Bacillus subtilis

“ Comme on a mesuré par ailleurs à quelle pression l'oxygène atteint la dose mortelle pour chaque microbe, l'un pourra vivre de — p à + 2 millim., un autre de — p' à + 8 millim., le Bacillus subtilis de + 2 à + 600 millim. ”

“ Un certain nombre de microbes saprophytes, cultivés artificiellement dans le lait, semblent agir comme ceux du groupe du Bacillus subtilis. Tels sont : le Bacterium termo, qu'on trouve dans la plupart des putréfactions et qui habite souvent la bouche; le Leptolhrix buccalis, parasite ordinaire de la bouche; le Spirillum rugula, qu'on trouve dans le tartre dentaire; le Bacillus fluorescens liquefaciens (Vignal) .
(4) EMMA STRUB, Centralb. f. Bakt., 1890, t. VII.
qu'il faut rapprocher du subtilis ”

“ Le bacillus aerophylus, trouvé par Liborius, est plus mince que le bacillus subtilis ; il a Oμ,5 de largeur et une longueur variable, jusqu'à former des filaments. Il présente souvent une capsule très mince. Sur l'agar-agar il donne des spores brillantes, ovales. Sur la gélatine, il pousse, au bout de 20 heures, en petites colonies jaunâtres qui liquéfient très vite la gélatine. Il se développe seulement à la surface. Les bactéries ne siègent qu'à la surface et la partie liquéfiée de la gélatine reste claire. ”

“ ACTION DU SUBLIMÉ SUR LES MICRO-ORGANISMES. — Le sublimé détruit très rapidement les microbes à l'état mycélien. Les spores sont également détruites quand le sublimé traverse la membrane d'enveloppe ; mais il est des spores qui résistent très longtemps, celles du bacillus anthracis et du bacillus subtilis, par exemple ”

“ Il est plus difficile de constater, dans du lait, la présence de cette Bactérie que celle du Bacille de la tuberculose, parce que la première ne possède pas de réactions de coloration aussi caractéristiques que la seconde. Il peut être difficile à simple vue de distinguer des Bactéries du charbon de plusieurs espèces inoffensives dont les germes abondent dans l'air, le Bacillus subtilis par exemple, et qui s'observent très souvent dans le lait exposé à l'air. La présence de globules sanguins pourra cependant être un indice, apprenant qu'il s'est passé quelque chose d'anormal dans la
mamelle. ”

“ La membrane d'enveloppe et les cloisons séparant les quatre loges, se sont
(1) L'analogie de nos figures avec celles de TOMASCHEK (601) , dans son étude de Bacillus muralis, est frappante. Toutefois nous n'avons pas observé, comme lui, la formation et la germination des spores à l'intérieur des capsules. Comparer aussi nos dessins avec ceux de REINKE et BERTHOLD (527) , qui figurent une disposition capsulaire absolument analogue chez Bacillus subtilis. Il est évident que l'on assiste la à un mode de formation zoogléique qui doit être très répandu dans le groupe des Bactériacées. ”

“ Dans les zoogloees, il existe des bâtonnets. Leurs spores sont semblables à celles du bacillus butyricus; l'oxygène est nécessaire à leur naissance. Quelquefois il se colore en bleu par l'iode comme l'amylobacter, mais avec une moindre intensité.
Le bacillus tremulus, plus fin que le bacillus subtilis, possède deux cils; les spores sont plus grosses que le bâtonnet lui-même et. elles sont excentriques. On le trouve sur les infusions des plantes où il se dispose en couche épaisse.
Bacilles des selles à l'état normal. — Le méconium ne contient pas de bactéries. ”

“ GOTTSTEIN (261) et BIENSTOCK (55) croient que cette résistance à la décoloration de ces différents Bacillus, tient à l'existence d'une enveloppe de graisse protectrice qui entoure les éléments bactériens. C'est aussi l'opinion de GRIGORJEW (265) qui, en cultivant dans des milieux gras certaines Bactériacées, autres que les précédentes ( tels que : Bacillus anthracis, B. subtilis, Clostridium butyricum, Bacterium termo, Slaphylococcus aureus et S. albus) , empêche leur décoloration par les acides.
du Spirillum s1 c) , jouent les uns sur les autres (Voir éd, 82c, etc. .) ”

“ Culture du Bacille de la décomposition, à l'état de végétation en bas, à l'état de sporulation en haut (Fol) .
CRYPTOGAMES CELLULAIRES. 205
de iy 5 sur 0y 5 de large, très souvent réunis deux à deux. Il s 'obtient en faisant macérer des feuilles, des pois ou haricots, etc., au contact de l'air. Le liquide se couvre d'une pellicule verdâtre, gélatineuse, c'est-à-dire d'une zooglée dans laquelle les bâtonnets immobiles se comportent à peu près comme ceux in Bacillus subtilis (p. 151) . Ils se scindent d'une façon très rapide ; mais on ne connaît pas jusqu'ici de spores à cette espèce. ”

“ Pour les détruire, il faut les exposer à une température de 100° et même de 120° dans un milieu humide; les spores du Bacille du foin résistent même à la température de l'eau bouillante pendant une demi-heure. C'est donc par le passage à l'état des spores, que la survivance des Bactéries est assurée ; ce fait est particulièrement remarquable pour les Bactéries anaérobies, comme le Bacillus Amylobacter, le Bacillus septicus, dont on rencontre partout les spores dans le sol et dans l'eau.
Le rôle des Bactéries dans la nature est immense. ”

“ Le bacille C fut retiré aseptiquement (lavage du méat au sublimé d’abord, puis à l’eau stérilisée) de burine d’un malade atteint de cystite purulente due à une infection mixte (bac. coli et bac. de Koch) .
Quelles sont les conditions modificatrices que nous avons employées ?
En premier lieu, la chaleur, sous la forme de chauf ¬ fage brusque, puis la dessiccation.
Nous nous sommes servi ensuite de bile et de sérum comme milieux de cultures, pensant que ces liquides auraient de l’influence sur le pouvoir de ferment du bacillus coli. ”

“ Bien plus, ces microbes ainsi modifiés ont été réensemencés en bouillon ordinaire, puis en bouillon lactosé, et l’amoindrissement de l’activité zymogène s’est maintenue.
Ce pouvoir de ferment peut-il être exagéré ? La nature nous montre le bacillus lactis aerogenes comme un bacillus coli doué du maximum d’énergie 1 ; il possède les propriétés du microbe côlien à un degré plus élevé. On peut arriver à lui faire subir des variations établissant des types de transition entre lui et le bacillus coli. ”

“ Lorsque donc on voudra rechercher dans une eau le vibrion septique, la méthode des inoculations, utilisable avec les vases, devra être rejetée et il faudra avoir recours aux cultures, en se souvenant toutefois que le Bacillus septicus est un anaérobie vrai et qu'il exige pour végéter un milieu absolument dépourvu de toutes traces d'oxygène. Les spores peuvent être exposées à l'air sans pour cela périr, mais elles sont incapables de germer dans ces conditions. ”

“ Cette action est encore plus manifeste sur le bacille A qui après 2 jours donne comme acidité = 1,5, et après 7 jours = 0,2; l’acidité du témoin étant de 1,7.
La dessiccation agit donc en réduisant le pouvoir de ferment du microbe, cela est incontestable. Le fait était à prévoir, car M.le professeur Arloing l’a constaté dès 1885 sur plusieurs virus pathogènes.
Cette condition peut faire plus; elle peut tuer notre bacille. Une culture de l’échantillon B âgée de 6 jours n’a pas résisté à une dessiccation de 10 jours. Une autre datant de 18 jours n’a pas résisté après 7 jours. ”

“ Technique générale. — Notre but a été d’étudier surtout le pouvoir de ferment du bacillus coli. Nous avons cherché à apprécier l’acidité développée, non par de simples changements de coloration ou la coagulation du lait comme on l’a fait jusqu’ici, mais par des dosages au moyen d’une liqueur alcaline titrée.
Les cultures étaient faites soit en bouillon de boeuf neutralisé et peptoné à 20/1000, soit sur gélatine inclinée.
Nos ballons contenant du bouillon lactosè étaient tous semblables, de manière que l’évaporation se produisant à l’étuve (37°) , où ils étaient placés, fut égale pour tous. ”

“ Nous avons observé aussi ce retard avec l’échantillon G, chauffé dans les mêmes conditions.
Le bacillus coliïï, cultivé en bile de chien, est devenu moins résistant. Une jeune culture n’a pas supporté 60 degrés pendant 50 secondes, contrairement à la culture en bouillon signalée plus haut ”

“ Conservation des bactéries vivantes. — Pour conserver les cultures obtenues, il suffit souvent de fermer les éprouvettes avec du parchemin ou des bouchons de caoutchouc. On peut aussi garder à l'état pur des parcelles de culture placées entre des lames et lamelles stérilisées en bordant la lamelle avec de la cire. La plupart des bactéries peuvent être conservées longtemps dans leur culture sur pomme de terre, même desséchées, comme par exemple le bacillus prodigiosus ou les bactéries pourvues de spores. ”

“ La culture ressemble à
celles des bacilles de la fièvre typhoïde ; les bacilles sont seulement à peu près deux fois plus grands (fig. 85) .
Le bacillus fluorescens putridus se trouve dans les substances en putréfaction qu'il colore en vert. Il a l'odeur de triméthylamine. Les bacilles très mobiles, à extrémités arrondies, ne liquéfient pas la gélatine. Ils forment sur les plaques de gélatine des colonies foncées et à la surface des colonies à contour ondulé. Au centre des cultures, il y a une sorte de noyau entouré d'une masse jaune. ”

“ Il a fait
connaître, chez les oiseaux, une Bactéridie intestinale qui est un Bacille épais et rectiligne, long de 10-40 y, une B. des infusions, longue de 10-20y; une B. glaireuse, à filements droits et courbés, longs de 10 y; une B. des vins tournés, ténue, flexible, indistinctement articulée et de longueur très variable. Ce sont tout autant de Bacillus et dont plusieurs passent même à la forme de Leptothrix. Le B. ruber de M. Cohn, qui se développe sur le riz, est enveloppé d'une substance muqueuse rouge ; il est très mobile et formé de longs bâtonnets isolés ou réunis par 2-4, etc., etc. ”

“ Chez B. osteophilum, comme nous venons de le voir, elle n'existe, bien nettement accusée, que lorsque la gaîne, s'amincissant de plus en plus, finit par se réduire à l'état de traînées entre les éléments. Chez Bacillus amylobacter et chez Closlridium polymyxa, cette forme en fuseau se lie à un phénomène plutôt physiologique que morphologique, puisque les éléments bactériens de ces deux espèces ne deviennent des Clostridium, quau moment de produire des spores. L'élément, jusque-là cylindrique, se renfle en son milieu, où parait ensuite la spore. ”

“ La résistance à la chaleur n’est pas non plus un caractère constant, et M. Rodet, étudiant divers échantillons de bacillus coli, a remarqué des différences assez étendues suivant les spécimens considérés. La plupart peuvent se cultiver à des températures relativement élevées, jusqu’à 46 degrés. Mais cette température, limite supérieure, n’est pas absolument fixe, et certains bac. coli ne peuvent vivre à 44 degrés, se rapprochant en cela du type Eberth qui, on le sait, est moins résistant.
Les variations naturelles existent également quant au mode de culture sur gélatine. ”

“ Dans ces trois derniers cas, les tubes d’Esmarch qui correspondaient aux bouillons n’ont pas donné de colonies. On peut en induire que peu d’individus sont restés vivants. Mais ne peut-on pas penser, d’autre part, que les éléments qui ont survécu sont ceux qui ont, par le chauffage, acquis une vitalité plus grande et par là même un pouvoir de ferment plus accentué, se rapprochant ainsi du bacil - lus lactis aerogenes ?
Dans une dernière classe de faits, les plus nombreux,
nous avons vu la chaleur diminuer chez le bacillus coli la 'propriété de faire fermenter la lactose. ”

“ D'autres Bactériacées, rangées dans le genre Bacillus , présentent également des formes d'éléments spiralées, comme Bacillus carolarum A. KOCH (331) , B. brassicoe POMMER (506) ,B. coeruleus SMITH (576) . Bacillus pyocyaneus FLUGGE, ainsi que MM. GUIGNARD et CHARRIN (266) l'ont démontré d'une façon péremptoire, passe de la forme rectiligne en Bacillus plus ou moins longs, à la forme en bâtonnets d'abord simplement incurvés (Vibrio) , puis nettement spiralés (Spirillum) présentant jusqu'à huit et dix tours de spire. ”

“ On doit dans tous les cas agir comme si on était d'a- vance sûr que la culture est impure et ensemencer sur plaques quelques gouttes du bouillon plus ou moins dilué.
On opère ainsi une dissociation qui met sur la voie de la vérité.
Le procédé de M. Rodet a presque toujours entre ses mains et entre les miennes donné des résultats satisfaisants, sous cette réserve que le Bacillus coli communis dont nous ne connaissions pas encore à cette époque les très étroites affinités avec le bacille d'Eberth, résisle lui aussi très bien à la température de 45°,5. ”

“ Ce dernier est en outre identique, d'après Voges, à Bacillus lividus Flügge et Proskauer (Z. H; II, 463) ; mais celui-ci se distingue de violaceum par son maigre développement sur la pomme de terre et la rapidité de la liquéfaction. Mais tous ces signes ne peuvent, ainsi qu'il ressort de notre description, suffire à ériger ces microbes en espèces.
Tout à côté se place aussi Bacillus membranaceus amethystinus trouvé par Jolles dans l'eau de source. Il produit sur gélatine une grande pellicule violette ; il est immobile.
Germano a cultivé un microbe poussant sous la forme de membrane ”

“ Tout d'abord, on a reconnu que l'élément en Bacterium,, considéré par la plupart des Bactériologues comme la forme bactérienne rectiligne la plus courte, peut en s'allon géant, présenter des différences de longueur assez grandes, et passer à la forme Bacillus. La plupart des auteurs n'admettent même plus maintenant qu'un seul genre de formes rectilignes, soit le genre Bacterium, soit plus volontiers le genre Bacillus : c'est une première concession imposée par l'observation la plus vulgaire. ”