Microtome

“ Il y a toujours avantage à s'habituer aux coupes à la main ou à l'aide du microtome de Ranvier.
Mais, le plus souvent, il faut avoir recours.à des appareils spéciaux.
D'une façon générale, on utilise unmierotome différent, suivant que les coupes ont subi l'inclusion à la celloïdine ou à la paraffine.
En histologie ocülairef l'inclusion à la paraffine trouve surtout son application dans l'examen du nerf optique; le petit microtome à bascule construit par Dumaige (rocking) , qui permet decouper des pièces de petit volume, convienttrès bien dansce cas. ”

“ Les coupes faites par un habile micrographe ou obtenues avec un excellent microtome ont, dans le cas d'un grossissement un peu fort, une épaisseur égale et souvent supérieure au déplacement total que peut subir l'objet, pour que son image se forme aux limites extrêmes de la vi&ion distincte de l'observateur. ”

“ Lorsque cette dernière commence à former par évaporation, une • croûte assez ferme à la surface, on immerge le tout dans le chloroforme, où le durcissement s'achève dans les quarante-huit heures.
Si on n'est pas disposé à pratiquer les coupes de suite, on laisse les objets dans le chloroforme.
Fonctionnement du microtome. — L'objet sorti du chloroforme doit être collé sur un morceau de bois blanc de forme appropriée à la pince du microtome, cylindrique ou cubique, suivant le cas. Le collage s'effectue avec la solution épaisse de celloïdine. ”

“ Le tranchant ne se place en avant que pour le morfilage qui a lieu après l'aiguisage sur les meules. C'est le contraire qu'il faut faire ici.
TECHNIQUE DE LA SECTION.
Nous avons quitté les manipulations une fois l'inclusion achevée. Il s'agit maintenant, avant de faire fonctionner le microtome, de réaliser le taillage, le montage et Y orientation du bloc. On donne le nom de bloc à la masse de paraffine renfermant l'objet inclus, lorsqu'elle est taillée en un cube régulier propre à être monté sur le microtome. Ce taillage est une condition sine qud non pour le débit des coupes en série. ”

“ Si l'objet est tel qu'il n'y a pas inconvénient à le coller directement sur un support adapté au Porte-objet du microtome, et si l'on n'a pas besoin de manipulations spéciales d'orientation de l'objet ni de sériation des coupes, aucune inclusion spéciale n'est nécessaire et aussitôt que les objets sont len Pénétrés par la solution forte on peut procéder au durcissement. ”

“ Mais l'inclusion en celloïdine est celle à laquelle nous aurons le plus souvent recours t soitque l'on veuille examiner des globes oculaires en totalité, soit que l'on désire étudier des parties telles que la rétine, facilement altérables. par les manipulations qu'exige l'inclusion en paraffine.
Pour les coupes en celloïdine, le microtome à plan incliné modèle n° 3 construit par Reichert (de Vienne) nous a toujours donné satisfaction,, comme solidité et comme facilité de manipulation et de nettoyage. ”

“ En conséquence, à moins que l'anatomiste ne puisse disposer de deux microtomes, l'un pour la paraffine, l'autre pour le collodion, les tissus frais ou congelés, etc. (ce qui sera bien) , il fera mieux de choisir un modèle n'ayant peutêtre pas les qualités spéciales que seul peut avoir un instrument imagine en vue d'un genre de travail très spécial, mais qui donne des résultats suffisamment bons en même temps avec la paraffine et avec les masses molles. ”

“ En outre, parmi ceux qui sont livrés à leurs propres moyens, bien peu se servent concurremment de la paraffine et du collodion, chacun tendant à adopter une méthode de coupes unique, celle qui a le plus d'acceptions ou celle qui lui réussit le mieux.
ADAPTATION D'UN MICROTOME QUELCONQUE AUX COUPES A LA PARAFFINE. — Tous les microtomes dans lesquels le rasoir est mobile se déplaçant le long d'une coulisse, d'une glissière, ou tournant dans un plan perpendiculaire à un axe monté sur pointes" ont les mêmes inconvénients : 1° Le rasoir libre à une extrémité manque de rigidité ”

“ Parmi les nombreux modèles de microtomes qui briguent de nos jours la faveur des histologistes, il y en a bon nombre qui sont peu recommandables, bon nombre aussi qui laissent peu à désirer. Nous voulons appeler l'attention du débutant sur deux points qui nous paraissent capitaux. ”

“ Au microscope, c'est une roche andésitique fraîche, à feutrage floconneux, gris clair, de microlithes. Cristaux porphyriques de plagioclase, beaucoup d'hypersthène, peu d'augite, beaucoup de biotite, quelques grandes olivines à inclusions de petits octaèdres de picotite, bruns par transparence, de la magnétite et des apatites brunes, d'aspect pulvérulent. Le feutrage de microlithes contient un verre, le plus souvent incolore, mais aussi d'un brun clair à certaines places, avec microlithes de pyroxène, de plagioclase et de minerai de fer. ”

“ C’est ainsi que, dans les préparations minces de granit, on voit le polychroïsme du mica s’accuser par des passages du brun clair au gris très foncé, et, dans les syénites, celui de l’amphibole se manifester par des changemens de teinte du jaune clair au vert-bouteille, suivant la façon dont on opère l’éclairement. Les données que fournit l’examen optique suffisent en général, à elles seules, pour permettre de déterminer sûrement les minéraux que l’on aperçoit au microscope dans une lamelle mince. ”

“ Au microscope, la roche microlitique passant à la structure grenue est formée de phénocristaux limpides d'oligoclase-andésine dont les clivages ou les cassures sont remplis de petits cristaux de pyroxène avec quelques microlites d'oligoclase, disséminés dans une masse microgrenue, à éléments assez gros, composée de petits grains de quartz et de pyroxène avec cristaux de feldspath semblant formés de fibres rayonnantes mais qui s'éteignent en bloc comme un cristal unique ”

“ Le microscope apporte son puissant concours à la solution de la question. Il montre que certains corps passent brusquement de l’état amorphe à l’état cristallisé, tandis que d’autres au contraire présentent des états intermédiaires qu’il apprend à connaître ; à cette seconde catégorie de produits appartiennent la silice et ses composés, c’est-à-dire la plupart des minéraux qui font partie intégrante des roches. Dans les roches volcaniques par exemple, on voit à l’aide du microscope les différens états que peut affecter chacun de ces corps ”

“ Mais il n’en a pas été de même pour un certain nombre de porphyres et pour la plupart des roches volcaniques. Ici, la seconde phase de consolidation n’a pas été complète ; elle a donné naissance à un immense développement de cristaux, mais une certaine quantité du magma initial est encore demeurée à l’état de matière fondue et ne s’est solidifiée que postérieurement.
Les cristaux du second stade sont dans ce cas de très petites dimensions, ce qui leur a fait donner le nom de microlithes ; le microscope seul permet de les apercevoir. Ils ont été produits dans un liquide en mouvement ”

“ La pâte des porphyres, que l’on regardait jadis comme un magma informe, apparaît comme une agglomération de myriades de cristaux. La matière qui fait le fond des roches volcaniques, matière d’apparence homogène, même quand on l’observe à la loupe, devient un riche tissu de minéraux divers lorsqu’on l’examine avec un grossissement suffisant au microscope. Il n’est pas une roche cristalline dans laquelle cet instrument ne fasse découvrir ainsi une quantité souvent innombrable d’échantillons cristallisés demeurés jusqu’alors tout à fait inaperçus. ”

“ Avant l’application du microscope à l’étude des roches, les géologues avaient vainement cherché à se rendre compte de la constitution de cette matière imparfaitement fluide ; les hypothèses les plus étranges avaient été émises sur les causes de son extrême viscosité. Maintenant on sait qu’une lave, au moment où elle arrive au jour, possède déjà presque tous ses cristaux ; les minéraux du premier stade de consolidation y sont tout formés et les microlithes, bien que continuant à se multiplier, y sont déjà d’une extrême abondance. ”

“ Parmi les échantillons cristallins tranchés dans une coupe, les uns offrent une surface toujours lisse ; d’autres se montrent au contraire constamment criblés de fines inégalités et possèdent un aspect chagriné tout spécial. Quand un minéral est flexible, le microscope le montre en feuillets d’une ténuité extrême, contournés et tordus ; s’il est rigide, cette propriété est attestée par des cassures à arêtes vives.
En un mot, une foule de caractères distinctifs des minéraux cristallisés très petits peuvent être constatés au microscope ordinaire, privé de tout moyen auxiliaire spécial ”

“ Les commençants commettent ordinairement cette faute: ils posent, sous le microscope, des masses qui, divisées convenablement, auraient suffi à faire une douzaine de préparations distinctes. Les objectifs puissants exigent toujours que les objets à examiner soient minces et petits. On se bornera rarement à des recherches avec la lumière directe, quand l'objet peut être placé sur la platine du microscope, à sec et à découvert. On saura que, généralement, il est nécessaire de mouiller l'objet avec de l'eau ou avec des liquides conservateurs, tels que la glycérine, etc. ”

“ Le microscope fait apercevoir dans les minéraux des détails de structure qui échappent à tout autre procédé de recherche ; il montre les inclusions, permet d’en apprécier la nature, il révèle les altérations secondaires des cristaux, les modifications qu’ils ont subies, soit spontanément, sous l’influence des forces moléculaires intérieures, soit indirectement sous l’action des agens extérieurs. Un corps est-il fortement réfringent, le fait est aussitôt dévoilé par les ombres fortement accusées qui lardent le pourtour de ses sections et par le relief accentué qui les signale. ”

“ Au microscope on ne voit en fait de cristaux porphyriques que quelques plagioclases et pyroxènes. La masse fondamentale est un verre limpide, contenant des bâtonnets de feldspath, des microlithes d'augite, du minerai et de la limonite brune, ainsi que des parties troubles et foncées, à délimitation irrégulière ou circulaire, où les microlithes sont encore plus denses; il est rare que les fibres soient nettement groupées en rayons, comme dans les vrais sphérolithes. ”

“ Au microscope: beaucoup de cristaux porphyriques de biotite, en grande partie transformée en grains noirs sur les bords, en rectangles étroits et en plaques à limite hexagonale ; pyroxène monoclinique, vert clair.
Masse fondamentale laineuse de microlithes d'augite, avec quelques rares microlithes de plagioclase, grains de minerai et verre incolore.
Roche remarquable, parce qu'elle ne contient presque pas de feldspath. Andésite à augite et mica, presque sans feldspath. La masse fondamentale correspond à celle de certains basaltes et andésites. ”

“ Au microscope, on voit qu'ils sont constitués par de l’apatite, de l’oligoclase-albite, de l’orthose, de la biotite et du quartz. Certains d’entre eux présentent en outre : les uns, de la magnétite, de l'amphibole et de la micropegmatite ; les autres, de l'ilménite et du sphène (celui-ci pouvant être soit automorphe, soit secondaire) . On peut encore y trouver, comme produits secondaires, de l'épidote et de la calcite.
Dans toutes ces roches la biotite est remarquablement abondante. Les lamelles de ce minéral, constamment orientées, entourent souvent les autres éléments. ”

“ Lorsque la réaction est jugée terminée, on enlève l'excès de réactif, on monte en préparation qui est examinée au grossissement voulu.
Il a été imaginé des dispositifs spéciaux pour les microscopes destinés aux études microchimiques. Dans presque tous les instruments proposés dans ce but, le corps du microscope est renversé; un coude muni d'un prisme à réflexion totale permet de placer la partie oculaire dans une situation commode pour l'examen. De cette façon, l'objectif se trouve placé sous l'objet pour éviter tout contact nuisible avec les réactifs ”

“ Au microscope c'est une substance uniformément blanche et trouble, ne polarisant pas la lumière, de sorte qu'il n'y a pas moyen de distinguer divers minéraux. Mais, comme la composition ne correspond pas à celle d'un minéral connu, il est pourtant probable que la substance blanche est un mélange intime, provenant d'une décomposition de la péridotite, avec enlèvement de la magnésie et apport de chaux et d'eau, ce qui a donné naissance à un ou plusieurs zéolithes. ”

“ La science actuellement ne dispose pas d'instrument suffisamment puissant pour qu'il soit possible à nos yeux de discerner des infiniment petits de dimensions inférieures au 1/8 de micron. Le jour où les progrès de l'optique auront rendu possible la construction d'un ultra-microscope mille ou dix mille fois plus puissant que les instruments utilisés aujourd'hui; ce jour les savants découvriront dans le sang d'innombrables matières que nos moyens ne nous permettent pas de déceler. ”

“ Ainsi le microscope rend compte des conditions qui ont présidé à la genèse des minéraux.
Une autre conquête précieuse de la géologie micrographique a été la détermination exacte des élémens intégrans des roches. Celui qui pour la première fois examine au microscope une lamelle mince taillée dans un caillou quelconque demeure le plus souvent émerveillé devant la multitude et la variété des élémens qui frappent son regard. Souvent, plus la roche considérée à l’œil nu semblait compacte et plus elle se montre alors riche en matériaux cristallins. ”

“ Quant à l’analyse elle-même, rien ne la remplace, rien n’équivaut à la détermination complète des élémens chimiques qui entrent dans la composition d’une substance dont il s’agit d’apprécier rigoureusement la nature minéralogique. Le microscope, loin de faire abandonner ou reléguer au second plan les manipulations chimiques, n’a fait qu’en démontrer la nécessité. ”

“ La préparation est alors portée sur la platine, rendue soigneusement horizontale, d'un bon microscope. L'objectif employé, de très fort grossissement, a une faible profondeur de champ, et l'on ne peut voir nettement, à un même instant, que des. grains situés dans une tranche horizontale très mince dont l'épaisseur est de l'ordre du micron. Si l'on élève ou abaisse le microscope, on voit les grains d'une autre tranche. ”