie qne nons avons eréé et dpnt nons avons été désigné comme chef par M. le Professeur Jnles COTJEMONT.
Rappelé à Nancy en novembre 1917 ponr reprendre notre enseignement, le serviee de la préparation dn sérnm antiovalbumine fnt confié à M. le Docteur J. GAT®, notre collaborateur, qni a bien vonln conti-
nuer à en assurer le fonctionnement. ”

“ P. GODFRIN {1918) , incline néanmoins à recbercber l’ovalbumine de l’nrine par les métbodes cbimiqnes, et signale qne le sérum antiovalbumine de poule est trop spécifique pnisqn’il ne donne pas de précipité avec les nrines renfermant l’ovalbnminate de cane (1) . Le même antenr fait remarquer le -loncbe qne l’on constate quelqnefois avec l’antisérnm an contact de l’nrine. ( ( Peut-être, dit-il, en note {Journ. pharm. et chim. 1918, p. 394) , fant-il attribuer à nne altération du sérnm le loucbe assez accnsé qne l’on obtient par-fois avec certaines nrines non suspectes et de densité normale. ”

“ Dans ce cas, il suffit, comme nons l’avons déjà dit précédemment, de cblornrer de teïles urines ponr éviter généralement le louche en qnestion. II n’y a d’aillenrs rien de conparable entre ce louche (dû à la précipitation légère des globnlines dn sérnm an contact d’nn liqnide peu riqhe en snbs-tances salines) et la formation dn précipité qne l’on obtient en présence des faibles qnantités (0 gr. 10 par litre par exemple) d’ovalbumine qne l’on pent ren-contrer dans l’urine. ”

“ « Contrairement à ce què j’ai précédemment'-écrit, dit P. GODFEIN (1918) , ce réactif est assez sensible ; mais, son action, de même que celle de l’acide acé-tique (1) , ne s’exerce pas snr l’ovalbumine en solntion aqueuse et elle s’exerce mal en présence d’nne trop faible proportiqn de sels. C’est ponrqnoi les essais qne j’avais çffectnés snr des urines dilnées avec de l’eau ne m’avaient pas fourni de résultats satisfai-sants. En somme, comme le réactif de'Manrel, c’est nniqnement à l’acide acétiqne qne celni-ci doit ses propriétés. » ”

“ En résnméj selon le procédé de PELTRISOT, ponr effectner la recbercbe de Povalbumine dans nne nrine renfermant moins de 1 gramme d’albnmine par litre, il snffit de mesnrer 10 centimètres cnbes d’nrine, d’y ajouter 2 centimètres cnbès d’acide acétiqne pnr. Laisser en contact denx beures. Si l’on constate la formation d’un précipité floconnenx, il y a présomp-tion d’ovalbnmine. Dans le filtrat, on ne devra pas retrouver par ie Tanret on le NaCl de snbstance albn-minoïde. ”

“ De la valeur des réactions chimiques pour la différen-ciation de Povalbumine de la séro-albumine dans l’urine de Phomme.
Les réactifs cliiiniqnes (acéto-formol et Maurel) qne nous avions indiqnés en 1915 connne ponvant être utilisés ponr mettre en évidence l’ovalbnmine de ponle dans l’nrine de l’homme, ont fait, depnis, le snjet de nombreuses recbercbes de la part-des antenrs. ”

“ Toutes les fois qn’il sera possible, il sera donc préférable d’employer le réactif de Manrel.
La présence d’ovalbnmine se tradnit par la forma-tion, en quelques minntes, d’nn précipité à la limite de séparation des liquides. Ces deux réactions ne doivent être considérées qne comme indicatrices et non comme spécifiqnes. Elles ne se prodnisent pas en général avec l’albnmine et la globuline dn sérum de l’homme, mais penvent avoir lieil ayec certaines albumines (albnmoses) de l’nrine humaine, on lorsque l’urine renférme dn sang et dn pns. ”