Celloïdine

“ Le bloc de celloïdine ne doit jamais être mis en contact avec l'alcool, car l'eau que contient ce dernier troublerait immédiatement la celloïdine.
Les coupes restent sur le couteau, où elles présentent des plissements; on les prend avec les doigts et on les jette aussitôt dans l'alcool à 85 p. 100, où elles se déplissent aussitôt. Il est bon de changer une autre fois l'alcool afin d'enlever toute trace d'huile.
On peut abandonner la pièce plusieurs heures ou même une demi-journée sur la pince du microtome sans la couper. ”

“ On peut prendre un mélange de 1 volume d'éther, ou 2 ou jusqu'à 10 volumes pour 1 d'alcool absolu ; c'est un point qui n'a pas grande importance.
290. Les bains de collodion. — Le secret du succès ici c'est de pénétrer les objets d'abord par une solution peu épaisse, ensuite par une solution très épaisse. L'emploi de la celloïdine est très coin' mode, parce qu'il permet de titrer exactement les solutions. Suivant APATHY (Zeit. f. wiss. Mik., VI, 2,1889, p. 164) , il est bon d'employer la celloïdine desséchée. ”

“ L'inclusion du segment antérieur nécessite un soin tout particulier. Il faut en effet que la chambre antérieure soit bien pénétrée par la celloïdine; sinon la cornée n'étant pas maintenue par sa face postérieure risque de se plisser au moment où l'on monte les coupes. Aussi doit-on laisser le segment antérieur le plus longtemps possible dans la celloïdine faible.
Les coupes sont recueillies avec beaucoup de précaution; il arrive souvent, en effet, qu'à ce moment le cristallin s'échappe de sa capsule. ”

“ Méthode de Weigert pour la coloration des libres myéliniques. — 1° Fixation et mordançage.
— a. Fixation et mordançage des pièces dans le bichromate de potasse (liquide de Müller) ; b. Compléter le durcissement par les alcools sans laver au préalable à l'eau; c. Inclusion en celloïdine et collage sur liège par la méthode ordinaire; d. Mordançage de la pièce dans une solution saturée d'acétate neutre de cuivre allongée d'un volume d'eau. On maintient le tout à l'étuve pendant un à deux jours. Après traitement par le cuivre, les tissus sont devenus verts, le manteau de celloïdine vert bleu. ”

“ L'inclusion en celloïdine ne se prête pas, comme l'inclusion en paraffine, à la confection de coupes en série. Les coupes se font toujours beaucoup moins régulièrement; un certain nombre sont manquées; l'épaisseur des autres n'a pas l'égalité mathématique que l'on obtient avec les microtomes à paraffine. Néanmoins, il est souvent très
utile de conserver l'arrangement en série de coupes obtenues en celloïdine. ”

“ Les coupes sont portées dans un cristallisoir avec 20 cent. cubes d'alcool à 90°. Si elles ne proviennent pas de fragments colorés en masse — qui sont à recommander — elles peuvent être encore colorées ; l'hématoxyline même donne à la celloïdine un ton légèrement bleuâtre. Les coupes ne doivent pas être portées dans l'alcool absolu, car celui-ci dissout la celloïdine. Elles sont portées de l'alcool à 90-95° dans environ 5 cent. cubes d'huile d'Origan et lorsqu'elles sont éclaircies, montées dans le baume. ”

“ Nous recommandons d'éviter l'éther toutes les fois que son emploi n'est pas absolument nécessaire, car c'est un réactif peu favorable à la conservation des structutres cellulaires. La solution de collodion, qui doit être très peu épaisse pour le premier bain, peut être faite de collodion ordinaire avec addition d'un peu d'éther, ou, ce qui est mieux, de celloïdine dissoute dans un volume considérable d'un mélange à parties égales d'éther et d'alcool absolu. On laisse les objets dans cette solution, dans un flacon bien bouché, jusqu'à ce qu'ils en soient bien pénétrés ”

“ Des coupes épaisses, ou des séries de coupes dans la celloïdine demanderont une différenciation spéciale. On peut prendre pour cela ou bien cette solution d'acide acétique, ou bien le liquide décolorant du numéro précédent allongé d'eau. En ce cas, on aura un fond jaune.
Les points de supériorité de cette méthode sur la méthode de 1885 sont que la différenciation après coloration n'est pas nécessaire; que les précipités fort gênants qui, dans l'ancienne méthode, se formaient très souvent à la surface des préparations, ne se produisent pas; que les manipulations sont plus faciles ”

“ Mais l'inclusion en celloïdine est celle à laquelle nous aurons le plus souvent recours t soitque l'on veuille examiner des globes oculaires en totalité, soit que l'on désire étudier des parties telles que la rétine, facilement altérables. par les manipulations qu'exige l'inclusion en paraffine.
Pour les coupes en celloïdine, le microtome à plan incliné modèle n° 3 construit par Reichert (de Vienne) nous a toujours donné satisfaction,, comme solidité et comme facilité de manipulation et de nettoyage. ”

“ Elles sont très friables et se brisent souvent lorsqu'on pratique des coupes; pour bien les observer, il faut recourir à l'inclusion dans la celloïdine (fig. 17) (*) .
Les cellules réticulées et sclérifiées provenant de la prolifération de l'Ep. i. P., au contraire, se colorent en jaune par le chlorure de zinc iodé.
(*) Dans les figures 17, 18 et 19, la primine, la secondine et le nucelle se sont partiellement décollés sous l'effort du rasoir, ce qui les a rendus plus distincts. ”

“ On passe ensuite la coupe dans l'eau. A ce moment, les portions nerveuses de la préparation tranchent par leur coloration bleu foncé sur le fond plus clair de la celloïdine.
b. Premier bain de différenciation dans une solution fraîchement préparée de permanganate de potasse à 0,25 p. 100, pendant vingt à trente secondes ; au sortir de ce bain, la celloïdine de la coupe a une coloration brun rouge sur laquelle les parties myéliniques tranchent par leur coloration brun noirâtre.
c. Laver rapidement à l'eau ; d. ”

“ Alcool à 95° 20 —
Éther rectifié 75 —
Huile de ricin 5 —
Il peut être rendu plus souple et moins rétractile, par l'addition d'acétone. Rappelons que les principales associations médicamenteuses réalisées avec le collodion sont le collodion iodé, le collodion salolé ou salicylé (à 1 p. 10) , le collodion au baume du Canada (à 1 p. 15) , à l'ichthyol, à l'acide pyrogallique (à 1 p. 10) .
Le filmogène, préconisé par Schiff, est une solution de celloïdine dans de l'acétone, additionnée d'un peu d'huile : l'enduit obtenu est assez souple.
La traumaticine est d'un emploi fréquent en France. ”

“ Pour éviter cet inconvénient, nous avons préféré plonger les coupes elles-mêmes dans ce mélange : celles-ci ayant été faites à la paraffine, puis, collées sur lame, sont débarrassées de leur masse d'inclusion, lavées à l'eau et plongées dans la solution d'euchlorine. La dépigmentation est alors très rapide par suite de la minceur de la coupe et les éléments sont à peine modifiés.
Il est impossible d'agir de la même manière avec des coupes faites à la celloïdine ”

“ Ceci fait, avec un bistouri coupant très bien ou avec un rasoir, on enlève par petits fragments toute la celloïdine qui entoure le bulbe et en même temps la sclérotique, en procédant un peu comme on fait pour peler un fruit. On ne con-
serve qu'une très mince pellicule scléroticale et on évite soigneusement d'entamer la choroïde. ”

“ Alcool 10 — Eau 90 — Solution saturée de carbonate de lithine 1 —
1 Cela veut dire que le mordançage se pratique, ou peut se pratiquer, sur des pièces déjà préparées pour les coupes par inclusion dans le collodion ; la solution de cuivre pénètre suffisamment à travers le collodion. C'est encore une qualité précieuse du collodion. MAX FLESCH (Zeit. f. wiss. Mik., 1886, p. 50) trouve que le mordançage dans la celloïdine entrave la coloration ultérieure qu'on peut désirer pratiquer par d'autres réactifs que l'hématoxyline, et préfère mordancer ”

“ La celloïdine devient jaune et transparente comme du verre. La pièce acquiert ainsi une grande transparence. Lorsqu'il se produit dans le bloc des troubles blanchâtres, c'est qu'elle n'est pas absolument anhydre. Cela n'empêche pas d'ailleurs de pratiquer les coupes; cela ne fait que gêner pour l'orientation de la pièce. On la sort de l'huile, et on la laisse une demi-journée environ à ïair libre, ce qui rend les coupes encore plus faciles à pratiquer. Lorsque la pièce a été bien pénétrée, on ne doit pas constater sur ses côtés le moindre affaissement pendant qu'elle séjourne à l'air. ”

“ On se la procure chez Grübler, par tablettes de 40 grammes, qu'on dissout dans un mélange à parties égales d'alcool absolu et d'éther.
Il n'y a rien à peser ni à mesurer. On ajoute la celloïdine par fragments, jusqu'à ce qu'on ait obtenu une solution épaisse, sirupeuse. Cette solution sert a faire la solution fluide en l'allongeant de 2 volumes du mélange alcool absolu-éther; 5° Chloroforme. Une provision de 250 centimètres cubes suffit ; 60 Solution très fluide de collodion non riciné pour le collodionnage des lames en vue du collage des coupes. ”

“ Ces bandelettes, pour éviter la dessiccation des coupes, sont déposées sur du papier Joseph imbibé d'alcool à 80".
Quand on a une bandelette complète, on la renverse sur une lame fraîchement collodionnée, où les coupes adhèrent; procédé lent et fastidieux, s'il en fut, quand il s'agit de débiter un objet en entier.
Collage et montage des coupes au collodion. — Pour coller les coupes à la celloïdine, on ne traite qu'une lame à la fois. ”

“ D'autres fois, les pièces gardent une coloration noirâtre foncée lorsqu'on les décolore au bisulfite, au lieu de la coloration roussâtre qu'elles devraient prendre.
Cela se produit quand le lavage avec la solution de carbonate de lithine a été mal exécuté, et n'a enlevé qu'une insuffisante quantité d'hématoxyline. Lorsqu'il a été bien fait, on doit voir la préparation trancher nettement sur le fond de celloïdine beaucoup moins coloré. L'habitude permettra d'éviter facilement ces erreurs de technique. ”

“ Lorsqu'on ne peut pratiquer les coupes immédiatement, on porte les pièces incluses en celloïdine, au sortir de l'alcool a 70°, dans l'eau où elles peuvent rester deux ou trois jours sans nuire à la coloration. L'inclusion à la paraffine est touj ours plus ou moins défavorable à la coloration du tissu nerveux.
Si l'on veut colorer les gaines myéliniques des fibres nerveuses, il convient d'ajouter de l'acide osmique à la solution de molybdate d'ammoniaque, dans la proportion de deux à trois gouttes de solution comique à 0,5 p. 100 à 25 centimètres cubes de solution de molybdate à 5 ou 8 p. 100. ”

“ Si on désire des coupes très fines, il est préférable de faire une véritable inclusion ; nous recommandons les petits procédés suivants : autour des petits blocs de flbre coller du papier de manière à former une petite boite sans couvercle ; dans cette petite cavité, on placera la pièce que Fon recouvrira de celloidine forte et on mettra le tout soüs un cristallisoir renversé de faQon à ne pas avoir une dessication trop rapide; deux ou trois fois par vingt-quatre lieures, pendant deux ou trois jours, on recouvrirala pièce de celloidine forte ”

“ Hématoxyline de Weigert sans y ajouter de carbonate de lithine (demi-heure à vingt-quatre heures à froid, une à deuxminutes à chaud) . Décoloration par la méthode de Pal. Alcool dilué. Alcool absolu. Xylol phéniqué. Baume de Canada. Les cylindraxes sontainsi colorés en bleu. Par cesdivers procédés, nous avonsobtenu de bonnes préparations ; l’inclusion à la celloïdine nous semble indispensable, les coupes à la paraf-fine s’effritent trop facilement au cours des diverses manipu-r lations. ”

“ DussE, elle aurait l'avantage de fournir une masse qui après durcisfcenign dans l'alcool à 85 p. 100 demeure parfaitement transparente. Mais pUis puisque par la méthode récente d'éclaircissement avant les coupes, que nous v ecrivons plus loin, on obtient avec la celloïdine ou le collodion ordi-
naire des masses d'une transparence parfaite, il me semble qu'on pourra pour la plupart des travaux se passer de photoxyline. ”

“ Les matières employées dans la tabletterie courante se sont d'ailleurs complètement transformées de nos jours par les produits minéraux et organiques nouveaux qu'a créés la chimie : le plus ancien, le celluloïd, à base de cellulose nitrée et de camphre, inventé en Amérique par les frères Hyatt, remonte à plus de cinquante ans; dur et élastique, non cassant, inattaquable par l'air, l'eau, l'alcool, les acides, son seul défaut est son inflammabilité. Le travail du celluloïd est l'industrie française d'Oyonnax, qui exporte à elle seule cent millions dç peignes féminins. ”

“ LA CELLULE. 81
colorent pas en bleu par les réactifs iodés de la cellulose ; ils se colorent en jaune orangé par la phénosafranine, et en bleu violacé, par le bleu de méthylène. Ils sont en outre susceptibles de se colorer par le brun Bismarck, la chrysoïdine, le violet de Paris, le violet Hoffmann, le rouge de Magdala, etc., si le liquide est neutre ou à peine acidulé par l'acide acétique. Ces colorations disparaissent en faisant agir l'alcool, la glycérine ou les acides ”

“ Si au collodion on ajoute un peu d'huile de ricin, on ob- tient un liquide visqueux se desséchant lentement et utilisé pour faire des ballons -très commodes pour les mélanges détonants. On fabrique aussi des vêtements avec le collodion ; il suffit pour cela de le couler entre deux plaques dont on a réglé l'épaisseur.
Celluloïd. — On le prépare en traitant le coton-poudre par un mélange d'acide sulfurique et d'acide nitrique. On triture pour en faire une pâte homogène qu'on blanchit soit avec le permanganate de potassium, soit avec l'acide sulfu-
reux. ”

“ Dissoutes dans le toluène et additionnées de camphre, et de chlorure stanneux et quelquefois de matières colorantes, les celluloses nitrées sont la base du celluloïd.
Sous Faction du chlorure de zinc, la cellulose peut fixer jusqu'à 25 0/0 d'oxyde de ce métal, et elle forme alors une masse que l'on peut tréfiler sous l'alcool en filaments très ténus.Epuisés par l'acide chlorhydrique et ensuite carbonisés en vase clos, ces filaments sont utilisés pour la fabrication des lampes à incandescence. ”