Xylol

“ On emploie a térébenthine, la térébenthine chauffée, la créosote, un mélange de quatre parties de térébenthine avec une partie de créosote, un Mélange de térébenthine et d'essence de girofle, le naphte, le pétrole, essence de bergamote, l'essence de cèdre et d'autres essences, l'alcool absolu chaud, la benzine, le xylol, et même (pour des coupes contenant très peu de paraffine) , la solution de baume de Canada dans le xylol dont on se sert pour le montage. Personnellement, nous donnons au xylol la préférence sur tous ces dissolvants. ”

“ Lorsque la bordure de paraffine a complètement disparu, on verse de nouveau quelques gouttes de xylol pourchasser toute la paraffine. On fait, en somme, un lavage de la coupe au xylol en inclinant la lame convenablement. L'alcool absolu est ensuite répandu sur la lame de manière à la recouvrir uniformément d'abord, puis goutte à goutte, en inclinant et relevant alternativement chacune des extrémités de la lame. On fait agir de même, mais plus rapidement, les alcools à 90 et 651, et l'eau en dernier lieu. L'eau ne doit tomber sur les coupes que d'une faible hauteur. ”

“ Le montage des coupes est menacé par un grand nombre de maladresses que l'expérience seule permet d'éviter toutes. Le principal échec résulte d'une déshydratation insuffisante qui se traduit d'abord par des traînées blanchâtres dans le baume, puis par la séparation d'une infinité de gouttelettes microscopiques d'eau, qui obscurcissent les coupes.
Il y a remède à cela. On décolle la lamelle en l'inondant de xylol et en s'aidant d'une douce chaleur (40 à 45°) .
En quelques passages alternatifs dans l'alcool absolu et le xylol, on arrive à éliminer ce qui reste d'eau, et on remonte au baume. ”

“ On y obvie en partie et d'une façon parfois satisfaisante en recherchant la fixation solide que donne le sublimé en solution saturée dans l'eau et surtout en prenant des tranches très minces qui peuvent passer rapidement dans l'alcool absolu, le xylol et la paraffine, qui sont les milieux les plus à redouter. ”

“ PLECNICK (1902) , étudiant la surrénale de l'homme, a fait voir les différences existant entre la graisse surrénale et les graisses ordinaires périrénale, épicardiaque, etc. ; la première ne se colorant par l'osmium qu'après action de l'alcool, et se dissolvant rapidement dans le xylol, l'éther, le chloroforme ; les autres, au contraire, se colorent directement par l'acide osmique, et se dissolvent très lentement dans le xylol, l'éther et le chloroforme. ”

“ Éclaircissement. — La coupe reste quelques minutes dans le cristallisoir contenant du xylol phéniqué, où elle s'éclaircit et devientabsolument transparente. L'adjonction de l'acide phénique au xylol a l'avantage de compléter la déshydratation de la coupe. Celle-ci peut donc être montée.
Montage. — A l'aide d'une petite spatule, étendre la coupe sur une lame porte-objet bien propre. Très rapidement, aiind'éviter la condensation de l'eau à la surface de la lame, on dépose
sur la coupe une goutte de baume de Canada dissous au xylol. ”

“ On ne recouvre pas la préparation d'une lamelle parce que celle-ci pourrait retenir un peu d'humidité et la préparation serait mauvaise. Il arrive assez fréquemment, surtout quand le xylol n'a pas été bien enlevé, que les préparations paraissent abîmées parce que le baume a disparu, il suffit de remettre une goutte de baume et tout est réparé. On examine d'abord à un faible grossissement, mais quand le baume est sec on peut employer les grossissements plus forts. ”

“ Le xylol-colophane est préparé en agitant 30 grammes de colophane du commerce pulvérisée dans un flaçon à large ouverture avec une quantité double de xylol ; très vite se sépare une couche claire, transparente, de la couche sirupeuse inférieure. On décante cette couche supérieure qui seule doit servir. ”

“ Il suffit de mettre sur la lame une goutte de baume de Canada, et de recouvrir d'une lamelle. Il sera bon, avant de l'examiner à l'immersion, d'attendre quelques jours, afin que le baume soit desséché. Après chaque examen à l'immersion, on devra enlever l'huile, par le procédé que nous venons d'indiquer. On aura soin cependant de ne mettre qu'une petite quantité de xylol et d'éviter qu'il diffuse entre la lame et la lamelle, car il irait dissoudre le baume de Canada, et la préparation devrait être montée de nouveau. ”

“ Elles sèchent vite. Elles peuvent dissoudre sans se troubler les traces de paraffine qui peuvent rester dans les coupes. Elles ont l'avantage d'attaquer moins que les autres solutions les teintures aux couleurs d'aniline. Les solutions à la benzine ressemblent beaucoup aux solutions au xylol, mais nous paraissent leur être inférieures sous les rapports que nous avons indiqués. Les solutions au chloroforme sont excellentes, mais il nous semble qu'avec ce dissolvant il est moins facile d'obtenir une solution parfaitement limpide, et que les solutions sont décidément moins commodes à manier ”

“ On protège le tout par un couvercle de papier et on laisse séjourner à l'air ; plus la couche est mince et plus la concentration sera rapide.
(2) La préparation du baume au xylol est facile ; on lui donne la concentration désirable.
Il est préférable de faire soi-même cette préparation.
G. — Des colorations.
En présence de certaines modifications de tissus, un petit nombre de matières colorantes jouent le rôle de véritables réactifs. L'étude de leur action, encore trop peu avancée, constitue un problème important. ”

“ Les coupes, obtenues de fragments paraffinés, sont étalées sur une lame enduite d'une solution très légère de gomme; on laisse sécher quinze heures à l'abri de la poussière; on chauffe sur la platine chauffante jusqu'à ce que la paraffine devienne transparente; on enlève la paraffine par le xylol et le xylol par l'alcool ; on sèche avec un papier buvard très fin et on colore. ”

“ On agite pendant quelques instants et on abandonne le tout au repos. Le seigle ergoté surnage ; on l'enlève par décantation avec une petite quantité de liquide ; on ajoute de l'alcool au produit décanté : le seigle ergoté gagne le fond du vase dans lequel on opère. On le recueille et on l'étend sur un couvre-objet; on sèche et on examine, dans le xylol, à un grossissement de 800 diamètres.
En interceptant la source de lumière de manière à produire l'obscurité dans le microscope, les débris du seigle ergoté apparaissent avec une couleur jaune tirant sur le vert. ”

“ Mais différenciation plus longue.
20 Coloration à la safranine. — Coupes venant de paraffine. Xylol. Alcool absolu. Alcool à go 0. Coloration dans solution = Safranine, i gr. Alcool absolu, 100 gr. Eau, 200 gr. pendant un quart d’heure. Lavage dans l’alcool à gS 0, puis dans (alcool à 93°, 100 c c. HCL, II gouttes) , ce qui fixe la coloration et enlève l’excès de colorant. Puis alcool absolu, xylol, baume. Contrai-rement à Levi, ce procédé nous a donné de belles préparations des corps de Nissl sur des coupes fixées à l’acide osmique. ”

“ On se méfiera en particulier des aiguilles rouillées à l'intérieur, ou souillées d'une solution huileuse. Pour les premières il n'y a rien à faire que de les jeter, pour les autres on peut les nettoyer en faisant passer à leur intérieur, en aspirant avec une seringue, un peu de xylol. Pour s'assurer de la parfaite perméabilité de l'aiguille, on emploie un fil d'argent : il est préférable d'y faire passer un filet d'eau, au moyen de la seringue, et de voir si le jet est bien direct, de volume suffisant et régulier (1) . ”

“ Les préparations se conservent bien dans la glycérine, pourvu que ce le-ci ne soit pas acide, et aussi dans le baume. Il faut observer que on a employé l'essence de bergamote pour l'éclaircissement, il faut l'enlever soigneusement par de l'essence de térébenthine avant s e passer au baume ; et que l'emploi de l'essence de girofles n'est pas sans danger. Il vaut mieux (MAYER, in litt.) n'employer que le xylol, le benzol et le chloroforme, et monter dans le baume au xylol ou au c lloroto L dd' , d l'me. ”

“ On rince à l'eau, on déshydrate aussi rapidement que possible dans l'alcool, on éclaircit au xylol* et on monte au baume. On déshydrate aussi rapidement que posstble pour deux motifs : l'un, c'est que la méthode est censée être une teinture progressive ne demandant pas de différenciation apl'l'.::> coup ; l'autre, c'est que le vert de méthyle est très peu résistant ,1 l'alcool, et s'en irait à coup sûr à un lavage prolongé. ”

“ B. Par le procédé de Lœffler (laisser séjourner la coupe 10-15 minutes dans une solution fraîche et filtrée de bleu de Lœffler; décolorer en passant rapidement dans de l'eau distillée renfermant une ou deux gouttes d'acide acétique pour le contenu d'un verre de montre ; porter la coupe dans un cristallisoir contenant de l'eau distillée et la placer sur une lame; déshydrater par l'alcool absolu; sécher avec un papier buvard très fin; éclaircir avec l'essence de girofle ou de cèdre ou de bergamote, enlever l'excès d'essence par le xylol et monter au baume) ”

“ On charge la seringue de Pravaz avec le liquide osmio-picrique argentique �si produit ; et, l'injection interstitielle une fois faite, on achève le durcissement Pai 1 alcool avant de pratiquer des coupes, qu'on peut ensuite colorer au carmin : Une ou à l'éosine hématoxytique avec la plus grande facilité. On les monte enfin ans le baume du Canada au xylol, en ayant soin d'éclaircir les préparations succes8lvement par l'essence de girofle et celle de bergamote après les avoir fait passer
le plus souvent imprégné sur une plus ou moins grande étendue. ”

“ D'après Kekulé, il ne peut pas exister un homologue de la benzine isomère du toluène. La découverte d'une base isomère de la toluidine, la pseudotoluidine (voyez Toluidine) , découverte qui donne un certain degré de probabilité à l'existence d'un corps de ce genre, a provoqué des recherches dans cette direction. Mais jusqu'à présent, d'après Berthelot et Rosensthiel, la découverte d'un isomère du toluène n'est pas encore devenue possible.
Xylène. — Le xylène (xylol, hydrure de xylile, diméthylbenzine) a été découvert en 1850 par Cahours dans le goudron de bois ”

“ Hématoxyline de Weigert sans y ajouter de carbonate de lithine (demi-heure à vingt-quatre heures à froid, une à deuxminutes à chaud) . Décoloration par la méthode de Pal. Alcool dilué. Alcool absolu. Xylol phéniqué. Baume de Canada. Les cylindraxes sontainsi colorés en bleu. Par cesdivers procédés, nous avonsobtenu de bonnes préparations ; l’inclusion à la celloïdine nous semble indispensable, les coupes à la paraf-fine s’effritent trop facilement au cours des diverses manipu-r lations. ”

“ Enfin, Ce même mode de coloration et de montage (cette fois-ci exclusivement dans le baume au xylol) est le seul donnant de bons résultats quand on a fixé les fragments de preau par l'acide osmique. Dans ce dernier cas, on doit employer dé tout petits fragments - de 1 mm. 1/2 à 3 mm., - et achever le durcissement par l'alcool.
a méthode d'injection interstitielle de liquide osmiopicrique et de nitrate d'argent que j'ai décrite plus haut à propos de l'étude des muscles myo-épithéliaux des glandes sudorlpares (voy. t. II, p. 127) convient également bien pour l'étude de la peau. ”

“ Elles sont regues dans l'alcool absolu, puis eclaircies dans l'essence de girofles et montees dans le baume de Canada au xylol. Lorsque la reduction de l'argent est süffisante (ce que l'on doit surveiller attentivement) , les preparations sont conservees a l'abri de la lumiere.
Pour mettre en evidence le reseau des « cellules en paniers » dans l'acinus de la glande mammaire, LACROIX emploie la methode suivante: Sur un fragment de mamelle (Femme, Chatte) fixe et durci par un sejour de quelques semaines dans le liquide de Müller, on pratique, a main levee, des coupes un peu epaisses. ”

“ De cette dissolution le trinitrocrésylol se dépose en cristaux mélangés avec de l'acide oxalique, qui peut en être éliminé avec de l'eau, et en le faisant cristalliser dans l'alcool on peut l'obtenir à l'état pur. Le trinitrocrésylol forme des aiguilles jaunes, qui fondent à environ 1000; il se dissout dans 449 parties d'eau à 200 et dans 123 parties d'eau bouillante ; il est plus facilement soluble dans l'alcool, l'éther et la benzine. Les solutions de trinitrocrésylol ont une réaction acide et elles teignent en jaune la laine, le poil et la peau. ”

“ Si l'on n'obtient pas la réaction de la murexide, le calcul renferme de la cystine ou de la xanthine.
On en prend alors un nouveau fragment, on l'arrose avec de l'acide azotique, et on dessèche : le résidu devient jaunâtre, puis se colore en rouge orangé si on le touche avec une goutte de dissolution concentrée de potasse ou de soude (il n'y a pas eu de coloration avec l'ammoniaque) .
Le calcul est constitué par de la xanthine (voir p. 118) .
Si l'on n'obtient pas la réaction dont nous venons de
parler, le calcul ne peut plus être formé que par de la cystine. ”

“ Ce précipité se dissout à chaud; et, par un refroidissement rapide, il apparaît de nouveau, s'agrège et montre au microscope un enchevêtrement d'aiguilles cristallines.
L'acide azotique dissout à chaud la xanthine sans dégagement de gaz; en évaporant, il reste un résidu jaunâtre que la potasse colore en jaune rouge à froid et en rouge violet à chaud; l'ammoniaque ne le colore pas en pourpre.
Hoppe-Seyler recommande la réaction suivante : On délaye un peu de chlorure de chaux dans de la lessive de soude; et on place à la surface du mélange des fragments de xanthine. ”

“ Grâce à cette nouvelle combinaison, le Dr Vieth a évité ces inconvénients, car l'ichtalbine traverse l'estomac sans se décomposer et ce n'est que dans l'intestin qu'il y a mise en liberté de l'ichtyol.
MODE D'EMPLOI. DOSES. — Cachets médicamenteux contenant 0gr,50 d'ichtalbine à la dose de 2 a 6 par jour avant les repas.
Ichtyol. — DESC. — Ce sel a l'apparence du goudron ; il possède une réaction faiblement alcaline et la consistance de la vaseline. Il est soluble dans l'eau, ainsi que dans un mélange d'alcool et d'éther ; il est miscible en toutes proportions aux graisses et aux huiles. ”