Trypsine

“ Dans toutes ces déterminations, il est un point très important sur lequel les auteurs n'insistent souvent pas assez, ce qui rend leurs résultats peu comparables : c'est la force de la trypsine qu'ils emploient. ACHALME recommande une macération de 5 à 7 % de pancréatine faite dans une solution physiologique pendant 18 à 24 heures à 35°, en présence de quelques gouttes d'essence de moutarde. Le liquide est filtré et réparti dans des pipettes stérilisées et scellées, qu'on conserve dans l'obscurité. Le titrage de cette trypsine se fait alors d'après son action sur du sérum de cobayeadulte. ”

“ La trypsine a la propriété de digérer ou de dédoubler les substances albuminoïdes. Mais le sérum sanguin s'oppose à l'activité digestive de la trypsine. Ce pouvoir antitryptique du sérum est d'intensité variable, et ses variations peuvent servir au diagnostic. On a constaté, en effet, que, chez les cancéreux en particulier, le pouvoir antitryptique est augmenté. ”

“ La trypsine est très répandue, dans le monde animal aussi bien que végétal. En dehors du pancréas, on trouve de la trypsine ou des substances actives très analogues, dans la rate, les leucocytes, l'urine, etc. Sa présence a été constatée aussi chez les invertébrés, les crustacés, les insectes, etc. Enfin, des enzymes semblables se retrouvent dans la levure de bière, dans les moisissures et chez les microbes. ”

“ III. Trypsine ou diastase protéolytique. — Macérations pancréatiques. Solutions de trypsine. Transformations tryptiques des substances albuminoïdes. Protéoses et peptone. Parallèle de la digestion peptique et de la digestion tryplique. Acides amidés et bases hexoniques. Amphopeptone, héniipeplone, antipeptone. Dosage de la trypsine. Trypsinogène.
Le suc pancréatique peut être obtenu par fistule du canal de Wirsung ; lorsque l'opération est faite extemporanément, sur le chien, on n'obtient souvent que quelques gouttes, tout au plus quelques centimètres cubes de suc ”

“ Plus la trypsine contient de substances étrangères, moins elle est
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affaiblie par l'action thermique. Ce sont des substances colloïdales, telles que les albumoses et les peptones, qui augmentent sa résistance. Une solution de peptone à 5 %, additionnée de trypsine, peut être portée à l'ébullition sans perdre totalement le pouvoir de digérer la fibrine. On constate qu'une résistance analogue est conférée par l'agar-agar et la gélatine. ”

“ La trypsine active disloque complètement les corps protéiques en produits abiurétiques et, dès le début, elle libère notamment la tyrosine et le tryptophane, ce qui est la caractéristique chimique de son action ; elle attaque même la kératine et les nucléines qui échappent à l'influence du suc gastrique ”

“ Le suc pancréatique renferme chez l'adulte trois ferments : un ferment qui, en milieu alcalin, transforme les albuminoïdes en peptones : trypsine ; un second qui saccharifie l'amidon : ptyaline ou amylapsine ; un troisième qui émulsionne les graisses : stéapsine. La trypsine existe dès la naissance, et même avant la naissance (Albertoni, Langendorff, Hammarsten) ; mais, dans les premières semaines, sa sécrétion est peu abondante. La stéapsine existe aussi dès le début de la vie. ”

“ On sait que la diastase pancréatique pousse la digestion beaucoup plus loin que l'enzyme stomacal et qu'elle fournit, parmi les corps d'hydrolyse, une certaine quantité d'acides aminés. Or, ceux-ci, grâce à la méthode de SOERENSEN, sont susceptibles d'une évaluation assez exacte. On a donc, dans la détermination des acides aminés formés, un moyen commode et précis pour mesurer l'activité d'une trypsine. A part cette exception heureuse, presque toutes les méthodes que nous avons exposées pour la pepsine s'appliquent au dosage de la trypsine. ”

“ Ajoutons, que l'entérokinase n'a d'influence que sur le ferment protéolytique et n'agit ni sur la lipase, ni sur l'amylopsine du pancréas. Au surplus, l'activation de la trypsine peut être réalisée par d'autres substances, et surtout par des sels de calcium, mais le suc intestinal est activant même en l'absence complète de sels calciques. ”

“ Là trypsine est également absorbée par différentes substances, notamment par l'édestine, comme l'est la pepsine. D'après H. L. HOLZBERG, la safranine se combine avec la trypsine pour donner un précipité rouge insoluble. On peut même se servir de cette propriété pour débarraser un liquide de la trypsine qu'il contient ; pour cela, on lui ajoute environ un volume d'une solution de safranine de GRUBLER à 0.8 %; le précipité, qui se forme, se montre très actif, tandis que le liquide filtré a perdu toute action digestive. ”

“ La trypsine agit sur les substances albumineuses naturelles pour les transformer en protéoses et sur les protéoses pour les transformer en produits abiurétiques. L'érepsine n'agit pas sur les substances albumineuses naturelles : elle ne transforme ni la fibrine, ni la myosine, ni l'ovalbumine, ni la sérumalbumine, ni la sérumglobuline ”

“ La trypsine, au bout du même temps, accuse 36% d'azote précipitable et la pepsine 55. De plus, on constate, pour la pepsine, une marche très peu régulière : il se forme au cours de la protéolyse des substances qui, de non précipitables, redeviennent ensuite précipitables. Avec la trypsine, ce flottement est moins apparent, et avec l'érepsine, la digestion est tout à fait régulière. Mais ce qui est vraiment intéressant, c'est la teneur très faible en azote précipitable du liquide obtenu avec l'érepsine. ”

“ Son pH est en moyenne de 7,5-8; c'est donc une sécrétion alcaline.
ENZYMES PRÉSENTS :
trypsine ; chymotrypsine ; peptidases ; amylase ; lipase ;
cholestérolestérase ; ribonucléase ; désoxyribonucléase : collagénase.
Examinons-les successivement : La trypsine et la chymotrypsine sont sécrétées en tant que précurseurs inactifs et ceux-ci sont activés au contact de la muqueuse intestinale. L'entéro- kinase des glandes intestinales active le trypsinogène et une petite quantité de trypsine active alors les molécules de trypsinogène (auto-catalyse) et même de chymotrypsinogène. ”

“ Par contre, la solution à 4 mgr. % de trypsine ne résiste point à l'action du toluol. Elle ne digère plus de fibrine, tandis que le témoin, contenant la même dose de trypsine, produit encore une digestion intense. Dans l'expérience précédente, la fibrine, ajoutée en même temps que le toluol, protège, jusqu'à un certain point, l'enzyme de l'action destructrice de l'antiseptique. Une solution de trypsine, saturée de totuol, s'altère beaucoup plus rapidement quand il n'y a pas, ou presque pas de matières ”

“ Elle s'accomplit en milieu neutre, très légèrement acide, ou alcalin : la réaction alcaline (notamment 1/2 p. 100 de carbonate de soude) est surtout favorable. La réaction acide est au contraire peu favorable ; l'action de la trypsine ne s'exerce plus en présence de 2 p. 1000 d'acide chlorhydrique.
Soumises à l'action du suc pancréatique, ou des liqueurs tryptiques, les substances albumineuses sont transformées en protéoses. Supposons qu'on fasse agir sur la fibrine, à une température de 40°, une solution de trypsine : la fibrine est dissoute. La liqueur contient des protéoses. ”

“ L'antitrypsine peut servir à évaluer l'activité protéolytique d'une solution de trypsine. Le sérum conserve son pouvoir antifermentaire assez longtemps pour qu'on puisse en faire une solution-type et, quand le besoin s'en présente, ramener, au moyen de celle-c une solution quelconque de trypsine au même titre. ”

“ Comme des nouveau-nés qui souffraient de la faim ne donnèrent point de trypsine ou des traces seulement, on doit s'attendre à ce que ces monstres n'en donnent point non plus, dans le cas toutefois où la trypsine ne se formerait qu'à la suite de l'introduction de nourriture ou d'eau de l'amnios dans l'estomac. ”

“ L'érepsine, produite dans les éléments glandulaires, est donc bien déversée dans le tube intestinal et y exerce son action sur les albumoses résultant des digestions gastrique et pancréatique.
Cette action s'ajoute à celle de la pepsine et de la trypsine pour pousser la désintégration des matières protéiques jusqu'au stade des produits abiurétiques; les albuminoïdes à moitié dédoublées qui échappent à l'influence de la trypsine sont soumises le long de l'intestin grêle à celle de l'érepsine4. ”

“ Cette conception permettrait de rapprocher intimement la genèse du fibrinferment de la genèse de la trypsine (le trypsinogène du suc pancréatique pur étant transformé en trypsine active par l'entérokinase sécrétée par les cellules des glandes intestinales) .
L'excitation mécanique que nous avons notée (nous acceptons cette hypothèse comme très vraisemblable) n'est pas seule à pouvoir provoquer la sécrétion du profibrinferment ou de la thrombokinase. On peut lui substituer une excitation chimique. ”

“ La trypsine attaque très rapidement la fibrine et digère assez bien le sérum-albumine, mais elle agit beaucoup moins vite sur l'albumine d'oeuf. Les digestions pepsique et trypsique se distinguent par la réaction de milieu et l'étendue de l'hydrolyse produite. ”

“ L'action est d'abord analogue à celle du suc gastrique et de la pepsine, c'est-àdire qu'on obtient d'abord des protéoses primaires, puis des protéoses secondaires et enfin des peptones. Mais, alors que l'action de la pepsine s'arrête là, la trypsine peut donner naissance à de la tyrosine et à de la leucine, qui sont des acides amidés. Cette leucine et cette tyrosine ne proviennent pas d'ailleurs de la transformation intégrale des peptones, car il s'agit ici plutôt de tryplones, et il reste toujours dans la liqueur des peptones qui sont inattaquables par le suc pancréatique. ”

“ On sait que le suc pan-créatique pur renferme une protrypsine sans action pro-léolytique et que ce proferment ne devient de la trypsine que sous l’action de rentérokinase. Un trouble tryptique peut donc tenir non seulement au pancréas mais, dans une certaine mesure aussi à l’intestin. Cette remarque faite, on recherchera la trypsine par les mêmes méthodes cjue celles employées pour la recherche de la pepsine. ”

“ Or, les sels formés par l'union d'un acide et d'une base forte sont précisément ceux qui subissent le plus fortement la dissociation électrolytique. La trypsine ayant, d'après ce savant, un caractère acide, se combine avec des bases fortes pour former des sels facilement dissociables et par conséquent beaucoup plus actifs.
La trypsine en général se montre beaucoup plus indépendante de la réaction du milieu que la pepsine. ”

“ La transformation du zymogène pancréatique, ou protrypsine, en trypsine active semble consister en une oxydation, car si on soumet une solution de zymogène, inactive, à un courant d'oxygène, on obtient très rapidement une solution de trypsine, active ; celle-ci, sous l'influence d'un courant d'oxyde de carbone, revient à l'état de zymogène (Herzen) . Dans l'organisme vivant, cette transformation est éminemment favorisée par la présence dans le sang d'une substance qui est un produit de « sécrétion interne » de la rate. ”

“ Pour Ambard (Sem. médicale 1908) , il faut incriminer une sécrétion pancréatique surabondante survenant chez les cancéreux et liée à l'apepsie. Toutefois le pouvoir antitryptique du sérum et la quantité de trypsine fabriquée par le pancréas ne subissent pas toujours une augmentation parallèle. (Schlecht, Wiens.)
Pour Landais, l'augmentation de l'antitrypsine est due à la destruction exagérée des leucocytes qui mettent en liberté leur ferment protéolytique, qui serait neutralisé par l'antitrypsine. ”

“ Nous nous en convaincrons mieux quand nous parlerons de l'optimum réel.
D'ailleurs, nonobstant ces réserves, le graphique du mouvement de l'action protéolytique de la trypsine sur la gélatine en -présence de différents volumes du sérum examiné apporte des documents particulièrement instructifs ; ils permettent de situer (même sans rechercher l'optimum par la gélification) les -érums rigoureusement à leur place dans l'échelle de l'activité antitryptique. ”

“ Pavlow et ses élèves, et, d’un autre côté, Bayliss et Starling sont d’avis que la vertu digestive est latente dans le suc pancréatique (pro-trypsine) , et qu’elle se développe sous l’action de la kinase. Le rôle de celle-ci consisterait à changer la protrypsine inactive, inopérante, en trypsine active. Il y a des faits plus ou moins analogues dans la science. Par exemple, la pepsine du suc gastrique, obtenue en faisant macérer la muqueuse stomacale dans l’eau pure, n’a pas d’action digestive. ”

“ Sur les milieux contenant de l'albumine des produits de saveur amère prennent naissance sous l'influence des bactéries liquéfiantes ; de même sur le lait dans beaucoup d'espèces. La production du ferment semble aussi plus faible sur bouillon peptoné que sur bouillon peptoné gélatine (Fermi) ..
Il est inutile d'énumérer les espèces qui produisent de la trypsine, puisque ce sont justement ces genres qui liquéfient la gélatine : ils sont ainsi caractérisés comme formateurs de trypsine. Les autres ferments des microbes sont moins bien étudiés. ”

“ La trypsine, comme la pepsine, dissout l'albumine coagulée et la fibrine. Les premiers corps formés, les albumoses primaires et secondaires sont identiques dans les deux digestions. Aussi est-il fort difficile de distinguer un travail trypsique d'un travail pepsique par les produits d'une hydrolyse modérée. Mais la diagnose, ainsi que nous allons le voir, devient beaucoup plus aisée quand on se trouve en présence d'une protéolyse plus profonde.
La digestion trypsique peut être facilement suivie à l'aide de l'acide azotique. Pour les essais, on peut employer : 20 gr. ”