Heinrich Frey

“ Mais comme l'œil humain agit à la manière d'une lentille, et que la vision ne peut être nette que quand les rayons lumineux venus d'un point de l'objet sont réfractés de telle sorte qu'ils se réunissent de nouveau sur la rétine, il ne devrait exister une image parfaitement nette qu'à une distance unique et bien déterminée. Cependant, l'observation de tous les jours nous
enseigne le contraire. ”

“ Des objets qui sont situés dans d'autres plans, supérieurs ou inférieurs, ne deviennent visibles que par des changements de foyer, et cet effet sera, avec des objectifs à grand angle d'ouverture et à fort grossissement, beaucoup plus sensible qu'avec des systèmes faibles et à angle d'ouverture médiocre. Il résulte de là qu'on peut, à la vérité, reconnaître immédiatement les contours, la longueur et la largeur d'un objet, mais qu'on n'apprécie jamais son épaisseur ni sa forme complète. ”

“ La connaissance de la partie mécanique du microscope, le maniement adroit des vis et du miroir, le mouvement à imprimer à l'objet en lui faisant traverser le champ visuel, mouvement qui doit être continu et sans aucune secousse : toutes ces choses sont plus faciles à acquérir que celles qui concernent la partie purement optique. On peut poser ici en principe qu'il est important de ne jamais recourir à une vis ou à un mécanisme quelconque, toutes
les fois que les mouvements qu'on désire obtenir peuvent être accomplis sûrement à l'aide de la main. ”

“ Il faut, tout d'abord, renoncer à la routine qui consiste à placer un tissu dans l'acide acétique, dans l'acide sulfurique, dans des solutions alcalines de potasse ou de soude, sans s'inquiéter de la force de ces solutions, du volume, du fragment qu'on y a plongé ; de la quantité des liquides qui y ont été ajoutés, et ainsi de suite. C'est un devoir pour tout observateur qui emploie l'un ou l'autre de ces moyens, ou qui en découvre un nouveau, de faire connaître sa manière d'opérer. ”

“ Comme l'eau est un milieu qui réfracte la lumière plus fortement que l'air, la réflexion des rayons lumineux sera considérablement amoindrie à la surface supérieure de la lamelle de verre, et, plus loin, à la surface inférieure de l'objectif, on peut dire qu'elle disparaît, en quelque sorte, entièrement. En conséquence, un plus grand nombre de rayons pénètrent dans le microscope, et le peu d'épaisseur de la couche d'eau produit le même effet qu'un agrandissement de l'angle d'ouverture. ”

“ Tandis que des lentilles aplanatiques sont nécessaires pour la loupe et le microscope simple, l'art de bien construire un microscope dioptrique composé consiste à faire disparaître les aberrations du système objectif par les aberrations opposées de l'oculaire, et à obtenir ainsi une image sans défaut, de la même manière qu'une des lentilles doubles d'un système aplanatique est corrigée par l'autre, comme nous l'avons déjà fait observer. ”

“ Nous avons vu, par le travail classique de Schwan, que le corps de l'homme est formé, dans toutes ses parties , de cellules et de leurs métamorphoses. Nous avons appris à considérer la cellule comme le dernier terme organique de la vie animale. De même que, lorsqu'il s'agit d'anatomie, il est impossible de comprendre la structure d'une partie du corps, sans la connaissance préalable de ces petits éléments microscopiques qui en sont la base, de même on ne parviendra pas à se rendre compte des effets physiologiques, si l'on n'a d'abord étudié les fonctions inhérentes à chaque cellule. ”

“ L'alcool est d'une valeur inestimable dans les recherches histologiques ; c'est le liquide le plus ordinairement employé pour conserver des parties animales. Il y a quelques années, lorsqu'on eut trouvé dans la glycérine le moyen incomparable de rendre transparentes les parties animales durcies et opaques, l'alcool fut placé au premier rang des réactifs, car l'acide chrômique ne saurait lui être préféré que dans certains cas. ”

“ Le microscope est un instrument délicat, dont le maniement demande à être étudié comme celui de tout autre instrument compliqué. On ne peut acquérir la faculté de s'en servir que par une longue pratique ; il faut de plus une grande patience pour arriver à une finesse, une exactitude de perception tout à fait indispensable. ”

“ La partie mécanique d'un microscope doit être considérée comme chose accessoire et d'une importance secondaire; l'appareil optique constitue la valeur réelle de l'instrument.
On choisira tel ou tel modèle, selon le prix, plus ou moins élevé, qu'on pourra y mettre. Les commençants ne doivent, au reste, jamais acheter de grands microscopes qui coûtent cher, parce que leur mécanisme est plus compliqué, leur maniement plus difficile, et qu'il faut acquérir une grande habitude avant de pouvoir se servir utilement des objectifs puissants, d'une construction parfaite. ”

“ Quand l'angle d'ouverture d'un objectif est petit, les rayons efficaces traversent la lame de verre avec de faibles obliquités, et les différences d'épaisseur de cette dernière n'influent que d'une façon peu appréciable sur la précision de l'image. ”

“ Les fabricants de microscopes, mus par un sentiment d'honneur, ont fait tous leurs efforts pour arriver à perfectionner ce genre de système, et on leur doit de nos jours d'excellents objectifs. La pénétration d'un objectif dépend de la grandeur de l'angle d'ouverture, et, par suite, de l'obliquité des rayons lumineux que les lentilles peuvent encore recevoir des différents points de la surface de l'objet. S'il s'agit de lignes très-rapprochées d'une surface transparente, qu'elles soient l'effet de stries ou de sillons, l'éclairage oblique, dans ce cas, acquiert une grande importance. ”

“ Les mouvements ordinaires sont produits par un système de rappel, ou bien on fait glisser à la main, et autant qu'il est nécessaire, le tube du microscope dans l'anneau qui l'entoure, ce qui suffit, et l'on peut dire que ce mécanisme, vu sa simplicité, est le plus pratique. Afin d'arriver à toute la précision possible dans la position de l'objectif, on a recours à une vis dite micrométrique, travaillée avec soin, vis qu'un observateur habile ne quitte pas tant que durent les expériences délicates et lorsque l'on emploie de puissants objectifs. ”

“ Mais comme les objectifs faibles fournissent seuls, en quelque sorte, un champ visuel étendu, tandis que ce même champ visuel est extraordinairement rétréci lorsqu'on se sert d'objectifs puissants, il en résulte que l'usage des faibles grossissements est d'une haute importance, tant parce qu'il permet d'embrasser l'ensemble de la préparation d'un même coup d'œil, que parce qu'il facilite les recherches de l'observateur. ”

“ La clarté de l'image, la force de pénétration ne sont pas les seuls avantages, d'une haute importance, que possèdent les objectifs à immersion. A ces qualités, il faut ajouter encore, même dans l'emploi des plus forts grossissements, la longueur du foyer, c'est-à-dire la grande distance existant entre l'objet et la lentille finale, distance qui permet d'employer des lamelles à couvrir d'une épaisseur ordinaire. ”

“ Les réflexions, même sous de très-grandes incidences, sont insensibles, si on les compare à celles qui se manifestent à l'entrée des rayons aériens dans le verre, parce que la quantité de lumière efficace et concourant à une belle formation de l'image, se trouve considérablement augmentée. Ceci est un avantage réel, équivalant à une amplification de l'angle d'ouverture qui, comme on le sait, améliore d'une façon très-notable la netteté de la vision microscopique. ”

“ Pendant que la substance intermédiaire du tissu cellulaire, résultant de l'enlacement de fibres d'une extrême finesse, arrive à se gonfler sous l'action de l'acide acétique, la puissance de réfraction de ces parties et celle du liquide qui les entoure deviennent égales, de telle sorte qu'on serait tenté de croire à la dissolution de ces fibrilles par le réactif, si d'autres moyens ne nous permettaient d'apercevoir ces mêmes tissus devenus invisibles , grâce à l'acide. ”

“ C'est au microscope, et surtout à l'art 4e savoir s'en servir, que la science est redevable d'une foule de découvertes précieuses. A l'aide de cet instrument, nous pouvons assister à la formation de l'embryon dès les premiers instants de la conception, et en suivre le travail jusqu'à son développement complet. L'histologie, qui joue aujourd'hui un rôle si important dans nos Facultés de médecine, nous apprend la structure intime, moléculaire des tissus et des liquides dans l'état de santé et dans l'état de maladie. ”

“ Chaque fois qu'on se sera servi du microscope, on fera bien (le commençant surtout) de l'examiner attentivement avant de le replacer sous le globe. S'il existe des taches sur les parties en cuivre, on les enlèvera avec un morceau de drap; un pinceau de poil fin servira à ôter la poussière des lentilles, des oculaires, etc. Ces soins peuvent bien occasionner une perte de temps, mais on ménage ainsi l'instrument tout en lui conservant sa valeur primitive, surtout si on ne néglige pas de constater, chaque fois, l'état des objectifs qu'on vient d'employer. ”

“ En effet, l'acide chrômique est excellent pour donner de la consistance au cerveau, à la moelle épinière, et à d'autres appareils nerveux de la périphérie. Son usage est fréquemment très-préférable à celui de l'esprit-de-vin, qui, dans ces circonstances, altère si profondément les tissus; tandis que ce même esprit-de-vin exerce une action aussi bonne et même meilleure que celle de l'acide
chrômique sur un autre ordre d'organes, tels que des tissus glanduleux, le canal intestinal, etc. ”

“ La puissance de définition d'un objectif est subordonnée à la correction parfaite des aberrations sphériques et chromatiques. Tous les objectifs de nos jours doivent posséder à un degré convenable une pareille correction, quel que soit l'usage auquel on les destine. Des objectifs avec un faible angle d'ouverture donnent une bonne définition plus facilement que ceux dont l'angle est plus grand, car une augmentation considérable de l'ouverture nuit à la puissance de définition. ”

“ Le microscope composé ne nous montre momentanément de l'objet que la surface optique qui se place au foyer, et tout ce qui existe en deçà ou au delà de ce foyer reste inaperçu ou comme noyé. En outre, en se conformant à la méthode habituellement adoptée pour faire des recherches, l'image est transparente, parce que la lumière vient d'en bas et non d'en haut, comme cela a lieu dans la vision ordinaire. ”

“ Si, en essayant un microscope, on se borne à des moyens pratiques, il faut, lorsqu'il s'agit d'apprécier le mérite d'un objectif, considérer à quelle fin l'opticien l'a construit; si c'est pour être employé avec la lumière directe ou bien avec la lumière réfléchie par le miroir; et, dans ce dernier cas, voir si l'éclairage doit être central ou oblique. Un objectif peut, par exemple, rendre de grands services avec l'éclairage oblique et devenir très-médiocre avec la lumière centrale ”

“ Malgré tous les soins donnés au microscope, il devient indispensable de nettoyer à fond, de temps en temps, sa partie optique, attendu qu'il se forme sur les lentilles et les oculaires une sorte de couche graisseuse qui assombrit considérablement l'image. Les instruments dont on ne s'est pas servi depuis plusieurs années portent, presque toujours, cette couche de matière grasse. On peut être sans inquiétude sur le résultat du nettoyage, car il est tout à fait inoffensif pour les verres, si l'on se sert d'un bon pinceau et d'une toile très-fine. ”

“ Si nous rapprochons insensiblement le fil de fer, mouvement dans lequel l'angle visuel augmente, il apparaît d'abord comme un fil très-fin, puis son diamètre devient de plus en plus prononcé. C'est pour cette raison que l'on examine toujours, et comme par instinct, les petits objets à une distance assez rapprochée. ”

“ Si, avec un objectif puissant, on examine
la circulation dans la membrane palmée du pied de la grenouille, ou dans la queue du têtard, on voit les corpuscules sanguins traverser rapidement les vaisseaux capillaires, tandis que ce courant à travers les capillaires est naturellement lent.
Il est un autre point encore qu'il ne faut pas perdre de vue en étudiant avec le microscope les phénomènes du mouvement. Lorsqu'une série de mouvements se succèdent avec une grande rapidité, nous reconnaissons le mouvement général, mais nous ne distinguons pas les mouvements isolés. ”

“ Les corps convexes agissent à la manière d'une lentille convergente; les corps concaves, au contraire, tendent à disperser les rayons. C'est pourquoi un corps convexe, en prenant pour point de départ une élévation moyenne du tube du microscope, paraîtra brillant si on allonge ce tube, tandis qu'il faut, au contraire, le baisser pour produire le même effet quand le corps est concave. ”

“ Rien n'est plus facile que la préparation de la solution normale d'acide sulfurique. On prend une quantité déterminée d'acide sulfurique affaibli qu'on place dans une burette. On en laisse ensuite s'écouler dans une solution normale de potasse jusqu'à ce que les quelques gouttes de teinture de laque qu'on y a ajoutées, changent leur couleur bleue en rouge. Ce mélange est ensuite additionné
d'eau, comme cela a été dit ci-dessus à l'occasion de la potasse, jusqu'à ce qu'un nombre égal de centimètres cubes de solution acide et de solution de potasse se neutralisent. ”

“ On se sert rarement de la lumière directe du soleil et de celle de la lampe dans les recherches habituelles, mais on est obligé d'y recourir, au contraire, dans un grand nombre d'observations faites avec la lumière polarisée, parce que cet éclairage est le plus intense de tous. ”

“ Les diaphragmes cylindriques sont des tubes portant à leur extrémité supérieure un disque circulaire percé d'une ouverture plus ou moins grande (fig. 18, b, c) . On les place dans l'ouverture de la platine, soit d'une manière immédiate, soit entourés d'un anneau. S'ils sont appelés à développer toute leur puissance, on doit pouvoir les élever ou les abaisser par un mécanisme quelconque.
Ces deux dispositions remplissent également le but proposé ; cependant le diaphragme cylindrique mérite la préférence, attendu qu'on obtient à l'aide de ce dernier des
nuances plus délicates dans l'éclairage. ”

“ Au contraire, un objectif ayant un très-grand angle d'ouverture pourra recevoir, tout en se bornant à l'éclairage central, un si grand nombre de rayons très-obliques qu'on obtiendra un résultat pareil à celui de l'éclairage oblique avec une combinaison plus faible. Mais si, en se servant d'un puissant objectif, à très-grand angle d'ouverture, on emploie en même temps l'éclairage oblique, toute incertitude cessera, car il possédera une puissance de résolution que n'atteindra jamais un faible objectif à petit angle d'ouverture. ”

“ L'état du ciel influe considérablement sur l'éclairage. Un ciel bleu, pur, donne une lumière belle, douce, qui ne fatigue pas l'œil, mais qui est insuffisante comme clarté avec l'emploi des objectifs très-puissants. On préférera un ciel uniformément couvert de nuages ternes et blancs. Les nuages très-blancs, à cause de leur rapprochement du soleil, doivent être évités, à cause de leur lumière trop éclatante. Le passage rapide de nuages blancs, flottant dans un ciel bleu, par une atmosphère très-agitée, est aussi désagréable que gênant. ”

“ Il est de toute nécessité de savoir modérer convenablement la lumière. On apporte une amélioration importante au système d'éclairage en interposant un verre bleu de cobalt, plus ou moins foncé, entre la lampe à gaz et l'objet. Ce verre se place sur le miroir ou, mieux encore, sur la platine. ”

“ On doit recommander au micrographe novice qui désire savoir ce qu'il est permis d'obtenir d'un instrument nouvellement construit, de recourir à ces test-objets, attendu que la vision nette d'un grand nombre d'entre eux n'est nullement facile et qu'on peut apprendre ainsi à mettre exactement au point et à se servir des divers éclairages. Quelques-uns de ces tests, les plus fins, offrent une difficulté si grande que le commençant cherchera, pendant des heures entières, à la résoudre sans y parvenir ; ils peuvent même donner beaucoup de peine aux observateurs qui ont l'habitude de s'en servir. ”

“ Ajoutez à la solution de carmin, lentement et peu à peu, 15 autres grammes de glycérine acidulée avec 8 à 10 gouttes d'acide chlorhydrique ou d'acide acétique : agitez toujours fortement le liquide. De cette manière, on obtient un précipité de carmin à molécules d'une extrême finesse et à l'aspect rouge clair, comme le sang artériel. On se sert, pour l'étendre, d'un mélange consistant en 15 grammes de glycérine, 6 grammes d'alcool ordinaire et 6 grammes d'eau. ”

“ Il signale, en général, comme très-avantageux, l'alcool, la glycérine, l'acide acétique, l'acide azotique, l'acide chlorhydrique, la potasse et la soude. Les deux derniers acides, ainsi que l'alcool, coagulent l'albumine, l'acide acétique, la potasse et la soude lui donnent de la transparence; l'alcool dissout la graisse. Si l'on combine quelques-unes de ces substances dans une solution, on obtient les résultats ci-dessus mentionnés. ”

“ Comme nous le montrerons plus loin, beaucoup de détails peuvent être rendus plus sombres et plus tranchants par la coloration, par l'emploi de liquides coagulés et sans transparence. Quelquefois même une partie, le noyau d'une cellule, par exemple, devient plus foncée, grâce à l'addition d'un liquide, tandis que la substance qui l'enveloppe perd, au contraire, de sa puissance de réfraction. Certains réactifs, comme l'acide acétique, produisent des effets avantageux. ”

“ L'observateur qui veut étudier la structure fine d'un organe à l'aide d'injections, se servira de colle. La température peu élevée à laquelle il est possible de pratiquer des injections avec une solution de colle, mais qui serait tout à fait insuffisante avec une solution résineuse, constitue déjà un avantage qu'on ne saurait trop apprécier. Ceux qui s'occupent d'histologie ont donc eu raison d'employer de préférence la solution de colle pour leurs injections. ”

“ Toutefois il y a dans l'usage d'oculaires plus forts une limite où l'image devient plus défectueuse. C'est en se servant des oculaires très-faibles qu'on obtient les images les plus belles et les plus élégantes. Néanmoins un grand nombre d'objectifs modernes supportent l'emploi d'oculaires bien plus puissants que ceux d'une époque antérieure, ce qui doit être considéré comme une preuve d'une extrême perfection d'optique. ”