Eugène Gabriel Villejean

“ Pour séparer l'urobiline de pigments biliaires qui peuvent l'accompagner en cas d'ictère, on peut opérer comme il suit : Les pigments sont précipités en bloc par le sulfate d'ammoniaque après légère acidulation par l'acide sulfurique, et on les recueille sur un filtre; on reprend ce léger résidu par l'eau faiblement ammoniacale qui contiendra surtout l'urobiline que l'on caractérisera par le chlorure de zinc et le spectroscope. ”

“ L'acétate neutre de plomb et le sous-acétate ne précipitent pas les solutions d'oxyhémoglobine; le nitrate d'argent ne les trouble qu'au bout d'un certain temps ; le cyanure mercurique ne les altère pas. La plupart des autres sels métalliques, surtout ceux qui sont dissociables par l'eau, les précipitent en décomposant la matière colorante.
Les acides minéraux libres et les sels acides décomposent immédiatement l'oxyhémoglobine en formant dans sa solution un précipité de matière albuminoïde coloré en brun par de l'hématine ”

“ Si l'on se reporte au rôle qui est dévolu à l'hémoglobine chez les animaux supérieurs, aux relations que les recherches chimiques ont permis de découvrir entre cette matière colorante du sang et le plus grand nombre des pigments de l'économie, il semblera superflu d'Insister plus longuement sur l'intérêt que présente l'étude chimique de ces matières. ”

“ L'oxyhémoglobine se dissout sans décomposition immédiate dans les alcalis ou les carbonates alcalins très étendus ; ces solutés paraissent moins altérables que les solutions aqueuses, cependant au bout de quelques jours, même à la température de 0°, la décomposition se produit.
Le carbonate de potasse en poudre ajouté à une solution d'oxyhémoglobine précipite sans altération la matière colorante pourvu qu'on opère à basse température. Il en est de même de l'alcool ; le précipité brunit bientôt et perd sa solubilité. ”

“ Elle est insoluble dans l'eau l'alcool, l'éther, les alcalis et presque tous les acides ; cependant la potasse concentrée prend à son contact une teinte brunâtre ; il en est de même de l'acide sulfurique à chaud; l'acide azotique donne une solution acajou en dégageant des vapeurs rutilantes ; elle est décolorée par le chlore. ”

“ Entièrement insoluble dans l'eau, l'alcool, l'éther et le chloroforme, elle se dissout bien dans l'alcool chargé d'acides ou d'alcalis, comme Le Canu l'a fait remarquer le premier; elle est également soluble dans les solutions aqueuses étendues d'alcalis ou d'ammoniaque. Les solutions alcalines sont rouges en couches épaisses, vertes en couches minces, lorsqu'on les regarde par transparence ; les sels de chaux et de baryte les précipitent en brun; elles sont rapidement décolorées par le chlore et le permanganate de potasse. ”

“ L'eau chaude, les acides minéraux ou organiques augmentent le déficit d'oxygène libre, qui atteint son maximum lorsque la quantité d'acide devient suffisante pour dédoubler entièrement l'oxyhémoglobine en albuminoïde et en hématine ”

“ Thudicum (1) a donné ce nom à une matière jaune qu'on obtient de la façon suivante : on ajoute à l'urine fraîche de l'acétate de baryte, puis de l'eau de baryte jusqu'à réaction alcaline; on filtre au bout de vingt-quatre heures et on additionne la liqueur claire d'acétate de plomb ammoniacal tant qu'il se fait un.précipité. Celui-ci est lavé puis traité par l'acide sulfurique étendu dont l'excès est ensuite neutralisé par du carbonate de baryte; on filtre de nouveau et l'on dirige dans la liqueur un courant d'acide carbonique qui met l'urochrôme en liberté. ”

“ Il agite le jaune d'œuf frais avec de l'éther qui dissout le pigment et les matières grasses. L'évaporation les laisse sous forme d'une matière jaune qu'il saponifie avec de la lessive de soude ; le savon est traité par l'éther qui abandonne d'abord des cristaux de cholestérine, puis un précipité rouge foncé amorphe. ”

“ On traite par l'eau les pièces de pansement, et la solution colorée est agitée avec du chloroforme ; celui-ci entraine en même temps des matières grasses : on le sépare à l'aide d'un entonnoir à robinet et après l'avoir filtré on l'agite avec de l'eau contenant un peu d'acide chlorhydrique ou d'acide sulfurique ; la pyocyanine abandonne le chloroforme et passe dans l'eau acidulée à l'état de combinaison rouge, le chloroforme retient une matière colorante jaune (pyoxanthose) et les matières grasses. ”

“ L'hématine donne peu d'hématoporphyrine; une partie est transformée en une matière noire insoluble dans les alcalis que Hoppe-Seyler a appelé hématoline. Aussi est-il plus avantageux d'employer les cristaux purs et secs d'hémine qui, triturés avec de l'acide sulfurique concentré, laissent dégager de l'acide chlorhydrique et se dissolvent entièrement. ”

“ MATIÈRES COLORANTES DE L'URINE. — L'urine de l'homme et des mammifères possède normalement une couleur qui varie du jaune clair au jaune foncé et au brun pâle, mais qui n'est peut-être pas due à un principe colorant unique. ”

“ La solution d'hémocyanine se décolore par le vide, se coagule par la chaleur, par l'alcool, l'éther, le tannin, les acides minéraux et par la plupart des sels des métaux pesants, bichlorure de mercure, sulfate de cuivre, azotate d'argent. ”

“ La poudre est bouillie avec de l'alcool fort qui enlève différentes matières et la cholestérine. Le résidu est mis à digérer avec de l'acide chlorhydrique froid, repris de nouveau par l'alcool et traité par l'éther. La poudre ainsi lavée est traitée par le chloroforme bouillant et on distille la liqueur rouge obtenue.
Le résidu est jeté sur un filtre et lavé au chloroforme froid tant qu'il possède une couleur verte ; les liqueurs de lavage sont concentrées dans un appareil distillatoire et étendues finalement d'alcool qui donne un précipité très divisé de bilirubine. ”

“ On sait que l'acide sulfurique concentré enlève le fer à l'hématine et que, d'après Hoppe-Seyler, la réaction s'effectue sans dégagement gazeux, mais avec absorption d'oxygène en donnant naissance à de l'hématoporphyrine. ”

“ On sait que le stroma globulaire renferme, outre divers albuminoïdes et de la cholestérine, une notable proportion de lécithinequi joue le rôle complexe d'éther, d'acide monobasique et d'alcali quaternaire ; Hoppe-Seyler suppose que c'est cette dernière substance qui fixe l'oxyhémoglobine ; elle se gonfle dans l'eau, se dissout dans l'alcool, l'éther, le chloroforme toutes substances qui provoquent la mise en liberté et la cristallisation de l'oxyhémoglobine. ”

“ L'acide carminique possède un spectre d'absorption qui varie avec la nature du dissolvant. Girard et Pabst ont donné à ce sujet les indications suivantes : Les solutions de carminate de potasse ou d'ammoniaque présentent une bande obscure s'étendant du jaune au vert (D à E) ; la solution acide et alcoolique donne une bande comprise entre D-E et G de Frauenhofer avec un maximum en E.
La solution acide aqueuse offre une bande s'étendant de C-D à G avec deux maxima l'un entre D-E, l'autre entre
E-F ”

“ Cependant, en voyant des corps colorés tels que l'hémoeyanine, la zoonérythrine, jouer chez les animaux inférieurs le même rôle que l'hémoglobine, on est autorisé à se demander si les autres pigments n'ont pas également leur raison d'être, s'ils ne remplissent pas une fonction qui nous a échappé jusqu'à
ce jour, ou s'ils ne sont pas tout simplement l'indice, le reflet d'actes physiologiques dont la nature nous est inconnue. ”

“ L'hémochromogène ne peut être examiné qu'en vase clos ; on ne connait que les réactions de ses solutions et leurs caractères spectraux.
Pour obtenir une solution de ce corps, Hoppe-Seyler introduit dans un appareil à deux boules, d'un côté une solution aqueuse d'hémoglobine, de l'autre de l'alcool acidulé ; on fait passer dans l'appareil un courant d'hydrogène pour chasser tout l'air qu'il renferme, puis on ferme à la lampe et on mélange les liquides. La liqueur prend une teinte pourpre et il se forme un précipité
rouge qui se décolore lorsqu'on chauffe ”

“ Ils sont insolubles dans l'eau, dans la solution aqueuse d'ammoniaque, dans les alcalis et les acides étendus.
L'alcool les dissout très facilement (Tudichum) ; Piccolo et Lieben, Holm les considèrent au contraire comme insolubles dans ce dissolvant, ce qui tient, peut-être, a la présence d'une certaine quantité de graisse dans les cristaux qu'ils avaient préparés.
Le sulfure de carbone dissout facilement la lutéine en produisant une solution d'un beau rouge, qui devient rouge orangé lorsqu'elle est très étendue. ”

“ Les yeux de bœuf sont soigneusement débarrassés du sang qui les imprègne par immersion dans l'eau; au moyen d'un pinceau en blaireau fin, on détache la mélanine de la membrane choroïdienne en opérant sous l'eau, puis on filtre la liqueur au travers d'un linge pour séparer les résidus membraneux; la liqueur est évaporée et le résidu est épuisé par l'alcool et l'éther bouillants qui laissent une masse noire, très friable, plus lourde que l'eau, inodore et infusible. ”

“ Tant qu'elle est rouge, elle absorbe la lumière du spectre depuis le jaune verdâtre jusqu'au violet, laissant seulement passer le jaune, l'orangé et le rouge.
L'alcool détruit le pourpre rétinien presque instantanément ; l'éther et le chloroforme le font passer d'abord au jaune-citron, puis le pâlissent pour l'éteindre en quelques minutes. La solution de chlorure de sodium a 10 0/0, la glycérine et le sérum sanguin, le conservent pendant 48 heures ; il en est de même des sels biliaires et du benzoate de soude, de l'alun, etc. ”

“ Hoppe-Seyler conseille d'opérer comme il suit pour se procurer une grande quantité d'hématine pure.
Le sang défibriné est coagulé par l'addition de trois à quatre volumes d'alcool; le coagulum est recueilli, pressé, broyé et tamisé. On le met alors digérer au bainmarie avec de l'alcool faiblement acidulé par l'acide sur urique, onfiltre et l'on traite une seconde fois le résidu
par l'alcool acidulé. ”

“ A la température ordinaire, l'oxyhémoglobine subit déjà un commencement d'altération et prend une teinte de plus en plus foncée ; plus la solution est concentrée, moins elle est stable ; lorsqu'elle est très étendue on peut la porter à 70° sans qu'elle se coagule ; mais au bout de quelques minutes le liquide se trouble et fournit un coagulum d'albumine coloré en brun par de l'hérnabine. ”

“ Elle est aussi très soluble dans le chloroforme ; la liqueur est jaune d'or et ne change pas par agitation avec de l'ammoniaque.
La lutéine est notablement soluble dans l'eau de savon et se précipite par l'addition d'un acide.
L'acide acétique concentré la dissout en jaune, à chaud, mais non l'acide étendu ; l'ébullition avec l'acide acétique cristallisable la détruit (Piccolo et Lieben) . L'acide sulfurique la colore en bleu et la dissout. L'acide nitrique nitreux la colore passagèrement en bleu clair, puis en jaune
pâle ”

“ On a cru d'abord avec Schunck que cette substance était identique avec l'indicane (uroxanthine de Heller) , glucoside répandu dans les plantes qui fournissent l'indigo ; ce corps, en se dédoublant sous l'influence des acides minéraux, engendre un sucre particulier, l'indiglucine, de l'indigo bleu (indigotine) et de l'indigo rouge (urrhodine) . ”

“ On finit le lavage sur un filtre, d'abord avec de l'eau, puis avec de l'alcool et enfin avec de l'éther; les cristaux appartiennent au système triclinique.
L'hématine préparée par les méthodes de Hoppe-Seyler ou de Cazeneuve constitue une poudre noire avec reflets métalliques. Frottée sur de la porcelaine, elle laisse une trace brune ; elle peut être chauffée à 180° sans décomposition; à une température plus élevée, elle dégage de l'acide cyanhydrique, se charbonne et brûle à l'air sans se boursoufler en laissant 12,60 0/0 d'oxyde ferrique pur. ”

“ Ces cristaux sont extrêmement sensibles à la chaleur et à l'oxygène ; ils se liquéfient rapidement à la température ordinaire et perdent à l'air leur coloration violette en donnant au spectroscope les deux raies de l'oxyhémoglobine. Ils ne sont pas altérés par l'alcool absolu, du moins en ce qui concerne leur forme.
Si, dans leur préparation, on a fait intervenir l'alcool de trop bonne heure, c'est-à-dire avant l'absorption com-
plète de l'oxygène par les bactéries, on est sûr de trouver des cristaux d'hémoglobine artérielle à côté de ceux de l'hémoglobine veineuse. ”

“ Le sang est coagulé par la chaleur après avoir été additionné de son poids de sulfate^de soude en cristaux; dès que la coagulation est achevée, on jette le magma sur une toile, on l'exprime modérément et on le triture dans un mortier avec de l'alcool contenant une petite quantité d'acide oxalique. L'épuisement se fait rapidement et la teinture alcoolique tient en dissolution l'hématineque l'on précipite par l'ammoniaque. ”

“ Il en est de même des alcalis concentrés qui opèrent aussi la décomposition en albumine et hématine, seulement ces deux matières restent en dissolution en donnant une liqueur d'un rouge brun foncé. Avec l'ammoniaque, on obtient un liquide rouge groseille qui ne s'altère que lentement.
On admet sans preuve directe et par la comparaison des formules que nous citerons dans le chapitre suivant, que 100 grammes d'oxyhémoglobine fournissent 4 gr. 70 d'hématine, et environ 95 grammes de globuline. D'après Hoppe-Seyler, ce dédoublement serait toujours précédé de la formation de méthémoglobine. ”

“ Cette bromomélanine se présentait à l'état sec sous l'aspect d'une masse brillante, noire, que la trituration transformait en poudre brune; l'eau de brome ne donne rien de semblable avec l'urobiline, on obtient seulement un précipité jaune, qui ne noircit pas. Zeller croit que les matières colorantes de l'urine proviennent de deux sources différentes : de la matièrecolorante du sang, et des substances aromatiques développées dans l'intestin par la digestion des albuminoïdes. ”