Albert Monthus

“ Il est une très mauvaise manière de recueillir le nerf optique ; elle consiste à procéder comme pour une énucléation, c'est-à-dire qu'après section des muscles et de la conjonctive on passe derrière le globe une paire de ciseaux courbes et l'on sectionne le nerf plus ou moins profondément et plus ou moins à l'aveugle dans l'intérieur de l'orbite. Le nerf est ainsi tiraillé dans sa longueur, son extrémité est écrasée par les ciseaux; ces traumatismes ont pour résultat de provoquer des lésions mécaniques qui peuvent en imposer pour des altérations pathologiques, comme on le verra plus loin. ”

“ Lorsqu'on procède à la culture sur sérum coagulé sans faire auparavant l'examen microscopique, on se heurte à de grosses difficultés résultant du fait, qu'à l'état normal comme à l'état pathologique, on rencontre sur la conjonctive des bacilles qui, en raison de leur petit nombre, ne gênent pas l'examen microscopique, alors que la culture les met toujours en évidence; or, ces bacilles forment sur sérum des colonies qui ont les plus grandes analogies avec celles du bacille diphtérique. L'inoculation au cobaye pourra seule permettre d'affirmer qu'il s'agit du bacille diphtérique virulent ”

“ En règle générale, la nuance métachromatique d'une couleur basique n'est autre que la nuance de sa base libre. Ainsi la base de la thionine est rouge; de même celle du violet de méthyle; si l'on ajoute en effet un alcali à du violet de méthyle, il se fait un précipité rouge constitué par la base libre.
Souvent d'ailleurs ces colorations métachromatiques sont peu stables ; ainsi la coloration rouge du mucus par la thionine disparaît en partie au cours des manipulations dans l'alcool. ”

“ L'hématoxyline est une matière colorante extraite du bois de campêche qui se présente sous forme cristalline. Il est établi maintenant que le principe colorant des teintures d'hématoxyline n'est autre que l'hématéine, produit d'oxydation par l'air de l'hématoxyline ; c'est ce qui explique le précepte donné par les anciens histologistes de laisser « mûrir » les solutions d'hématoxyline avant de les employer.
L'hématoxyline est un colorant des noyaux extrêmement énergique ; mais elle donne aussi des colorations de fond. Les noyaux sont colorés en bleu foncé, les tissus en bleu pâle. ”

“ INOCULATIONS. — La souris est le réactif de choix pour le pneumocoque; l'inoculation sous la peau d'une petite quantité de culture en bouillon cause la mort de l'animal en douze à trente heures.
A l'autopsie, on trouve une rate très grosse et des signes de septicémie généralisée ; le sang contient une grande quantité de germes encapsulés.
On peut aussi inoculer quelques gouttes de culture dans la cornée du lapin, qui entraînent en quelques jours le développement d'une kératite suppurative. ”

“ Ils sont également abondants dans le chiasma et les bandelettes. Dans les voies optiques de certains animaux (chat) , on les trouve d'une façon constante. Ils se présentent comme des corps arrondis ou ovales, vitreux, homogènes et de grosseur variable, entourés d'une capsule d'apparence homogène. Ils n'existent pas seulement à l'intérieur des faisceaux nerveux, mais aussi à leur périphérie, dans le manteau névroglique et dans les espaces qui existent entre les fibres nerveuses et les septas, c'est-à-dire dans des points où il n'y a plus aucune fibre nerveuse. ”

“ Dans l'immense majorité des cas, nous trouvons à l'autopsie des nerfs très atrophiés où il est difficile, non seulement de savoir quel est l'élément le premier atteint (fibres nerveuses ou tissu conjonctif) , mais même de localiser le point de départ de la lésion. Sur des coupes de nerfs optiques atrophiques provenant l'une d'un très vieux glaucome, l'autre d'un tabes très ancien, il est généralement difficile de faire le diagnostic de la maladie qui a causé l'atrophie optique ”

“ Ces méthodes réussissent très bien sur le système nerveux de l'homme. Il est facile d'ailleurs de graduer l'intensité de l'imprégnation; suivant qu'on élève ou qu'on abaisse la température de l'étuve, que l'on emploie des solutions plus ou moins fortes de nitrate d'argent, que l'on utilise pour la réduction l'hydroquinone ou l'acide pyrogallique, on obtient une imprégnation plus ou moins forte. La concentration des solutions de nitrate d'argent et la durée de l'imprégnation varient suivant l'espèce et l'âge de l'animal. ”

“ Les poisons du système nerveux peuvent porter leur action tantôt sur les cellules nerveuses, tantôt sur les fibres qui en émanent, et en ce qui concerne l'œil peuvent agir sur les cellules multipolaires de la rétine ou sur les fibres optiques. Il existe différents agents toxiques susceptibles de produire l'amblyopie (fougère mâle, quinine, thyroïdine) , et il sera possible, en employant concurremment sur un animal intoxiqué la méthode de Nissl et la méthode de Marchi, de savoir si cette amblyopie a son point de départ dans la rétine ou dans le nerf optique. ”

“ Les procédés de coloration sont nombreux, mais leur principe est toujours le même : colorer fortement la cellule ; puis décolorer, peu à peu; comme le colorant a une affinité maximum pour les corps de Nissl, il arrive un moment où ceux-ci tranchent fortement sur le reste du protoplasma; c'est ce moment qu'il faut choisir pour arrêter la décoloration. Malgré l'apparente simplicité de la méthode de Nissl, tous ceux qui ont cherché à l'appliquer à l'étude des cellules ganglionnaires de la rétine savent combien elle est délicate ”

“ Par exemple, chez les reptiles, le nerf optique prend sur une coupe la forme d'une fente dont les deux branches sont séparées par du tissu conjonctif. Chez le saumon, le nerf optique est constitué par un cordon de fibres nerveuses au centre duquel on trouve d-es vaisseaux sanguins. D'une façon générale, plus un animal est élevé en organisation et plus son nerf optique présente de tissu conjonctif de soutènement. On aura aussi avantage à ne pas choisir des animaux dont les nerfs optiques soient trop petits, car on est exposé à les traumatiser d'autant plus facilement. ”

“ Rien n'est assurément mieux fait pour montrer l'importance d'une bonne fixation que la comparaison d'une rétine fixée par le Müller ou le formol avec une autre fixée par le procédé de l'acide osmique en vapeurs. ”

“ Méthode de Weigert pour la coloration des libres myéliniques. — 1° Fixation et mordançage.
— a. Fixation et mordançage des pièces dans le bichromate de potasse (liquide de Müller) ; b. Compléter le durcissement par les alcools sans laver au préalable à l'eau; c. Inclusion en celloïdine et collage sur liège par la méthode ordinaire; d. Mordançage de la pièce dans une solution saturée d'acétate neutre de cuivre allongée d'un volume d'eau. On maintient le tout à l'étuve pendant un à deux jours. Après traitement par le cuivre, les tissus sont devenus verts, le manteau de celloïdine vert bleu. ”

“ Comme nous l'avons déjà vu, les recherches les plus récentes de Lawson, de Heinersdoff, de Axenfeld ont établi la grande fréquence du bacille du xérosis sur la conjonctive normale. Ce bacille existe aussi en quantités considérables dans tous les cas de conjonctivite avec augmentation notable de la sécrétion ; dans les conjonctivites aiguës à bacille de Weeks, on le rencontre d'une façon si constante que Weeks, pendant très longtemps, n'a pu obtenir des cultures pures de son bacille. ”

“ CULTURES. — Le gonocoque ne se développe bien que sur le sérum humain. Le milieu de culture le meilleur est la gélose additionnée de 1/3 de liquide d'ascite. Le gonocoque forme là de petites colonies transparentes, minces, mucoïdes.
INOCULATIONS. — Les animaux sont peu sensibles à l'injection sous-cutanée du pus gonococcique. L'inoculation dans le péritoine d'un cobaye de cultures sur bouillon amène au contraire rapidement la mort de l'animal. ”

“ Il semble donc que le pneumocoque ait une action élective sur la cornée on sait quedans un grand nombre de cas l'ulcère àhypopion est lié à une affection chronique des voies lacrymales ; une érosion sert de point d'entrée au pus chargé de pneumocoque qui baigne la surface de la cornée. Or il est remarquable que, tandis que dans le pus de la dacryocystite le pneumocoque est associé aux microbes les plus divers (streptocoque, staphylocoque, bacille de l'ozène) , au niveau de l'ulcération cornéenne il se retrouve presque toujours seul. ”

“ Par conséquent, si la méthode de Marchi peut et doit donner des indications précieuses sur l'existence de lésions récentes, il n'en est aucune dont les résultats méritent davantage d'être plus contrôlés.
Ces altérations sont dues, comme l'a montré Elschnig, à l'issue de la myéline hors des septas sous l'influence du traumatisme, et à son refoulement le long du réseau névroglique ; on s'explique ainsi l'aspect réticulé signalé plus haut; on comprend aussi comment la myéline peut, dans certains cas, traverser la cloison névroglique qui réunit deux faisceaux voisins ”

“ La boîte cranienne étant ouverte, le cerveau est enlevé par la méthode ordinaire, en sectionnant les deux nerfs optiques au bistouri à leur entrée dans le canal optique, et en ayant grand soin de ne pas exercer de traction sur eux; la base du crâne est donc à découvert ; avec un ciseau à froid bien coupant, on enlève de chaque côté toute la voûte orbitaire; puis avec une pince et des ciseaux fins on isole le nerf optique et le globe de la graisse orbitaire qui les entoure ; on sectionne la conjonctive tout autour de l'œil ”

“ La rétine est amincie à ce niveau par suite de la cessation de la couche des grains internes qui a fusionné en quelque sorte avec le corps des cellules visuelles.
La fovea centralis est cette partie de la rétine qui sert à la vision centrale. Son étude est bien faite pour démontrer la nécessité d'une bonne technique ; car il n'est pas une seule région de l'œil à propos de laquelle on ait accumulé plus de données contradictoires et de descriptions inexactes, et ces erreurs ont été presque toujours le résultat de procédés de fixation imparfaits. ”

“ En effet, dans les variétés les plus communément observées de conjonctivites (à bacilles de Weeks, de Morax, à gonocoques, à pneumocoques) les microbes s'observent le plus souvent en quantité très considérable et avec des
caractères bien tranchés dans la sécrétion étalée directement sur lame. Dans les conjonctivites pseudo-membraneuses causées par le Loffler, on n'aura, il est vrai, la certitude absolue qu'après avoir procédé à des cultures sur gélose qui permettront de le distinguer du bacille massué. ”

“ Rien ne s'altère plus vite et plus facilementque le tissu nerveux ; les fibres à myéline se fragmentent et deviennent variqueuses ; le protoplasma des cellules ganglionnaires subit des altérations dont une des plus manifestes est la difficulté de colorer les corps de Nissl ; la névroglie prend un aspect granuleux. On peut donc dire que tout
examen de tissu nerveux nécessite l'immersion immédiate de la pièce dans le fixateur. ”

“ L'étude des espaces lymphatiques interstitiels du nerf optique, pour lesquels on en était resté aux recherches déjà anciennes de Axel Key et Retzius, est revenue à l'ordre du jour, grâce aux perfectionnements apportés à la technique des injections lymphatiques. Quelle que soit l'idée qu'on se fasse du siège réel de ces espaces lymphatiques (névroglie ou tissu périadventitiel) , on peut se demander quelles sont leurs connexions. Par exemple, existe-t-il des communications entre les
deux nerfs optiques à travers le chiasma ”

“ Il importe donc de bien connaître les procédés spéciaux d'examen dont nous allons nous occuper, d'autant plus que dans bien des cas il est possible de les combiner avec les procédés généraux de coloration dont nous avons déjà parlé ; par exemple il est facile, lorsqu'on a traité des nerfs optiques par la méthode de Pal ou de Marchi, d'avoir recours sur la même coupe aux procédés de coloration par le Van Gieson, l'hématéine ou la safranine. ”

“ Cellules ganglionnaires. — Les cellules ganglionnaires de la rétine sont surtout abondantes sur les bords de la macula où elles forment plusieurs couches superposées ; leur nombre va en diminuant au fur et à mesure qu'on se rapproche de l'ora serrata.
Les cellules ganglionnaires sont visibles par toutes les méthodes de coloration. Mais le procédé de Dogicl au bleu de méthylène suivant la méthode indiquée précédemment donne de beaux résultats
pour l'examen des cellules comme pour celui des fibres optiques. ”

“ Ou bien, et c'est le cas le plus fréquent, on veut connaître le degré de virulence d'un germe ; ou bien on veut restituer aux microbes certains caractères morphologiques qui leur faisaient défaut dans les cultures.
On peut enfin chercher dans les inoculations à l'animal un procédé de renforcement ou d'atténuation des germes ; — nous laisserons de côté cette dernière indication.
Les animaux que l'on emploie couramment pour les inoculations sont la souris blanche, le cobaye et le lapin ; le chien beaucoup moins fréquemment. ”

“ Dans ces dernières années, de Lieto Vollaro a étudié au laboratoire de l'Hôtel-Dieu leur répartition dans le nerf optique et est arrivé à des résultats intéressants ; il a montré en particulier qu'au niveau de la lame criblée elles forment autour des vaisseaux centraux une véritable sangle destinée peut-être à résister à la pression intra-oculaire ; elles sont également très abondantes dans la gaine durale, ce qui explique son plissement lorsque le nerf optique devient atrophique. ”

“ S'il y a un gros excès de bleu, on peut activer la décoloration en employant de l'alcool à 90° ou de l'alcool à 600. Plus un alcool est faible et plus son action décolorante sur le bleu de toluidine est accusée. Mais on perd en précision ce que l'on gagne en rapidité, et les alcools faibles ont en outre l'inconvénient d'enleverune certaine quantité d'éosine. A moins qu'un excès concomitant d'éosine n'indique l'emploi de l'alcool à 60°, il vaut mieux s'en tenir à l'alcool absolu et prolonger son action le temps nécessaire. ”